2.11. On-line HPLC–DPPH assayThe ex

2.11. On-line HPLC–DPPH assay
The extracts were analysed on a HPLC/UV system supplemented
with DPPH

radical scavenging detector. In this system two chromatograms were recorded simultaneously, one of which representing UV absorbance of effluent at 265 nm prior to the reaction,
while a mirror chromatogram was obtained recording absorbance
at 517 nm after reaction of effluent with DPPH

solution in the
reaction coil. The mobile phase was supplied to the column by a
model 9012 HPLC gradient pump (Varian. USA) at flow rate
0.75 ml/min. The samples of 20ll were injected into the HPLC system by means of Cheminert C1 injector (Valco Instruments, USA).
Reverse-phase LiChroSpher RP-18e 5lm 12.50.4 cm column
and 0.50.4 cm precolumn (Merck, Germany) were used for separation. The DPPH
 reagent was prepared by dissolving 0.01 M
DPPH

in 0.1 M sodium citrate buffer (pH 7.6), methanol and acetonitrile (50:25:25 v/v). It was continuously supplied into a reaction
coil (3 m of 0.25 mm id fused-silica capillary) by a model 2200
HPLC pump (Bischoff, Germany) at a flow rate of 0.75 ml/min. Signals were acquired at 265 and 517 nm wavelengths by means of
Linear 206 PHD and Linear UVIS 200 UV–VIS detectors, respectively. Solution A (bidistilled water with 0.05% TFA) and B (methanol with 0.05% TFA) were used as the mobile phase components for
gradient elution. Extracts were separated using the following gradient: 10% of B at 0 min, 25% of B at 5 min, 40% of B at 25 min.
95% of B at 40 min. 95% of B at 43 min and 10% of B at 44 min. Clarity chromatography software (DataApex. Czech Republic) was used
for data acquisition.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.11 วิเคราะห์ HPLC-DPPH ง่ายดายสารสกัดมี analysed ในระบบ HPLC/UV เสริมกับ DPPHเครื่องตรวจจับ scavenging รุนแรง ในระบบนี้สอง chromatograms ถูกบันทึกพร้อมกัน หนึ่งที่ absorbance UV แทนของน้ำทิ้งที่ 265 nm ก่อนปฏิกิริยาในขณะที่ chromatogram กระจกกล่าว absorbance บันทึกที่ 517 nm หลังจากปฏิกิริยาของน้ำกับ DPPHแก้ปัญหาในการปฏิกิริยาม้วน เฟสเคลื่อนที่ให้กับคอลัมน์โดยการรุ่น 9012 HPLC ที่ไล่ระดับปั๊ม (แล้วแต่กำหนด สหรัฐอเมริกา) ที่อัตราการไหล0.75 มล./นาที ตัวอย่างของ 20ll ถูกฉีดเข้าในระบบ HPLC โดย Cheminert C1 หัวฉีด (เครื่องมือ Valco สหรัฐอเมริกา)คอลัมน์ย้อนกลับเฟส LiChroSpher RP-18e 5lm 12.5 0.4 ซม.และ 0.5 0.4 ซม. precolumn (เมอร์ค เยอรมนี) ใช้สำหรับแยก DPPHรีเอเจนต์ถูกเตรียม โดยยุบ 0.01 MDPPHใน 0.1 M โซเดียมซิเตรตบัฟเฟอร์ (pH 7.6), เมทานอล และ acetonitrile (v 50:25:25 v) อย่างต่อเนื่องถูกกำหนดลงในปฏิกิริยาการขดลวด (m 3 ของแรง 0.25 mm รหัสนส่วน fused) รุ่น 2200สินทรัพย์ที่ 265 และ 517 nm ความยาวคลื่นที่ผ่านปั๊ม HPLC (Bischoff เยอรมนี) ที่อัตราการไหลของสัญญาณ 0.75 มล./นาทีเส้น 206 ระดับปริญญาเอกและเชิงเส้นพบกับสุด 200 UV – VIS เครื่องตรวจจับ ตามลำดับ โซลูชั่น A (น้ำ 0.05% bidistilled TFA) และ B (เมทานอล 0.05% TFA) ใช้เป็นส่วนประกอบสำหรับเฟสเคลื่อนelution ไล่ระดับ บางส่วนถูกแยกโดยใช้การไล่ระดับต่อไปนี้: 10% ของ B ที่นาทีที่ 0, 25% ของ B 5 นาที 40% ของ B ที่ 25 min95% ของ B ที่ 40 นาที 95% ของ B ที่ 43 นาทีและ 10% ของ B ที่ 44 นาทีชัดเจน chromatography ซอฟต์แวร์ (DataApex ใช้สาธารณรัฐเช็ก)สำหรับข้อมูลการซื้อ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.11 on-line ทดสอบ HPLC-DPPH
สารสกัดที่ได้มาวิเคราะห์ในระบบ HPLC /
ยูวีเสริมด้วย
DPPH?
เครื่องตรวจจับอนุมูลอิสระ ในระบบนี้สอง chromatograms ถูกบันทึกพร้อมกันซึ่งหนึ่งในนั้นเป็นตัวแทนของการดูดกลืนรังสียูวีของน้ำทิ้งที่ 265
นาโนเมตรก่อนที่จะมีปฏิกิริยาในขณะที่chromatogram
กระจกที่ได้รับการบันทึกการดูดกลืนแสงที่517 นาโนเมตรหลังจากปฏิกิริยาของน้ำทิ้งที่มี
DPPH? วิธีการแก้ปัญหาในขดลวดปฏิกิริยา เฟสเคลื่อนที่ได้จ่ายให้กับคอลัมน์โดยรุ่น 9012 HPLC ปั๊มลาด (Varian USA.) ในอัตราการไหล 0.75 มล. / นาที กลุ่มตัวอย่างของ 20ll ถูกฉีดเข้าไปในระบบ HPLC โดยใช้วิธีการฉีด Cheminert C1 (Valco เครื่องมือสหรัฐอเมริกา). ย้อนกลับเฟส LiChrospher RP-18e 5lm 12.5? 0.4 คอลัมน์ซม. และ 0.5? 0.4 ซม precolumn (เมอร์ค, เยอรมนี) ถูกนำมาใช้ การแยก DPPH? น้ำยาถูกจัดทำขึ้นโดยการละลาย 0.01 M DPPH? ใน 0.1 M โซเดียมซิเตรทบัฟเฟอร์ (pH 7.6), เมทานอลและ acetonitrile (50:25:25 v / v) มันถูกจัดมาอย่างต่อเนื่องเป็นปฏิกิริยาขดลวด (3 เมตร 0.25 มมรหัสฝอยผสมซิลิกา) โดยรูปแบบ 2200 HPLC ปั๊ม (บิชอฟ, เยอรมนี) ที่อัตราการไหล 0.75 มล. / นาที สัญญาณที่ได้มาอยู่ที่ 265 และ 517 นาโนเมตรความยาวคลื่นโดยใช้วิธีการเชิงเส้น206 PHD และเชิงเส้น UVIS 200 เครื่องตรวจจับรังสี UV-VIS ตามลำดับ วิธีการแก้ปัญหา (น้ำ bidistilled กับ 0.05% TFA) และ B (เมทานอลที่มี 0.05% TFA) ถูกนำมาใช้เป็นส่วนประกอบเฟสเคลื่อนที่สำหรับชะลาด สารสกัดถูกแยกออกโดยใช้การไล่ระดับสีต่อไปนี้: 10% ของ B ที่ 0 นาที, 25% ของ B 5 นาที, 40% ของที่ B 25 นาที. 95% ของ B ที่ 40 นาที 95% ของ B 43 นาทีและ 10% ของ B 44 นาที ซอฟแวร์โคชัดเจน (DataApex. สาธารณรัฐเช็ก) ถูกนำมาใช้สำหรับการเก็บข้อมูล

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.11 . บนบรรทัด 2 – dpph assay
แยกวิเคราะห์ในระบบ HPLC / UV เสริม


เป็นตัวเร่งปฏิกิริยากับ dpph  เครื่องตรวจจับ ในระบบนี้สองกลิ่นที่ถูกบันทึกไว้พร้อมกัน ซึ่งเป็นตัวแทนของค่าการดูดกลืนแสงยูวีของน้ำทิ้งที่ 265 NM ก่อนปฏิกิริยา
ในขณะที่กระจกโครมาได้บันทึกค่า
ที่ 517 nm หลังจากปฏิกิริยาของน้ำที่มี dpph

โซลูชั่นใน
ปฏิกิริยาขดลวด ระยะเคลื่อนที่ให้กับคอลัมน์โดย
รูปแบบ 9012 HPLC ลาด ( เครื่องปั๊ม . สหรัฐอเมริกา ) ที่อัตราการไหล
0.75 มิลลิลิตร / นาที ตัวอย่างของ 20ll ถูกฉีดเข้าไปในระบบ HPLC โดยใช้หัวฉีด cheminert C1 ( USA valco เครื่องมือ ) .
กลับเฟส lichrospher rp-18e 5lm 12.5  0.4 ซม. คอลัมน์
และ 0.5  0.4 ซม. precolumn ( Merck , เยอรมนี ) ใช้สำหรับแยก การ dpph
 รีเอเจนต์ถูกเตรียมโดยละลาย 0.01 M


dpph  ใน 0.1 โมลาร์โซเดียมซิเตรตบัฟเฟอร์ pH 7.6 ) , เมทานอลและไน ( 50:25:25 v / v ) มันเป็นอย่างต่อเนื่องจัดเป็นปฏิกิริยา
ม้วน ( 3 เมตรของ ID 0.25 มม. ซิลิกา capillary ) โดยรุ่น 2200
2 ปั๊ม ( บิชอป , เยอรมนี ) ที่อัตราการไหล 0.75 มิลลิลิตร / นาที สัญญาณอยู่ที่ได้รับและ 517 nm ความยาวคลื่นโดยใช้
เชิงเส้นและเส้น uvis 206 เอก 200 – UV Vis เครื่องตามลำดับ โซลูชั่น ( bidistilled น้ำที่มีระดับ 0.05 เปอร์เซ็นต์ ) และ B ( เมทานอลกับ 0.05 % กรดไขมัน ) ที่ใช้เป็นส่วนประกอบสำหรับการใช้เฟสเคลื่อนที่
. แยกจากกันโดยใช้การไล่ระดับสีต่อไปนี้ : 10% ของ B ที่ 0 นาที 25 % ของ B ที่ 5 นาทีที่ 40 % B 25 นาที
95% ของ B ที่ 40 นาที ร้อยละ 95 ของ บี ที่ 43 นาทีและ 10 % B 44 นาทีซอฟต์แวร์โครมาโทกราฟีชัดเจน ( dataapex . สาธารณรัฐเช็ก ) คือใช้
สำหรับการเก็บข้อมูล