Cytotoxic ActivityBioassay: Anti ca

Cytotoxic Activity
Bioassay: Anti cancer activity of endophytic fungi secondary metabolite was measured
based on its cytotoxic effect. The cell lines HepG2 cells, MCF7 cells, A549 cells, A431 and HeLa
cells obtained from the National Centre for Cell Science (NCCS), University of Pune Campus,
Pune were used for the study. The tumour cells were maintained in the Minimum essential medium
(Eagle’s) supplemented with 2Mm L-glutamine and Earle’s BSS adjusted to contain 1.5g/L
Sodiumbicarbonate, 10% fetal calf serum and 100μg/mL streptomycin (Sigma). The cells were
incubated at 37°C in an atmosphere of 5% CO2 and 95% air with more than 95% humidity. 1000
µl of each cell suspension were added into each of the 24 multi-well plate followed by the addition
of 10μL ethyl acetate extract of endophytic fungi metabolite and methanolic plant extract at three
different concentrations 2.5, 5 and 10μg mL-1 and incubated for 48 h. As a negative control, cells
were treated with only Eagle’s MEM with 10μL ethyl extract for endophytic fungi and methanol
for plant sample. Each treatment was done in triplicates. The viable cells were counted in a
haemocytometer using the trypan blue exclusion method (Kumala et al. 2006). Cytotoxic assay
other than the MTT assay were used in this study, because direct cell counting by haemocytometer
is one of the simplest method, inexpensive, accurate measure of cell number to assess the cytotoxic
effect of secondary metabolites of endophytic fungi.
37
To calculate IC50 values of secondary metabolites in ethyl acetate extract from endophytic fungi
Penicillium sp. isolate, following formula was used:
Total number of viable cells per ml o

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กิจกรรม cytotoxicBioassay: ป้องกันมะเร็ง กิจกรรมเชื้อ endophytic รารอง metabolite ที่วัดตามผลของ cytotoxic รายการเซลล์เซลล์ HepG2, MCF7 เซลล์ เซลล์ A549, A431 และ HeLaเซลล์ที่ได้รับจากศูนย์แห่งชาติสำหรับเซลล์วิทยาศาสตร์ (NCCS), วิทยาเขตมหาวิทยาลัยเนปูที่ใช้สำหรับการศึกษา เซลล์เนื้องอกถูกรักษาไว้ในสื่อที่จำเป็นอย่างน้อย(Eagle ของ) เสริม ด้วย 2 Mm L glutamine และ Earle ของ BSS ปรับมี 1.5 g/LSodiumbicarbonate ลูกครรภ์ 10% ซีรั่มและ 100μg/mL streptomycin (ซิกมา) เซลล์ได้incubated ที่ 37° C ในบรรยากาศของอากาศ CO2 และ 95% ของ 5% มากกว่า 95% ความชื้น 1000µl ระงับเซลล์แต่ละถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละจานดีหลาย 24 ตาม ด้วยการเพิ่มของสารสกัดเอทิล acetate 10μL ของเชื้อรา endophytic metabolite และโรงงาน methanolic แยกที่สามแตกต่างความเข้มข้น 2.5, 5 และ 10μg mL 1 และ incubated สำหรับ 48 h เป็นตัวควบคุมค่าลบ เซลล์ได้รับการรักษา ด้วย Eagle เฉพาะของหน่วยความจำกับเอทิล 10μL แยกเชื้อรา endophytic และเมทานอลสำหรับโรงงานตัวอย่าง ทำทรีตเมนท์ใน triplicates เซลล์ทำงานได้นับได้ในการใช้ trypan haemocytometer บลูวิธีแยก (Kumala et al. 2006) ทดสอบ cytotoxicใช่ MTT assay ถูกใช้ในการศึกษานี้ เนื่องจากเซลล์โดยตรงที่นับ โดย haemocytometerเป็นหนึ่งในวิธีที่ง่ายที่สุด ไม่แพง ถูกต้องวัดจำนวนเซลล์เพื่อประเมินการ cytotoxicผลของ metabolites รองของเชื้อ endophytic รา37การคำนวณ IC50 ค่าของ metabolites รองในเอทิล acetate แยกจากเชื้อรา endophyticPenicillium sp.แยก สูตรต่อไปนี้ใช้:จำนวนของเซลล์ทำงานได้ต่อ ml o

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

cytotoxic
กิจกรรมทดสอบฤทธิ์ทางชีวภาพ: กิจกรรมต่อต้านโรคมะเร็งของเชื้อราเอนโดไฟท์ metabolite
มัธยมวัดขึ้นอยู่กับผลของพิษ เซลล์เส้นเซลล์ HepG2 เซลล์ MCF7 เซลล์ A549, A431 และ HeLa
เซลล์ที่ได้รับจากศูนย์แห่งชาติสำหรับโทรศัพท์มือวิทยาศาสตร์ (NCCS) University of Pune
วิทยาเขตปูนถูกนำมาใช้เพื่อการศึกษา เซลล์เนื้องอกได้รับการดูแลในกลางขั้นต่ำที่จำเป็น
(นกอินทรี) เสริมด้วย 2mm L-glutamine และ BSS เอิร์ลที่จะมีการปรับ 1.5g / L
Sodiumbicarbonate 10% ซีรั่มน่องทารกในครรภ์และ100μg / mL streptomycin (ซิกม่า) เซลล์ที่ได้รับการบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสในบรรยากาศของ CO2 5% และ 95% อากาศที่มีความชื้นมากกว่า 95%
1000
ไมโครลิตรของเซลล์ระงับแต่ละถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละ 24
แผ่นหลายอย่างดีตามมาด้วยนอกจากนี้สารสกัดเอทิลอะซิเต10μLของmetabolite เชื้อราเอนโดไฟท์และสารสกัดจากพืชเมทานอลที่สามความเข้มข้นที่แตกต่างกัน 2.5, 5 และ10μg mL-1 และบ่มเป็นเวลา 48 ชั่วโมง
เป็นตัวควบคุมเชิงลบเซลล์ได้รับการรักษาด้วย MEM อีเกิลเท่านั้นที่มีสารสกัดเอทิล10μLสำหรับเชื้อราเอนโดไฟท์และเมทานอลสำหรับตัวอย่างพืช การรักษาแต่ละคนได้ทำใน triplicates เซลล์ทำงานได้นับในสไลด์นับเม็ดเลือดใช้ Trypan วิธีการยกเว้นสีฟ้า (Kumala et al. 2006) การทดสอบพิษอื่น ๆ นอกเหนือจากการทดสอบ MTT ถูกนำมาใช้ในการศึกษาครั้งนี้เพราะนับเซลล์โดยตรงโดยสไลด์นับเม็ดเลือดเป็นหนึ่งในวิธีที่ง่ายราคาไม่แพงวัดที่ถูกต้องของจำนวนเซลล์เพื่อประเมินความเป็นพิษผลกระทบของสารทุติยภูมิของเชื้อราเอนโดไฟท์. 37 ในการคำนวณค่า IC50 ของสารรองในสารสกัดจากน้ำนมจากราเอนโดไฟท์Penicillium SP แยกตามสูตรที่ใช้: จำนวนเซลล์ต่อมล. o

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ฤทธิ์ต้านมะเร็งกิจกรรม
ว่ากิจกรรมของราเอนโดไฟต์ระดับมัธยมวัด
ขึ้นอยู่กับผลกระทบที่เป็นพิษของมัน เซลล์มะเร็งตับสายพันธุ์เซลล์ mcf7 a549 เซลล์ และเซลล์ a431 ล่า
เซลล์ที่ได้จากเซลล์ศูนย์วิทยาศาสตร์แห่งชาติ ( nccs ) , University of Pune Pune วิทยาเขต
ถูกใช้เพื่อการศึกษา เซลล์เนื้องอกถูกรักษาในขั้นสรุป
ขนาดกลาง( นกอินทรี ) เติม Glutamine เอิร์ลของ 2mm และสถานีฐานปรับประกอบด้วย 1.5G / l
โซเดียมไบคาร์บอเนต , 10% ของลูกวัวและ streptomycin 100 μ g / ml ( Sigma ) เซลล์ที่บ่มที่ 37 ° C (
ในบรรยากาศของ CO2 ร้อยละ 5 และร้อยละ 95 อากาศมากกว่า 95 % ความชื้น 1000
µ L ของแต่ละเซลล์แขวนลอยที่ถูกเพิ่มลงในแต่ละ 24 หลายดีจานตามด้วยนอกจากนี้
10 μชั้นเอทิลอะซิเตท สารสกัดจากราเอนโดไฟท์ที่แยกได้และสารสกัดเมทานอล อุณหภูมิ พืชที่แตกต่างกันสาม
ความเข้มข้น 2.5 , 5 และ 10 กรัมแน่นอนμบ่ม 48 ชั่วโมง เป็นชุดควบคุมลบ ได้รับการรักษาด้วยเซลล์
นกอินทรีแหม่มกับ 10 μผมสามารถแยกราเอนโดไฟท์ที่แยกเมทานอล
สำหรับและสำหรับตัวอย่างพืช การรักษาแต่ละครั้งก็ทำ 3 ซ้ำ . เซลล์ที่จะถูกนับใน
haemocytometer โดยใช้ไตรแพนสีฟ้ายกเว้นวิธี ( คุมาลา et al . 2006 ) การทดสอบพิษ
นอกจาก MTT assay ) มาใช้ในการศึกษานี้ เพราะนับเซลล์โดยตรง haemocytometer
เป็นหนึ่งในวิธีที่ง่าย ไม่แพง วัดที่ถูกต้องของจำนวนเซลล์ เพื่อประเมินผลที่เป็นพิษของสารทุติยภูมิของราเอนโดไฟต์

0
.เพื่อคำนวณหาค่า ic50 สกัดเอทิลอะซีเตทของสารทุติยภูมิจากราเอนโดไฟต์ที่แยก
เพนิซิเลียม ตามสูตรที่ใช้ :
จำนวนเซลล์ต่อมิลลิลิตร โอได้