Bactericidal effects of high hydros

Bactericidal effects of high hydrostatic pressure treatment singly or in
combination with natural antimicrobials on Staphylococcus aureus in rice pudding
Rubén Pérez Pulido, Julia Toledo del Árbol, Ma José Grande Burgos, Antonio Gálvez*
Área de Microbiología, Departamento de Ciencias de la Salud, Facultad de Ciencias Experimentales, Universidad de Jaén, 23071 Jaén, Spain
article info
Article history:
Received 5 November 2011
Received in revised form
21 April 2012
Accepted 28 April 2012
Keywords:
Staphylococcus
Hydrostatic pressure
Bacteriocin
Cinnamon oil
Clove oil
Pudding
abstract
Inactivation of Staphylococcus aureus strains by high hydrostatic pressure (HHP) treatments applied
singly or in combination with natural antimicrobials (nisin, enterocin AS-48, cinnamon oil and clove oil)
was investigated in rice pudding. Treatments at 600 MPa for 10 min reduced initial populations of
staphylococci (7.9 log CFU/g) below detectable levels of 1 log CFU/g in the puddings. Treatments at
500 MPa for 5 min (achieving a 2.9-log reduction of viable counts) were investigated singly or in
combination with nisin (200 and 500 IU/g), enterocin AS-48 (25 and 50 mg/g), cinnamon oil (0.2%, vol/wt)
or clove oil (0.25% vol/wt). The combined treatment of enterocin AS-48 (50 mg/g) and HHP caused a nonsignificant
reduction of 0.4e0.6 log cycles compared to HHP alone. Additional reductions of 0.87, 1.3 and
1.8 log cycles were recorded for the combined HHP treatments with nisin (500 IU/g), cinnamon oil (0.2%)
and clove oil (0.25%), respectively. During refrigeration storage for one week, viable counts in puddings
from combined treatments were significantly lower compared to the single HHP treatments, e.g. 1.5
e2.7 log cycles for HHP-nisin (500 IU/g), 1.1e1.3 log cycles for HHP-AS-48 (50 mg/g) or approx. 1.5 log
cycles for HHP-cinnamon oil (0.2%). These results suggest that the time and intensity of HHP treatments
required for inactivation of S. aureus in puddings can be reduced when HHP is applied in combination
with selected natural antimicrobials.

2012 Elsevier Ltd. All rights reserved.
1. Introduction
Staphylococcus aureus is found in the nostrils as well as on the
skin and hair of warm-blooded animals, and up to 30e50% of
human population are carriers (Le Loir, Baron, & Gautier, 2003). It
has been isolated from several foods including meat and meat
products, chicken, milk and dairy products, fermented food items,
salads, vegetables, fish products, etc. (Jørgensen et al., 2005; Seo &
Bohach, 2007; Tamarapu, McKillip, & Drake, 2001; Wieneke,
Roberts, & Gilbert, 1993). Staphylococcal food poisoning is among
the most common causes of reported food-borne diseases (Bean,
Goulding, Matthew, & Angulo, 1997; EFSA, 2010; Le Loir et al.,
2003; Mead et al., 1999; Tirado & Schmidt, 2001; WHO, 2002),
requiring hospital attention by up to 19.5% of the affected individuals
(EFSA, 2010). Most strains are capable of producing one or
more heat stable enterotoxins (Balaban & Rasooly, 2000; Ortega,
Abriouel, Lucas, & Gálvez, 2010) which are the cause of the
gastrointestinal symptoms observed during intoxications
(Tamarapu et al., 2001). S. aureus is also widely disseminated in
nosocomial infections, where it poses a threat due to its acquired
resistance to most common antimicrobials. Methicillin-resistant
S. aureus (MRSA) strains are of particular concern (Ippolito, Leone,
Lauria, Nicastri, & Wenzel, 2010). The presence of enterotoxinproducing
antibiotic-resistant S. aureus strains in foods is an additional
risk for dissemination of antibiotic resistance through the
food chain and also for exposure of immunocompromised individuals
to more virulent strains.
One of the methods proposed to control staphylococci in foods is
high hydrostatic pressure (HHP) treatments (Ananou et al., 2010;
Erkmen & Karatas¸ , 1997; Fioretto et al., 2005; Gervilla, Ferragut, &
Guamis, 2000; López-Pedemonte, Roig-Sagués, De Lamo, Gervilla,
& Guamis, 2007; Raghubeer, Dunne, Farkas, & Ting, 2000; Tassou,
Galiatsatou, Samara, & Mallidis, 2007). HHP has emerged as
a non-thermal process that is becoming widely used to inactivate
microorganisms in foods (Rastogi, Raghavaro, Balasubramaniam,
Niranjan, & Knorr, 2007; Rendueles et al., 2011). Applied at
ambient temperature, HHP destroys vegetative bacterial cells and
inactivates certain enzymes, with minimal changes on the product
* Corresponding author. Present address: Área de Microbiología, Departamento
de Ciencias de la Salud, Facultad de Ciencias Experimentales, Edif. B3, Universidad
de Jaén, Campus Las Lagunillas s/n, 23071 Jaén, Spain. Tel.: þ34 953 212160;
fax: þ34 953 212943.
E-mail address: [e-mail] (A. Gálvez).
Contents lists available at SciVerse ScienceDirect
Food Control
journal homepage: www.elsevier.com/locate/foodcont
0956-7135/$ e see front matter
2012 Elsevier Ltd. All rights reserved.
doi:10.1016/j.foodcont.2012.04.045
Food Control 28 (2012) 19e24
organoleptic properties and nutrients. However, the resistance of
microorganisms to HHP is highly variable, depending on the type of
microorganism, its physiological state, and the food matrix. The
presence of fat, proteins, minerals and sugars serves as a protector
and increases microbial resistance to pressure (Black, Huppertz,
Kelly, & Fitzgerald, 2007). The efficacy of HHP treatments can
improve in combination with other antimicrobial substances such
as bacteriocins, lysozyme, or essential oils (Corbo et al., 2009;
Evrendilek & Balasubramaniam, 2011; García-Graells, Van Opstal,
Vanmuysen, & Michiels, 2003; Masschalck, Van Houdt, &
Michiels, 2001; Somolinos, García, Pagán, & Mackey, 2008;
Vurma, Chung, Shellhammer, Turek, & Yousef, 2006). Nisin is
widely used as a licensed food preservative (Thomas, Clarkson, &
Delves-Broughton, 2000). Enterocin AS-48 is a cyclic antimicrobial
peptide that has been tested singly and on combination with
other hurdles such as food preservatives or pulsed electric fields for
inactivation of bacteria in foods (Abriouel, Lucas, Ben Omar,
Valdivia, & Gálvez, 2010; Maqueda et al., 2004). Given the
increasing number of reports on the incidence of MRSA in food
production animals (such as mastitis in dairy cows) as well as in
foods (Argudín et al., 2012; Vanderhaeghen, Hermans,
Haesebrouck, & Butaye, 2010), the present study was designed to
evaluate the effects of HHP treatment on inactivation of a cocktail of
MRSA strains by HHP in rice pudding as a model dairy food, singly
or in combination with natural antimicrobials (nisin, enterocin AS-
48, clove oil and cinnamon oil).
2. Materials and methods
2.1. Bacterial strains and inoculum preparation
S. aureus strains CCUG 31966, CCUG 35601 and CCUG 41879
were obtained from the Culture Collection of the University of
Göteborg, Sweden. All strains were resistant to methicillin (MRSA).
Strain CCUG 31966 expresses high level methicillin-resistance and
produces enterotoxin B, while strain CCUG 35601 has a minimum
inhibitory concentration (MIC) of 256 mg/l for methicillin. Strains
were grown in braineheart infusion broth (BHI broth, Merck) or
BHI-agar (Merck) and stored at 4 C for routine use or as stocks in
30% glycerol at 80 C.
For preparation of inocula, staphylococcal strains were grown
overnight (20 h) in BHI broth at 37 C. Cultures from each strain
(10 ml each) were mixed in a 50 ml sterile plastic tube to prepare
the cocktail of strains. The mixture was centrifuged (4.500  g,
15 min) and the sediment resuspended in sterile saline solution (ca.
9.8 log CFU/ml). This mixed suspension of strains was used for
inoculation of rice pudding.
2.2. Sample inoculation and HHP treatment
Commercial rice puddings (Dia, Spain; pH 6.65  0.08) were
purchased from a local supermarket as a refrigerated ready to eat
food. Upon arrival to the laboratory, puddings were stored at 4 C
until use (not more than 24 h). Puddings contained milk (70%), rice
(10%), milk fat, grated lemon peel, corn starch, ground cinnamon and
other flavouring ingredients. Puddings were inoculated at ambient
temperature with the cocktail of S. aureus strains at final cell
densities of 7.9, 6.8 or 5.7 log CFU/g, thoroughly mixed and distributed
in 25 g aliquots into vacuum-sealed polyethyleneepolyamide
plastic bags. The bags were incubated in a water bath (Memmert)
at 22 C for 30 min and treated by HHP at pressures of 0, 300, 400,
500 and 600 MPa for 10 min. Treatments were done in duplicate
(two pudding samples per treatment). HHP treatments were carried
out by using a Stansted Fluid Power LTD HHP equipment (SFP, Essex,
UK) suited with a 2.5 l vessel capable of operating in a pressure range
of 0e700 MPa, under non-thermal conditions. Come-up speed was
75 MPa/min. Decompression was immediate. Pressurization fluid
was water with added 5% propyleneglycol. The temperature inside
the vessel during treatments ranged between 23 and 27 C. The
temperature of pudding samples was 24 C at the end of treatment.
After treatments, portions of rice pudding (25 g) in duplicate
were mixed with 25 ml of ice-cold buffered peptone water
(yielding a 1:1 wt/vol dilution) and serially diluted with the same
solution. Dilutions were plated in triplicate onto Trypticase Soya
Agar (Scharlab, Barcelona). Plates were incubated at 37 C for 48 h.
The average numbers of colonies per plate were used to calculate
the sample viable cell concentration, expressed as the decimal
logarithm of colony forming units (log CFU) per gram of sample.
The detection limit was 1.0 log CFU/g. Control puddings were
processed in the same way in order to discard the presence of
background microbiota.
2.3. Combined treatments with bacteriocins and essential oils
A stock solution of nisin (105 IU/ml) was prepared by dissolving
commercial nisin 106 IU/g (Sigma Chemical Co., Madrid, Spain) in
100 mg/ml of sterile 0.02 N HCl. The solution was heated at 80 C for
7 min, and kept at 20 C until use. Nisin was added to obtain final
concentrations of 0, 200 and 500 IU/g of pudding.
Enterocin AS-48

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ผลของการรักษาความดันสูง bactericidal เดี่ยว หรือในร่วมกับ antimicrobials ธรรมชาติกับหมอเทศข้างลาย Staphylococcus ในพุดดิ้งข้าวRubén Pérez Pulido จูเลีย Toledo del Árbol, Ma José แกรนด์เบอร์กอส Antonio Gálvez *Área de Microbiología, Departamento เด Ciencias เดอลา Salud, Experimentales Facultad de Ciencias, Universidad de Jaén, 23071 Jaén สเปนข้อมูลบทความบทความประวัติ:ได้รับ 5 2554 พฤศจิกายนได้รับในแบบฟอร์มการปรับปรุง21 2555 เมษายนยอมรับ 28 2012 เมษายนคำสำคัญ:StaphylococcusความดันBacteriocinน้ำมันอบเชยน้ำมันกานพลูพุดดิ้งบทคัดย่อยกเลิกการเรียกสายพันธุ์หมอเทศข้างลาย Staphylococcus โดยใช้รักษาความดันหยุดนิ่งสูง (HHP)เดี่ยว หรือใช้ร่วมกับ antimicrobials ธรรมชาติ (nisin, enterocin เป็น 48 อบเชย และกานพลูน้ำมัน)ถูกสอบสวนในพุดดิ้งข้าว ประชากรเริ่มต้นของการลดลงแรง 600 สำหรับ 10 นาทีstaphylococci (7.9 ล็อก CFU/g) ต่ำกว่าระดับอาสา 1 ล็อก CFU/g ในการเลี่ยงดอกไม้ การรักษาที่แรง 500 5 นาที (ลดล็อก 2.9 ตรวจนับได้บรรลุ) ถูกสอบสวนเดี่ยว หรือในร่วมกับ nisin (200 และ 500 IU/g), enterocin เป็น 48 (25 และ 50 mg/g), ซินนามอนน้ำมัน (0.2%, vol/wt)หรือน้ำมันกานพลู (vol 0.25% wt) การรวมการรักษา enterocin AS-48 (50 mg/g) และ HHP เกิดเป็น nonsignificantลดรอบล็อก 0.4e0.6 เปรียบเทียบกับ HHP เพียงอย่างเดียว ลดเพิ่มเติมของ 0.87, 1.3 และ1.8 รอบล็อกบันทึกสำหรับการรักษา HHP รวมกับน้ำมัน nisin (500 IU/กรัม), อบเชย (0.2%)และกานพลูน้ำมัน (0.25%), ตามลำดับ ระหว่างการเก็บแช่แข็งในหนึ่งสัปดาห์ ตรวจนับได้ในเลี่ยงดอกไม้จากการรักษารวมได้อย่างมีนัยสำคัญต่ำกว่าเมื่อเทียบกับที่เดียว HHP รักษา 1.5 เช่นรอบล็อก e2.7 สำหรับ HHP nisin (g 500 IU), ล็อก 1.1e1.3 รอบ HHP-AS-48 (50 mg/g) หรือประมาณ 1.5 ล็อกรอบน้ำมันอบเชย HHP (0.2%) ผลลัพธ์เหล่านี้แนะนำที่เวลาและความเข้มของการรักษา HHPจำเป็นสำหรับยกเลิกการเรียกหมอเทศข้างลาย S. ในเลี่ยงดอกไม้จะลดลงเมื่อมีใช้ HHP ร่วมกับ antimicrobials ธรรมชาติที่เลือก2012 Elsevier จำกัด สงวนลิขสิทธิ์ทั้งหมด1. บทนำหมอเทศข้างลาย staphylococcus พบในจมูกเช่นณวันสัตว์เลือดอุ่น และ ถึง 30e50% ของเส้นผมและผิวประชากรมนุษย์เป็นพาหะ (เลอ Loir บารอน & Gautier, 2003) มันได้แยกต่างหากจากอาหารต่าง ๆ รวมทั้งเนื้อสัตว์และเนื้อสัตว์ผลิตภัณฑ์ ไก่ นม และ ผลิตภัณฑ์จากนม อาหารดองสินค้าสลัด ผัก ปลา ผลิตภัณฑ์ ฯลฯ (Jørgensen et al., 2005 Seo และBohach, 2007 Tamarapu, McKillip และเด รก 2001 Wienekeโรเบิตส์ & Gilbert, 1993) เป็น staphylococcal อาหารเป็นพิษสาเหตุที่พบบ่อยที่สุดโรครายงานเชื่อว่าอาหาร (ถั่วGoulding, Matthew, & Angulo, 1997 EFSA, 2010 เลอ Loir et al.,2003 มีด et al., 1999 Tirado & Schmidt, 2001 ที่ 2002),ต้องการความสนใจของโรงพยาบาลได้ถึง 19.5% ของบุคคลที่ได้รับผลกระทบ(EFSA, 2010) สายพันธุ์ส่วนใหญ่มีความสามารถในการผลิตหนึ่ง หรือเพิ่มเติมความร้อน enterotoxins มั่นคง (Balaban & Rasooly, 2000 OrtegaAbriouel, Lucas และ Gálvez, 2010) ซึ่งเป็นสาเหตุของการอาการระบบสังเกตระหว่าง intoxications(Tamarapu et al., 2001) หมอเทศข้างลาย S. อย่างกว้างขวางนอกจากนี้ยังได้เผยแพร่ในการติดเชื้อ nosocomial ซึ่งมันส่อเค้าคุกคามเนื่องจากการได้รับความต้านทานการ antimicrobials มากที่สุด ทนทานต่อ methicillinสายพันธุ์ S. หมอเทศข้างลาย (MRSA) มีความกังวลโดยเฉพาะ (Ippolito เซียร์ราลีโอนLauria, Nicastri และ Wenzel, 2010) ของ enterotoxinproducingสายพันธุ์ S. หมอเทศข้างลายดื้อยาปฏิชีวนะในอาหารคือ เพิ่มเติมความเสี่ยงสำหรับสารต้านทานยาปฏิชีวนะผ่านการห่วงโซ่อาหารและ สำหรับถ่ายภาพบุคคลที่ภูมิคุ้มกันกับสายพันธุ์ virulent มากขึ้นวิธีการนำเสนอการควบคุม staphylococci ในอาหารคือสูงความดัน (HHP) รักษา (Ananou et al., 2010Erkmen & Karatas¸, 1997 Fioretto et al., 2005 Gervilla, Ferragut, &Guamis, 2000 Lamo เด López-Pedemonte, Roig-Sagués Gervilla& Guamis, 2007 Raghubeer, Dunne, Farkas, Ting, 2000; & TassouGaliatsatou โต๊ะ & Mallidis, 2007) HHP ได้ผงาดขึ้นเป็นกระบวนการไม่ใช่ความร้อนที่กลายเป็นอย่างกว้างขวางใช้ยกจุลินทรีย์ในอาหาร (Rastogi, Raghavaro, BalasubramaniamNiranjan, & Knorr, 2007 Rendueles et al., 2011) ใช้ที่อุณหภูมิ HHP ทำลายเซลล์แบคทีเรียผักเรื้อรัง และยกเลิกเรียกเอนไซม์บาง มีการเปลี่ยนแปลงน้อยที่สุดในผลิตภัณฑ์* ผู้สอดคล้องกัน ที่อยู่ปัจจุบัน: Área de Microbiología, Departamentoเด Ciencias เดอลา Salud, Facultad เด Ciencias Experimentales, Edif B3, Universidadเดอ Jaén วิทยาเขตลา Lagunillas s/n, Jaén สเปน 23071 โทร.: þ34 953 212160โทรสาร: þ34 953 212943ที่อยู่อีเมล: (A. Gálvez) ใน [e-mail]เนื้อหารายการ SciVerse ScienceDirectควบคุมอาหารหน้าแรกของสมุดรายวัน: www.elsevier.com/locate/foodcont0956-7135 / $ e ดูหน้าเรื่อง 2012 Elsevier จำกัด สงวนลิขสิทธิ์ทั้งหมดdoi:10.1016/j.foodcont.2012.04.045ควบคุมอาหาร 28 19e24 (2012)คุณสมบัติ organoleptic และสารอาหาร อย่างไรก็ตาม ความต้านทานของจุลินทรีย์การ HHP จะผันแปรสูง ขึ้นอยู่กับชนิดของจุลินทรีย์ สภาพสรีรวิทยา และเมตริกซ์อาหาร ที่ของไขมัน โปรตีน เกลือแร่ และน้ำตาลทำหน้าที่เป็นตัวป้องกันการและเพิ่มจุลินทรีย์ทนทานต่อความดัน (สีดำ Huppertzเคลลี่ & ห้อง 2007) ประสิทธิภาพของการรักษา HHPปรับปรุงร่วมกับสารต้านจุลชีพอื่น ๆ เช่นเป็น bacteriocins, lysozyme น้ำมันหอมระเหย (Corbo et al., 2009Evrendilek และ Balasubramaniam, 2011 García Graells, Van OpstalVanmuysen, & Michiels, 2003 Masschalck, Van Houdt, &Michiels, 2001 Somolinos, García, Pagán, & Mackey, 2008Vurma, Chung, Shellhammer, Turek และยูซุฟ บิน 2006) มี Nisinใช้เป็นอาหารใบอนุญาต preservative (Thomas เซีย &Delves Broughton, 2000) Enterocin เป็น 48 จะเป็นวัฏจักรจุลินทรีย์เพปไทด์ที่ได้รับการทดสอบเดี่ยว และร่วมกับอุปสรรคอื่น ๆ เช่นอาหารสารกันบูดหรือพัลเขตไฟฟ้าสำหรับยกเลิกการเรียกของแบคทีเรียในอาหาร (Abriouel, Lucas, Omar Benทางไปยัง และ Gálvez, 2010 Maqueda et al., 2004) ได้รับการจำนวนรายงานอุบัติการณ์ของ MRSA ในอาหารเพิ่มขึ้นผลิตสัตว์ (เช่น mastitis นม) เช่นในที่อาหาร (Argudín et al., 2012 Vanderhaeghen, HermansHaesebrouck, & Butaye, 2010), การศึกษาปัจจุบันถูกออกแบบให้ประเมินผลของการบำบัด HHP ยกเลิกการเรียกของค็อกเทลของMRSA สายพันธุ์ โดย HHP ในพุดดิ้งข้าวเป็นอาหารโคนมรุ่น โดดเดี่ยวหรือใช้ร่วมกับ antimicrobials ธรรมชาติ (nisin, enterocin เป็น -48 กานพลูน้ำมันอบเชยและน้ำมัน)2. วัสดุและวิธีการ2.1. แบคทีเรียสายพันธุ์และการเตรียม inoculumสายพันธุ์ S. หมอเทศข้างลาย CCUG 31966, CCUG 35601 และ CCUG 41879ได้รับมาจากการรวบรวมวัฒนธรรมของมหาวิทยาลัยGöteborg สวีเดน ทุกสายพันธุ์ทนต่อ methicillin (MRSA)ต้องใช้ CCUG 31966 แสดงระดับสูงต้าน methicillin และสร้าง enterotoxin B ในขณะที่ต้องใช้ CCUG 35601 มีน้อยลิปกลอสไขความเข้มข้น (MIC) ของ 256 mg/l สำหรับ methicillin สายพันธุ์มีการเติบโตใน braineheart คอนกรีตซุป (ซุป BHI เมอร์ค) หรือBHI-agar (เมอร์ค) และเก็บไว้ที่ C 4 ใช้เป็นประจำ หรือ เป็นหุ้นในกลีเซอร 30% ที่ 80 cสำหรับการเตรียมการของ inocula, staphylococcal สายพันธุ์ที่ปลูกแอร์พอร์ตโอเวอร์ไนท์ (20 h) ใน BHI ซุปที่ 37 C. วัฒนธรรมจากแต่ละต้องใช้(10 ml ละ) ได้ผสม 50 ml พลาสติกหลอดใส่เพื่อเตรียมความพร้อมค็อกเทลของสายพันธุ์ ส่วนผสมถูก centrifuged (4.500 กรัม15 นาที) และตะกอน resuspended ในใส่เกลือ (ca9.8 ล็อก CFU/ml) นี้ผสมสายพันธุ์ระงับใช้สำหรับinoculation ของพุดดิ้งข้าว2.2. inoculation และ HHP รักษาตัวอย่างค้าข้าวเลี่ยงดอกไม้ (Dia สเปน pH 6.65 0.08) ได้ซื้อจากซุปเปอร์มาร์เก็ตเป็นพร้อมตู้เย็นและกินอาหาร เมื่อมาถึงห้องปฏิบัติการ เลี่ยงดอกไม้ถูกเก็บไว้ที่ 4 Cจนกระทั่งใช้ (ไม่เกิน 24 ชม) ข้าวนมเลี่ยงดอกไม้อยู่ (70%),(10%), ไขมันนม เปลือกมะนาวยัง แป้งข้าวโพด ดินราคาอบเชย และส่วนผสมอื่น ๆ ปรุง เลี่ยงดอกไม้ถูก inoculated ที่แวดล้อมสายพันธุ์อุณหภูมิกับค็อกเทลของหมอเทศข้างลาย S. ที่เซลล์สุดท้ายความหนาแน่นของ 7.9, 6.8 หรือ 5.7 ระบบ CFU/g ผสม และกระจายอย่างทั่วถึงใน aliquots 25 กรัมลงใน vacuum-sealed polyethyleneepolyamideถุงพลาสติก ถุงถูก incubated ในห้องน้ำ (ความ)ที่ 22 C ใน 30 นาที และรับการรักษา โดย HHP ที่ความดัน 0, 300, 400500 และ 600 แรงสำหรับ 10 นาทีทำซ้ำในการรักษา(พุดดิ้งมาทดสอบต่อรักษา) HHP บำบัดได้ดำเนินการออก โดยใช้อุปกรณ์สแตนสเตดและน้ำมันไฟฟ้า LTD HHP (SFP เอสเซ็กซ์สหราชอาณาจักร) ที่เหมาะสมกับความสามารถในการปฏิบัติงานในช่วงความดัน 2.5 l เรือของแรง 0e700 ภายใต้เงื่อนไขที่ไม่ใช่ความร้อน ความเร็วขึ้นมาได้อัดแรง/นาที 75 ได้ทันที น้ำมัน pressurizationน้ำ propyleneglycol 5% เพิ่มขึ้น อุณหภูมิภายในเรือในระหว่างการรักษาอยู่ในช่วงระหว่าง C. 23 และ 27อุณหภูมิของตัวอย่างพุดดิ้ง 24 C ที่จุดสิ้นสุดของการรักษาได้หลังจากรักษา บางส่วนของปายาส (25 กรัม) สำเนารวมกับ 25 ml ถูกบัฟเฟอร์ peptone ฉ่ำน้ำ(ผลผลิตที่เจือจาง 1:1 wt/vol) และ serially แตกออก ด้วยเหมือนกันการแก้ปัญหา Dilutions ถูกชุบใน triplicate บน Trypticase เหลืองAgar (Scharlab บาร์เซโลน่า) แผ่นก็ incubated ที่ 37 C สำหรับ 48 hตัวเลขเฉลี่ยของอาณานิคมต่อแผ่นที่ใช้ในการคำนวณความเข้มข้นได้เซลล์ตัวอย่าง แสดงเป็นจุดทศนิยมลอการิทึมของอาณานิคมขึ้นหน่วย (ล็อก CFU) ต่อกรัมของตัวอย่างตรวจสอบวงเงินถูกล็อก 1.0 เลี่ยงดอกไม้ถูกควบคุม CFU/กรัมดำเนินการในลักษณะเดียวกันเพื่อยกเลิกการปรากฏตัวของmicrobiota พื้นหลัง2.3. รวมนวด bacteriocins และน้ำมันหอมระเหยปัญหาหุ้นของ nisin (105 IU/ml) ถูกเตรียม โดยยุบnisin พาณิชย์ 106 IU/g (ซิกเคมี Co. มาดริด สเปน) ใน100 mg/ml กอซ 0.02 N HCl โซลูชันถูกความร้อนที่ 80 C สำหรับนาทีที่ 7 และเก็บไว้ที่ 20 C จนถึงใช้ เพิ่ม Nisin รับสุดท้ายความเข้มข้น 0, 200 และ 500 IU/g ของพุดดิ้งเป็น Enterocin-48

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ผลกระทบที่ฆ่าเชื้อแบคทีเรียของการรักษาความดันสูงหรือเดี่ยวร่วมกับยาต้านจุลชีพธรรมชาติบนเชื้อ Staphylococcus aureus ในพุดดิ้งข้าวRubénPérez Pulido จูเลียโทเลโดเดลÁrbolแม่Joséแกรนด์กอสอันโตนิโอGálvez * พื้นที่จุลขีววิทยา, แผนกเดอ Ciencias de la Salud, Facultad de Ciencias Experimentales, Universidad de Jaén, 23071 Jaén, สเปนข้อมูลบทความประวัติศาสตร์บทความที่ได้รับ5 พฤศจิกายน 2011 ที่ได้รับในรูปแบบปรับปรุง21 เมษายน 2012 ได้รับการยอมรับ 28 เมษายน 2012 คำสำคัญ: Staphylococcus ความดันแบคทีเรียอบเชยน้ำมันกานพลูน้ำมันพุดดิ้งนามธรรมพลังสายพันธุ์เชื้อStaphylococcus aureus โดยสูง ความดัน (HHP) การรักษานำไปใช้โดยลำพังหรือใช้ร่วมกับยาต้านจุลชีพธรรมชาติ(ไนซิน, enterocin AS-48, น้ำมันอบเชยและกานพลูน้ำมัน) ถูกตรวจสอบในพุดดิ้งข้าว การรักษาที่ 600 เมกะปาสคาลเป็นเวลา 10 นาทีลดประชากรเริ่มต้นของเชื้อ(7.9 log CFU / g) ต่ำกว่าระดับที่ตรวจพบ 1 log CFU / g ในพุดดิ้ง การรักษาที่500 MPa เป็นเวลา 5 นาที (การบรรลุการลดลง 2.9 เข้าสู่ระบบของการนับที่ทำงานได้) ได้รับการตรวจสอบโดยลำพังหรือร่วมกับไนซิน(200 และ 500 IU / g) enterocin AS-48 (25 และ 50 mg / g) น้ำมันอบเชย (0.2% ปริมาตร / น้ำหนัก) หรือน้ำมันกานพลู (0.25% ปริมาตร / น้ำหนัก) การรักษารวมของ enterocin AS-48 (50 mg / g) และ HHP ที่เกิดจากการไม่มีนัยสำคัญการลดลงของ0.4e0.6 รอบล็อกเมื่อเทียบกับ HHP เพียงอย่างเดียว ลดเพิ่มเติม 0.87, 1.3 และ1.8 รอบเข้าสู่ระบบที่ถูกบันทึกไว้สำหรับการรักษา HHP รวมกับไนซิน (500 IU / g) น้ำมันอบเชย (0.2%) และน้ำมันกานพลู (0.25%) ตามลำดับ ระหว่างการเก็บรักษาเครื่องทำความเย็นเป็นเวลาหนึ่งสัปดาห์นับทำงานได้ในพุดดิ้งจากการรักษาร่วมกันอย่างมีนัยสำคัญต่ำเมื่อเทียบกับการรักษา HHP เดียวเช่น 1.5 e2.7 รอบล็อกสำหรับ HHP-ไนซิน (500 IU / g) 1.1e1.3 รอบล็อกสำหรับ HHP -as-48 (50 mg / g) หรือประมาณ 1.5 การเข้าสู่ระบบวงจรสำหรับน้ำมันHHP-อบเชย (0.2%) ผลการศึกษานี้แสดงให้เห็นว่าเวลาและความรุนแรงของการรักษา HHP ที่จำเป็นสำหรับการใช้งานของเชื้อ S. aureus ในพุดดิ้งจะลดลงเมื่อ HHP ถูกนำไปใช้ในการรวมกันกับธรรมชาติเลือกยาต้านจุลชีพ.? 2012 เอลส์ จำกัด สงวนลิขสิทธิ์. 1 บทนำเชื้อ Staphylococcus aureus พบในจมูกเช่นเดียวกับบนผิวและผมของสัตว์เลือดอุ่นและถึง30e50% ของประชากรมนุษย์เป็นพาหะ(Le Loir บารอนและโกติเยร์, 2003) มันได้รับการแยกออกจากอาหารหลายรวมทั้งเนื้อสัตว์และผลิตภัณฑ์เนื้อไก่นมและผลิตภัณฑ์จากนม, รายการอาหารหมักสลัด, ผัก, ผลิตภัณฑ์ปลา ฯลฯ (Jørgensen et al, 2005;. SEO & Bohach 2007; Tamarapu, McKillip และเป็ด 2001; Wieneke, โรเบิร์ตและกิลเบิร์ 1993) โรคอาหารเป็นพิษ staphylococcal เป็นหนึ่งในสาเหตุที่พบบ่อยที่สุดของการรายงานโรคที่เกิดจากอาหาร(ถั่วGoulding แมทธิวและ Angulo, 1997; EFSA 2010; Le Loir เอตแอล. 2003; มธุรส et al, 1999;. Tirado และชมิดท์ 2001; WHO, 2002), ต้องให้ความสนใจในโรงพยาบาลได้ถึง 19.5% ของบุคคลที่ได้รับผลกระทบ(EFSA 2010) สายพันธุ์ส่วนใหญ่มีความสามารถในการผลิตหนึ่งหรืออื่น ๆ ความร้อน Enterotoxins ที่มีเสถียรภาพ (Balaban & Rasooly 2000; กาซา Abriouel ลูคัสและGálvez 2010) ซึ่งเป็นสาเหตุของอาการระบบทางเดินอาหารเป็นพิษในระหว่างการสังเกต(. Tamarapu, et al, 2001) เชื้อ S. aureus ยังเป็นที่เผยแพร่กันอย่างแพร่หลายในการติดเชื้อในโรงพยาบาลที่เป็นภัยคุกคามเนื่องจากการได้มาของความต้านทานต่อยาต้านจุลชีพที่พบมากที่สุด methicillin ทนเอส aureus (MRSA) สายพันธุ์ที่มีความกังวลโดยเฉพาะอย่างยิ่ง (Ippolito, ราลีโอนLauria, Nicastri และเวนเซล 2010) การปรากฏตัวของ enterotoxinproducing ทนต่อยาปฏิชีวนะสายพันธุ์เชื้อ S. aureus ในอาหารคือการเพิ่มความเสี่ยงในการแพร่กระจายของความต้านทานยาปฏิชีวนะผ่านทางห่วงโซ่อาหารและสำหรับการเปิดรับบุคคลที่มีภาวะภูมิคุ้มกันบกพร่องของให้มากขึ้นสายพันธุ์ที่รุนแรง. หนึ่งในวิธีการที่นำเสนอในการควบคุมเชื้อในอาหารเป็นสูงความดัน (HHP) การรักษา (Ananou et al, 2010;. Erkmen และKarataş 1997. Fioretto et al, 2005; Gervilla, Ferragut และGuamis, 2000; López-Pedemonte, Roig-Sagues เด Lamo, Gervilla, และ Guamis 2007; Raghubeer ดันน์, ฟาร์คัสและ Ting 2000; Tassou, Galiatsatou, Samara และ Mallidis 2007) HHP ได้กลายเป็นกระบวนการที่ไม่ใช่ความร้อนที่กำลังเป็นที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในการยับยั้งเชื้อจุลินทรีย์ในอาหาร(Rastogi, Raghavaro, Balasubramaniam, Niranjan และคนอร์, 2007. Rendueles et al, 2011) นำไปใช้ที่อุณหภูมิ HHP ทำลายเซลล์พืชและแบคทีเรียที่ยับยั้งเอนไซม์บางอย่างมีการเปลี่ยนแปลงน้อยที่สุดในผลิตภัณฑ์* ผู้รับผิดชอบ ที่อยู่ปัจจุบันพื้นที่จุลขีววิทยา, แผนกเดอCiencias de la Salud, Facultad de Ciencias Experimentales, อีดิ ธ B3, Universidad de Jaénวิทยาเขตลา Lagunillas s / n, 23071 Jaén, สเปน Tel .: þ34 953 212160; แฟกซ์: þ34 953 212943. อีเมล์: [e-mail] (กGálvez). รายการเนื้อหาที่มีอยู่ใน SciVerse ScienceDirect ควบคุมอาหารวารสารหน้าแรก: www.elsevier.com/locate/foodcont 0956 -7135 / $ อีเห็นว่าหน้า? . 2012 เอลส์ จำกัด สงวนลิขสิทธิ์ดอย: 10.1016 / j.foodcont.2012.04.045 อาหารควบคุม 28 (2012) 19e24 คุณสมบัติทางประสาทสัมผัสและสารอาหาร อย่างไรก็ตามความต้านทานของเชื้อโรคไปสู่ ​​HHP เป็นตัวแปรขึ้นอยู่กับชนิดของจุลินทรีย์ที่รัฐทางสรีรวิทยาของตนและเมทริกซ์อาหาร การปรากฏตัวของไขมันโปรตีนเกลือแร่และน้ำตาลทำหน้าที่เป็นผู้พิทักษ์และเพิ่มความต้านทานต่อแรงกดดันของจุลินทรีย์ (สีดำ, Huppertz, เคลลี่และฟิตซ์เจอรัลด์, 2007) ประสิทธิภาพของการรักษา HHP สามารถปรับปรุงในการทำงานร่วมกับสารต้านจุลชีพอื่นๆ เช่นเป็นbacteriocins, ไลโซไซม์หรือน้ำมันหอมระเหย (Corbo et al, 2009;. Evrendilek และ Balasubramaniam 2011; García-Graells แวน Opstal, Vanmuysen และ Michiels 2003; Masschalck แวน Houdt และMichiels 2001; Somolinos การ์เซีย, ศาสนาและแมก 2008; Vurma จุง, Shellhammer, Turek และ Yousef 2006) ไนซินมีการใช้กันอย่างแพร่หลายเป็นสารกันบูดอาหารได้รับใบอนุญาต (โทมัส Clarkson และขุดคุ้ย-Broughton, 2000) Enterocin AS-48 เป็นยาต้านจุลชีพวงจรเปปไทด์ที่ได้รับการทดสอบโดยลำพังและร่วมกับอุปสรรคอื่นๆ เช่นสารกันบูดอาหารหรือสนามไฟฟ้าชีพจรสำหรับการใช้งานของแบคทีเรียในอาหาร(Abriouel ลูคัส, เบนโอมาร์Valdivia และGálvez 2010; Maqueda et al., 2004) ได้รับการเพิ่มจำนวนของรายงานอุบัติการณ์ของเชื้อ MRSA ในอาหารสัตว์ที่ผลิต(เช่นโรคเต้านมอักเสบในวัวนม) เช่นเดียวกับในอาหาร(Argudín et al, 2012;. Vanderhaeghen, Hermans, Haesebrouck และ Butaye 2010) ปัจจุบัน ศึกษาได้รับการออกแบบมาเพื่อประเมินผลกระทบของการรักษาHHP ในการใช้งานของเครื่องดื่มค็อกเทลหนึ่งของสายพันธุ์เชื้อMRSA โดย HHP ในพุดดิ้งข้าวเป็นอาหารที่ทำจากนมรูปแบบเดี่ยว ๆหรือใช้ร่วมกับยาต้านจุลชีพธรรมชาติ (ไนซิน, enterocin ย่คด48, น้ำมันกานพลูอบเชยและน้ำมัน) . 2 วัสดุและวิธีการ2.1 สายพันธุ์แบคทีเรียและการเตรียมหัวเชื้อเอส สายพันธุ์เชื้อ CCUG 31966, 35601 และ CCUG CCUG 41879 ที่ได้รับจากการสะสมวัฒนธรรมของมหาวิทยาลัยGöteborg, สวีเดน ทุกสายพันธุ์มีความทนทานต่อ methicillin (MRSA). สายพันธุ์ CCUG 31,966 เป็นการแสดงออกถึงความต้านทาน methicillin ระดับสูงและผลิตenterotoxin B ในขณะที่สายพันธุ์ CCUG 35601 มีต่ำสุดเข้มข้นยับยั้ง(MIC) 256 มก. / ลิตรสำหรับ methicillin สายพันธุ์ที่ปลูกในน้ำซุปแช่ braineheart (น้ำซุป BHI เมอร์ค) หรือ BHI-agar (เมอร์ค) และเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลาการใช้งานประจำหรือเป็นหุ้นในกลีเซอรีน30% ที่ 80 องศาเซลเซียสสำหรับการเตรียมinocula สายพันธุ์ staphylococcal ปลูกในชั่วข้ามคืน( 20 ชั่วโมง) ในน้ำซุป BHI ที่ 37 องศาเซลเซียสจากวัฒนธรรมแต่ละสายพันธุ์(10 มล. ในแต่ละ) ถูกผสมในหลอดพลาสติกปลอดเชื้อ 50 มล. เพื่อเตรียมความพร้อมค๊อกเทลของสายพันธุ์ ส่วนผสมที่ถูกหมุนเหวี่ยง (4.500? กรัม15 นาที) และตะกอน resuspended ในน้ำเกลือปลอดเชื้อ (แคลิฟอร์เนีย9.8 log CFU / ml) นี้ระงับการผสมสายพันธุ์ที่ใช้สำหรับการฉีดวัคซีนของพุดดิ้งข้าว. 2.2 ตัวอย่างการฉีดวัคซีนและการรักษา HHP พุดดิ้งข้าวพาณิชย์ (Dia, สเปน; pH 6.65 0.08) ได้รับซื้อมาจากซูเปอร์มาร์เก็ตในท้องถิ่นเป็นตู้เย็นพร้อมที่จะกินอาหาร เมื่อมาถึงยังห้องปฏิบัติการ, พุดดิ้งถูกเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียสจนการใช้งาน(ไม่เกิน 24 ชั่วโมง) พุดดิ้งนมที่มีอยู่ (70%) ข้าว(10%), ไขมันนม, เปลือกมะนาวขูดแป้งข้าวโพด, อบเชยและส่วนผสมเครื่องปรุงอื่นๆ พุดดิ้งถูกเชื้อที่แวดล้อมอุณหภูมิด้วยเครื่องดื่มค็อกเทลของเชื้อ S. aureus สายพันธุ์เซลล์สุดท้ายที่มีความหนาแน่น7.9, 6.8 หรือ 5.7 log CFU / g ผสมและจัดจำหน่ายใน25 กรัม aliquots เข้าไปในสูญญากาศปิดผนึก polyethyleneepolyamide ถุงพลาสติก ถุงถูกบ่มในอ่างน้ำ (MEMMERT) วันที่ 22 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 นาทีและรับการรักษาโดย HHP ที่แรงกดดันจาก 0, 300, 400, 500 และ 600 เมกะปาสคาลเป็นเวลา 10 นาที การรักษาที่ถูกทำในที่ซ้ำกัน(สองตัวอย่างพุดดิ้งต่อการรักษา) การรักษา HHP ได้ดำเนินการโดยใช้อุปกรณ์สแตนสเต็ฟลูอิดเพาเวอร์จำกัด HHP (SFP เอสเซ็กซ์สหราชอาณาจักร) เหมาะกับเรือลิตร 2.5 ความสามารถในการดำเนินงานในช่วงที่ความดันของ0e700 MPa ภายใต้เงื่อนไขที่ไม่ใช่ความร้อน ความเร็วขึ้นมาเป็น75 เมกะปาสคาล / นาที การบีบอัดทันที ของเหลวแรงดันน้ำที่มีเพิ่ม 5% propyleneglycol อุณหภูมิภายในเรือในระหว่างการรักษาอยู่ในช่วงระหว่างวันที่ 23 และ 27 องศาเซลเซียสอุณหภูมิของตัวอย่างพุดดิ้ง24 C ในตอนท้ายของการรักษา. หลังจากการรักษาบางส่วนของพุดดิ้งข้าว (25 กรัม) ในที่ซ้ำกันได้รับการผสมกับ25 มิลลิลิตรเย็น น้ำเปปโตนบัฟเฟอร์(ผลผลิต 1: 1 โดยน้ำหนัก / ปริมาตรลดสัดส่วน) และปรับลดลำดับเดียวกับการแก้ปัญหา เจือจางถูกชุบเพิ่มขึ้นสามเท่าบน Trypticase ถั่วเหลืองวุ้น(Scharlab, บาร์เซโลนา) แผ่นถูกบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชม. ตัวเลขเฉลี่ยของโคโลนีต่อแผ่นถูกนำมาใช้ในการคำนวณความเข้มข้นของเซลล์ตัวอย่างที่ทำงานได้แสดงเป็นทศนิยมลอการิทึมของอาณานิคมสร้างหน่วย(log CFU) ต่อกรัมของตัวอย่าง. ขีด จำกัด ของการตรวจสอบคือ 1.0 เข้าสู่ระบบโคโลนี / กรัม พุดดิ้งควบคุมถูกประมวลผลในลักษณะเดียวกันเพื่อที่จะยกเลิกการปรากฏตัวของพื้นหลังmicrobiota. 2.3 การรักษาร่วมกับการ bacteriocins และน้ำมันหอมระเหยวิธีการแก้ปัญหาสต็อกของไนซิน(105 IU / ml) ถูกจัดทำขึ้นโดยการละลายไนซิเชิงพาณิชย์106 IU / g (ซิกม่า Chemical Co. , มาดริด, สเปน) ใน100 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรหมัน 0.02 ไม่มี HCl การแก้ปัญหาถูกความร้อนที่ 80 องศาเซลเซียสเป็นเวลา7 นาทีและเก็บไว้ที่ 20 องศาเซลเซียสจนการใช้งาน ไนซินถูกบันทึกสุดท้ายที่จะได้รับความเข้มข้น 0, 200 และ 500 IU / กรัมของพุดดิ้ง. Enterocin AS-48

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ผลฆ่าเชื้อแบคทีเรียของการรักษาความดันสูงเดี่ยวๆหรือร่วมกับยาต้านจุลชีพใน
ธรรมชาติต่อเชื้อ Staphylococcus aureus ในพุดดิ้งข้าว
ถูé n เปเรซ pulido จูเลีย โทเลโด เดล Á rbol แม่โฮเซ Grande Burgos , อันโตนิโอ กรัม . kgm lvez *
Á rea เดอ microbiolog í a , departamento เดเซียนเซียส de la สุขภาพ , facultad เดอ เซียนเซียส experimentales , Universidad เดอ จาé n é n 23071 จาเปน

บทความข้อมูลประวัติบทความ : 5 พฤศจิกายน 2554

ได้รับรับแก้ไขแบบฟอร์ม
21 เมษายน 2555
รับ 28 เมษายน 2555
คำสำคัญ :



ให้เกิดความดันอุทกสถิตต่อน้ำมันกานพลูอบเชย

พุดดิ้ง

การยับยั้งเชื้อ Staphylococcus aureus สายพันธุ์บทคัดย่อโดยความดันสูง ( hhp ) การประยุกต์
เดี่ยวหรือร่วมกับยาต้านจุลชีพธรรมชาติ ( nisin , as-48 enterocin ,น้ำมันอบเชยและกานพลู )
พบในข้าว ขนมพุดดิ้ง การรักษาที่ 600 เมกกะสำหรับ 10 นาทีลดประชากรเริ่มต้น
และ ( 7.9 log CFU / g ) ด้านล่างได้ระดับ 1 log CFU / g ในพุดดิ้ง . การรักษาที่
500 MPa เป็นเวลา 5 นาที ( ขบวนการ 2.9-log ลดได้นับ ) คือเดี่ยว ๆ หรือในการรวมกันกับปุ่ม
200 IU / 500 กรัม )