The high performance liquid chromat

The high performance liquid chromatography HPLC. Dionex DX 500 system consisting of an AS40 Autosampler, GP40 gradient pump, AD20 UV/Visible absorbance detector, ED40 electrochemical detector, and LC20 chromatography enclosure was used to quantify levels of compatible solutes in plants. Immediately following harvest, the leaf sap was extracted as described for osmotic potential measurement. One ml of methanol:chloroform:water (60:25:15 by vol) was added to each sample and the samples were vortexed for 1 min before centrifugation for 10 min at 10 000 g at 4 °C. The supernatant was removed and the samples were freeze-dried. The samples were resuspended in 200 μl of milliQ water prior to injection into the HPLC. A mixture of standards (glycine betaine, sucrose, glucose, fructose, mannitol, trigonelline, and sorbitol), was prepared in methanol:water (50:50, v:v) at 0.5 μg μl−1 for glycine betaine and 2.5 μg μl−1 for the remaining solutes. Ten μl of the standard solution was injected into the HPLC while running each batch of samples. The contribution of organic and inorganic ions to leaf osmotic potential was determined using the van’t Hoff equation, where the calculated contribution of individual solutes to measured Ψs, was based on solute concentration on a molar basis

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ในสารละลายน้ำ HPLC ประกอบด้วยการ เกิด AS40, GP40 ไล่ระดับปั๊ม ตรวจจับค่า AD20 UV/มอง เห็นได้ ตรวจจับไฟฟ้า ED40 และ LC20 chromatography ตู้ระบบ Dionex DX 500 ถูกใช้เพื่อกำหนดปริมาณของสารปนเปื้อนที่เข้ากันได้ในโรง ทันทีหลังเก็บเกี่ยว ใบ sap ถูกแยกตามที่อธิบายไว้สำหรับการวัดศักยภาพการออสโมติก หนึ่งมิลลิลิตรของเมทานอล: คลอโรฟอร์ม: น้ำ (60:25:15 โดย vol) ถูกเพิ่มไปแต่ละอย่างและตัวอย่างได้ vortexed 1 นาทีก่อนหมุนเหวี่ยงที่จี 10 000 ที่ 4 องศาเซลเซียส 10 นาที Supernatant ถูกเอาออก และตัวอย่างแห้งนี้ ตัวอย่างที่ resuspended ใน μl 200 milliQ น้ำก่อนฉีดเข้า HPLC ส่วนผสมของมาตรฐาน (glycine เบทาอีน ซูโครส กลูโคส ฟรักโทส mannitol, trigonelline และซอร์บิทอล), ถูกจัดเตรียมไว้ในเมทานอล: น้ำ (50: 50, v: v) ที่ 0.5 μ μl−1 สำหรับเบทาอีน glycine และ 2.5 μ μl−1 สำหรับสารปนเปื้อนที่เหลือ Μl สิบโซลูชันมาตรฐานถูกฉีดเข้าไปใน HPLC ที่ขณะทำงานแต่ละชุดตัวอย่าง กำหนดสัดส่วนของไอออนอนินทรีย์ และอินทรีย์ใบการออสโมติกศักยภาพใช้สมการ van't Hoff ที่คำนวณสัดส่วนของแต่ละสารปนเปื้อนการวัด Ψs ตามความเข้มข้นของตัวถูกละลายในโมเลกุล

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

มีประสิทธิภาพสูง HPLC ของเหลว chromatography Dionex DX 500 ระบบประกอบด้วย autosampler AS40, GP40 ปั๊มลาด AD20 UV / เครื่องตรวจจับการดูดกลืนแสงที่มองเห็น, ED40 ตรวจจับไฟฟ้าและตู้โค LC20 ถูกใช้ในการวัดปริมาณระดับของสารที่เข้ากันได้ในพืช ทันทีหลังจากเก็บเกี่ยว SAP ใบถูกสกัดตามที่อธิบายไว้สำหรับการวัดศักยภาพออสโมติก หนึ่งมิลลิลิตรเมทานอล: คลอโรฟอร์ม: น้ำ (60:25:15 โดยปริมาตร) ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละตัวอย่างและตัวอย่างที่ถูกหมุนวนเป็นเวลา 1 นาทีก่อนที่จะหมุนเหวี่ยงเป็นเวลา 10 นาทีที่ 10 000 กรัมที่ 4 ° C ใสถูกลบออกและตัวอย่างที่ถูกแห้ง ตัวอย่างถูก resuspended ใน 200 ไมโครลิตรน้ำ milliQ ก่อนที่จะฉีดเข้าไปใน HPLC ได้ มีส่วนผสมของมาตรฐาน (เบทาอีน glycine ซูโครสกลูโคสฟรุกโตส, แมนนิทอล, trigonelline และซอร์บิทอ) ถูกจัดทำขึ้นในเมทานอล: น้ำ (50:50 V: V) ที่ 0.5 ไมโครกรัมต่อไมโครลิตร-1 สำหรับ glycine เบทาอีนและ 2.5 ไมโครกรัมต่อไมโครลิตร -1 สำหรับสารที่เหลือ สิบไมโครลิตรของสารละลายมาตรฐานได้รับการฉีดเข้าไปใน HPLC ในขณะที่ทำงานชุดของแต่ละตัวอย่าง ผลงานของไอออนอินทรีย์และอนินทรีใบที่มีศักยภาพดันถูกกำหนดโดยใช้สมการ van't ฮอฟฟ์ที่มีส่วนร่วมในการคำนวณของสารแต่ละตัวเพื่อΨsวัดก็ขึ้นอยู่กับความเข้มข้นของตัวละลายบนพื้นฐานกราม