2.9. MTT assayFor the 3-(4,5-dimeth

2.9. MTT assay
For the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium
bromide (MTT) assay, the cancer cell lines and normal cell line were
plated in the 96-well microplate (Nunc, Roskilde, Denmark). Each
well
was seededwith 104 cells in 150 mL of growth medium. After 24 h
post seeding, 50 mL (40 mg/mL) of the filtered probiotic supernatants
(using the Nalgene syringe filter units (0.22 mm)) were administered
to each well to achieve a total volume of 200 mL. All treated cellswere
then incubated for 12, 24, and 48 h. After incubation, 20 mL ofMTT
solution (5mg/mL in PBS)was administered to eachmicroplatewell.
Then, the plateswere again incubated for 4 h in5%CO2 at 37 C indark
conditions. The formazan crystals created by usingMTT-exposed live
cellswere dissolved by adding 200 mL of dimethyl sulfoxide and 25 mL
of Sorenson's glycine buffer (0.1 M glycine and 0.1 M NaCl, pH 10.5)
into eachwell andwere incubated at 37 Cwhile being gently shaken
for 20 min. Adsorption of the dissolved formazan crystals was
measured using a mQuant ELISA Reader (BioTek Instruments,
Winooski, VT, USA) at 570 nm. For the treated group, untreated group
(as a negative control), and taxol-treated group (as a positive control),
six repetitions were considered in each microplate

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.9 การ MTT assayสำหรับการ 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumโบรไมด์ (MTT) วิเคราะห์ เส้นเซลล์มะเร็ง และเซลล์ปกติบรรทัดได้ชุบใน microplate ดี 96 (Nunc, Roskilde เดนมาร์ก) แต่ละดีไม่ seededwith 104 เซลล์ 150 mL ของเชื้อ หลังจาก 24 ชมลงปลูก 50 mL (40 mg/mL) ของ supernatants กรองโปรไบโอติกส์(ใช้หน่วยกรองเข็ม Nalgene (0.22 มิลลิเมตร)) ได้รับการดูแลไปละดีเพื่อให้ได้ปริมาตรรวมของ 200 mL Cellswere บำบัดทั้งหมดแล้ว incubated 12, 24 และ 48 h หลังจากบ่ม ofMTT 20 mLโซลูชัน (5mg/mL ใน PBS) ถูกจัดการกับ eachmicroplatewellแล้ว plateswere ที่ incubated 4 h in5% CO2 ที่ 37 C indark อีกครั้งเงื่อนไขการ รัตนากร formazan ที่สร้าง โดย usingMTT แสดงสดส่วนยุบ โดยเพิ่ม 25 mL 200 mL ของ dimethyl sulfoxide cellswereของ Sorenson glycine บัฟเฟอร์ (glycine 0.1 M และ 0.1 M NaCl, pH 10.5)เป็น incubated ที่กำลังเขย่าเบา ๆ Cwhile 37 andwere eachwellสำหรับ 20 นาที ของ formazan ละลายผลึกได้วัดโดยใช้ mQuant ELISA Reader (เครื่องมือ BioTekWinooski, VT สหรัฐอเมริกา) ที่ 570 nm สำหรับกลุ่มบำบัด กลุ่มที่ไม่ถูกรักษา(เป็นการลบตัวควบคุม), และกลุ่มที่ถือว่า taxol (เป็นบวกควบคุม),ทำซ้ำหกถูกพิจารณาในแต่ละ microplate

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.9 ทดสอบ MTT
สำหรับ 3 (4,5-dimethylthiazol-2-YL) -2,5-diphenyltetrazolium
โบรไมด์ (MTT)
ทดสอบที่เซลล์มะเร็งและเซลล์ปกติถูกชุบในmicroplate 96 หลุม (Nunc, กิลด์ เดนมาร์ก) แต่ละคนดีเป็นseededwith 104 เซลล์ใน 150 มิลลิลิตรของสื่อการเจริญเติบโต หลังจาก 24 ชั่วโมงเพาะโพสต์50 มล (40 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร) ของโปรไบโอติก supernatants กรอง(โดยใช้เข็มฉีดยา Nalgene หน่วยกรอง (0.22 มม)) เป็นยาแต่ละอย่างดีเพื่อให้บรรลุปริมาณรวมของ200 มิลลิลิตร cellswere รับการรักษาทั้งหมดบ่มแล้วเป็นเวลา12, 24, และ 48 ชั่วโมง หลังจากบ่ม 20 มล ofMTT การแก้ปัญหา (5mg / มิลลิลิตรในพีบีเอส) เป็นยาที่จะ eachmicroplatewell. จากนั้น plateswere บ่มอีกครั้งเป็นเวลา 4 ชั่วโมง CO2 in5% ที่ 37 องศาเซลเซียส indark เงื่อนไข ผลึก formazan สร้างขึ้นโดย usingMTT สัมผัสสดcellswere ละลายโดยการเพิ่ม 200 มิลลิลิตร dimethyl sulfoxide และ 25 มิลลิลิตรของบัฟเฟอร์glycine โซเรนส์ (0.1 M glycine และ 0.1 M NaCl ค่า pH 10.5) เข้า andwere eachwell บ่มที่ 37 Cwhile ถูกเขย่าเบา ๆ20 นาที การดูดซับละลายผลึก formazan ถูกวัดโดยใช้วิธีELISA MQuant อ่าน (Biotek เครื่องมือ, นุ, VT, สหรัฐอเมริกา) ที่ 570 นาโนเมตร สำหรับกลุ่มได้รับการรักษาที่ได้รับการรักษากลุ่ม(เป็นตัวควบคุมเชิงลบ) และกลุ่มที่ได้รับ Taxol (เป็นตัวควบคุมบวก), หกซ้ำได้รับการพิจารณาในแต่ละ microplate

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.9 . MTT assay
สำหรับ 3 - ( 4,5-dimethylthiazol-2-yl ) - 2,5-diphenyltetrazolium
โบรไมด์ ( MTT ) โดยเซลล์มะเร็ง และเซลล์ปกติ
ชุบ 96 ดีพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย ( ขณะนี้ , Roskilde , เดนมาร์ก ) แต่ละคน

เป็นอย่างดี seededwith 104 เซลล์ใน 150 มิลลิลิตรอาหารเลี้ยงเชื้อ . หลังจาก 24 H
โพสต์ 1 , 50 ml ( 40 mg / ml ) ของกรองโพรไบโอติก supernatants
( ใช้เข็มฉีดยานาลจีนกรองหน่วย ( 022 มม. ) ศึกษา
กันเพื่อให้ได้ปริมาณ 200 มล. ทั้งหมดถือว่าระดับ
แล้วบ่มเป็นเวลา 12 , 24 และ 48 ชั่วโมง หลังจากบ่ม โซลูชั่น ofmtt
20 ml ( 5 mg / ml ใน PBS ) ผู้ eachmicroplatewell .
แล้ว plateswere อีก 4 กลุ่มแยก CO2 % H ที่ 37  C indark
เงื่อนไข ซึ่งเหลือเชื่อสร้างโดยเปิดเผย usingmtt อยู่
ละลายโดยการเพิ่มระดับของไดเมทิลซัลฟอกไซด์ 200 ml และ 25 ml
ของเพลก็ยังบัฟเฟอร์ ( 0.1 M glycine และ 0.1 โมลาร์พีเอช 10.5 )
เป็น eachwell และบ่มที่ 37  cwhile ถูกเขย่าเบาๆ
20 นาที การดูดซับของละลายเหลือเชื่อคือ
วัดโดยใช้วิธี ( อ่าน mquant biotek เครื่องมือ
Winooski , VT , USA ) ที่ 570 นาโนเมตร สำหรับการรักษากลุ่ม
กลุ่มดิบ( เป็นตัวควบคุมเชิงลบ ) และกลุ่ม Taxol ( เป็นตัวควบคุมบวก )
6 repetitions ถูกพิจารณาในแต่ละพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย