amiRNA technology has many advantag

amiRNA technology has many advantages over more traditional antisense or hairpin methods of gene silencing.

First, the region used for silencing is only 21 nucleotides long, thereby increasing specificity for the gene of interest and reducing the likelihood of inadvertently silencing nontarget genes (e.g., those that share stretches of sequence similarity with the target gene). Silencing of nontarget genes can be problematic when large stretches of sequence are used for hairpin-based silencing approaches.

Second, the cloning to make the amiRNA cassette is done by a series of straightforward site-directed mutagenesis PCRs on an existing template plasmid. Inserts from the resulting plasmid can then be transferred to a binary plant transformation vector either using Gateway technology or traditional cloning approaches.

Finally, there is an easy to use web-based tool to select optimal 21 nucleotide regions and to design the primers to be used for the cloning

Artificial microRNAs (amiRNA) can be used to very specifically target genes

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

amiRNA มีข้อดีมากมายเหนือกว่าวิธีแบบดั้งเดิม antisense หรือกิ๊บ silencing ยีน

ก่อน ใช้สำหรับ silencing เป็นเฉพาะนิวคลีโอไทด์ 21 ยาว จึง specificity ในยีนน่าสนใจเพิ่มขึ้น และลดโอกาสของการตั้งใจ silencing ยีน nontarget (เช่น ผู้ที่ร่วมพระลำดับคล้ายกับยีนเป้าหมาย) Silencing ของยีน nontarget สามารถเป็นปัญหาเมื่อมีใช้พื้นที่ขนาดใหญ่ของลำดับสำหรับกิ๊บตามวิธี silencing

สอง โคลนเพื่อให้เทป amiRNA ทำ โดยชุดของตรงไปตรงมาตรงไซต์ mutagenesis PCRs ใน plasmid เป็นแม่แบบที่มีอยู่ แทรกจาก plasmid ได้แล้วเวกเตอร์การแปลงพืชไบนารีโดยใช้เทคโนโลยีเกตเวย์หรือแบบโคลนวิธีการ

ในที่สุด มีเป็นง่ายต่อการใช้เว็บเครื่องมือต้องดีที่สุด 21 นิวคลีโอไทด์ในภูมิภาค และ การออกแบบไพรเมอร์จะใช้สำหรับการโคลน

microRNAs เทียม (amiRNA) สามารถใช้ยีนเป้าหมายเฉพาะ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เทคโนโลยี amiRNA มีข้อดีกว่ามากขึ้น antisense หรือกิ๊บวิธีการดั้งเดิมของยีนเงียบแรกในภูมิภาคที่ใช้สำหรับการห้ามไม่ให้พูดเป็นเพียง 21 นิวคลีโอยาวจึงช่วยเพิ่มความจำเพาะกับยีนที่น่าสนใจและลดโอกาสในการตั้งใจเงียบยีนไม่ใช่เป้าหมาย (เช่นผู้ที่ หุ้นที่ทอดยาวของความคล้ายคลึงกันกับลำดับของยีนเป้าหมาย) สมรไม่ใช่เป้าหมายของยีนอาจเป็นปัญหาได้เมื่อเหยียดขนาดใหญ่ของลำดับจะใช้สำหรับสมรกิ๊บตามแนวทางที่สองโคลนที่จะทำให้เทป amiRNA จะกระทำโดยชุดของเว็บไซต์ตรงไปตรงมากำกับ PCRs ฉับกับพลาสมิดแม่ที่มีอยู่ แทรกจากพลาสมิดที่เกิดขึ้นนั้นจะสามารถโอนไปยังเวกเตอร์แปลงพืชไบนารีทั้งการใช้เทคโนโลยีเกตเวย์หรือวิธีการโคลนนิ่งแบบสุดท้ายมีง่ายต่อการใช้เครื่องมือบนเว็บเพื่อเลือกที่ดีที่สุดของภูมิภาค 21 เบื่อหน่ายและการออกแบบไพรเมอร์ที่จะใช้ โคลนประดิษฐ์ microRNAs (amiRNA) สามารถใช้ในการกำหนดเป้าหมายเฉพาะมากยีน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

amirna เทคโนโลยีมีข้อดีกว่าแบบดั้งเดิมมากขึ้นหรือวิธีการของยีน antisense ปิ่นเงียบ

แรก พื้นที่ที่ใช้สำหรับความเงียบเป็นเพียง 21 นิวคลีโอไทด์นาน จึงช่วยเพิ่มความจำเพาะของยีนที่สนใจ และช่วยลดโอกาสของการตั้งใจปิดปาก nontarget ยีน ( เช่นพวกที่ใช้เหยียดของความเหมือนกับลำดับยีนเป้าหมาย )การปกปิด nontarget ยีนสามารถมีปัญหาเมื่อเหยียดมากลำดับใช้กิ๊บตามสามารถวิธี

ส่วนการโคลนเพื่อให้ amirna เทปเสร็จ โดยชุดของเว็บไซต์ตรงไปตรงมากำกับการ pcrs บนพลาสมิด แม่แบบที่มีอยู่แทรกจากผลของพลาสมิดแล้วสามารถย้ายไปปลูกแปลงไบนารีเวกเตอร์ให้ใช้ Gateway เทคโนโลยีโคลนนิ่งหรือวิธีแบบดั้งเดิม .

ในที่สุด มันเป็นเรื่องง่ายที่จะใช้เครื่องมือบนเว็บเพื่อเลือกที่ดีที่สุด 21 นิวคลีโอไทด์ภูมิภาคและออกแบบไพรเมอร์เพื่อใช้สำหรับการโคลน

micrornas เทียม ( amirna ) สามารถใช้ มากโดยเฉพาะยีนเป้าหมาย