DNA extraction and PCR conditionsYe

DNA extraction and PCR conditions
Yeast cells were pregrown in YPG, pH 5Æ6 at 28C for
48 h. The yeast DNA was extracted from the pure cultures
according to the method described by Duarte et al.
(2009). The 25 ll PCR mixture contained 12Æ5 ll de Mix
GoTaq Green Master 2X (Promega), 2 ll of DNA
diluted to 10 ng ll)1 and 0Æ5 lmol l)1 of each primer.
The sequences of the primers utilized in this study and
the amplification conditions are shown in Table 2. Amplification
products were separated by electrophoresis on a
0Æ8% (w ⁄ v) agarose gel and stained with Syber Green (Invitrogen,
USA). DNA fragments were visualized by UV
transillumination, and images were captured using a
Polaroid camera. A ladder marker (GeneRuler 100 bp
DNA Ladder Plus) was used as a size reference

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สกัดดีเอ็นเอและเงื่อนไข PCRเซลล์ยีสต์ได้ pregrown ใน YPG, 5Æ6 ค่า pH ที่ 28 C สำหรับ48 h ดีเอ็นเอยีสต์ที่แยกจากวัฒนธรรมบริสุทธิ์ตามวิธีการอธิบายไว้โดย Duarte et al(2009) . เดอ 25 จะ 12Æ5 ประกอบด้วยส่วนผสม PCR จะผสมกรี GoTaq หลัก 2 X (Promega), 2 จะเอ็นยกเว้นไป 10 ng จะ) 1 และ 0Æ5 lmol l) 1 ของแต่ละพื้นลำดับของไพรเมอร์ที่ใช้ในการศึกษานี้ และเงื่อนไขขยายจะแสดงในตารางที่ 2 ขยายผลิตภัณฑ์ถูกคั่น ด้วย electrophoresis ในการAgarose % (w ⁄ v) 0Æ8 เจ และสีกับ Syber สีเขียว (Invitrogenสหรัฐอเมริกา) ชิ้นส่วนดีเอ็นเอมี visualized โดย UVtransillumination และภาพที่ถูกบันทึกโดยใช้การกล้อง Polaroid เครื่องหมายบันได (GeneRuler 100 bpดีเอ็นเอบันได Plus) ใช้เป็นการอ้างอิงขนาด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การสกัดดีเอ็นเอจากเซลล์ยีสต์และเงื่อนไข
เป็น pregrown ในบรรษัทภิบาล , pH 5 กู้ 6 28  C
48 ชั่วโมง ยีสต์สกัดดีเอ็นเอจากเชื้อบริสุทธิ์
ตามวิธีการที่อธิบายโดย Duarte et al .
( 2009 ) 25 จะเพิ่มส่วนผสมที่มีอยู่ 12 กู้ 5 จะ de ผสม
gotaq  สีเขียวหลัก 2x ( promega ) 2 จะดีเอ็นเอ
เจือจาง 10 ng จะ ) 1 และ 0 กู้ 5 lmol L )
1 ของแต่ละรองพื้นลำดับของไพรเมอร์ที่ใช้ในการศึกษานี้ (
เงื่อนไขแสดงในตารางที่ 2 ผลิตภัณฑ์ขยาย
ถูกแยกโดยวิธีอิเล็กโทรโฟรีซีสบน
0 กู้ 8 % ( w ⁄ V ) เจล , ย้อมด้วยสีเขียว ( Invitrogen
Syber , USA ) ชิ้นส่วนดีเอ็นเอถูกมองเห็นโดย transillumination UV
และภาพที่ถูกบันทึกโดยใช้
กล้องโพลารอยด์ บันไดเครื่องหมาย ( generuler 100 BP
ดีเอ็นเอบันไดพลัส ) ที่ใช้เป็นขนาดอ้างอิง