Results
For all cytokine or chemokine mRNAs examined, as
well as positive control targets, labelling of mRNA
transcripts was seen as dots of red chromogenic substrate (i.e. Fast Red) (Fig. 2). The number of dots
within a single cell varied from one to numerous
dots, which sometimes coalesced to form an amorphous focus of intense labelling that obscured the cell nuclei or borders. The size of a single dot ranged
from approximately 0.2 to 1.5 mm.
Within granulomas, cells morphologically consistent with lymphocytes, macrophages and multinucleated giant cells contained some degree of labelling for
all chemokines and cytokines examined (Fig. 2).
Consequently, some measure of labelling was seen in
both macrophage-rich and lymphocyte-rich zones of
the granulomas. In many cases, variable numbers of
single dots were also visible within the necrotic core
of the granulomas.
The amount of mRNA labelling, as measured by
percent positive labelling for TNF-a, TGF-b, IFNg, IL-17A, IL-16, IL-10, CXCL9 and CXCL10,
did not differ between granulomas of different
morphological stages I to IV. There were fewer stage
II granulomas than the other three stages; therefore,
stage II granulomas were excluded from the final
analysis. Although each stage was defined by specific
morphological characteristics, the most subjective
distinction was differentiating stage III from stage
IV granulomas (i.e. late stage granulomas). As there
were no statistically significant differences between
these two stages, data from both stages were combined for final analysis. Final analysis compared stage
I (early) granulomas with late stage granulomas (III
and IV combined) and microscopically normal, nonlesional lung (Fig. 3). Cytokine and chemokine gene
expression were significantly greater within granulomas compared with non-lesional lung, with the
exception of expression of IL-17A and IL-10
mRNA, which did not differ between granulomas
and non-lesional lung (Fig. 3). Comparison of granu lomas with or without visible AFB did not reveal
additional significant differences (data not shown).
When all granuloma stages were combined, expression levels between cytokine genes varied with greatest expression of TNF-a, TGF-b and IL-16,
intermediate expression of IFN-gand low expression
of IL-17A and IL-10 (Fig. 4). Cytokine and chemokine expression in non-lesional lung were generally
very low; however, there were differences between
targets with the greatest expression of TNF-aand
lowest expression of IFN-g, IL-17A and CXCL10
ผลลัพธ์สำหรับทั้งหมดอย่างไร cytokine หรือ chemokine mRNAs ตรวจสอบ เป็นรวมทั้งเป้าหมายการควบคุมบวก ฉลากของ mRNAใบแสดงผลที่เห็นเป็นจุดสีแดงพื้นผิว chromogenic (เช่นเร็วสีแดง) (Fig. 2) จำนวนจุดภายในเซลล์เดียวที่แตกต่างกันอย่างมากมายถึงจุด ซึ่ง coalesced เพื่อความเป็นไปของฉลากที่รุนแรงบางครั้ง บดบังแอลฟาเซลล์หรือเส้นขอบ ขนาดของจุดเดียวอยู่ในช่วงจากประมาณ 0.2-1.5 มม.ภายใน granulomas เซลล์ morphologically สอดคล้องกับ lymphocytes บังเอิญ และเซลล์ multinucleated ยักษ์อยู่บางส่วนของฉลากสำหรับทั้งหมด chemokines และ cytokines ตรวจสอบ (Fig. 2)ดังนั้น วัดบางฉลากที่เห็นในโซน macrophage รวย และ รวย lymphocyte ของgranulomas ในหลายกรณี ตัวแปรจำนวนจุดเดียวยังเห็นในหลัก necroticของ granulomasจำนวนพิมพ์ฉลาก mRNA วัดจากเปอร์เซ็นต์บวกฉลากสำหรับ TNF-a, TGF-b, IFNg, IL-17A, IL-16, IL-10, CXCL9 และ CXCL10ไม่ได้แตกต่างกันระหว่าง granulomas ของแตกต่างกันของระยะฉันอยู่ไปถึง IV มีขั้นตอนน้อยลงGranulomas II กว่าอื่น ๆ สามขั้นตอน ดังนั้นระยะ II granulomas ถูกแยกออกจากสุดท้ายวิเคราะห์ แม้ว่าแต่ละขั้นตอนกำหนดไว้ โดยเฉพาะลักษณะสัณฐาน ตามอัตวิสัยมากที่สุดความแตกต่างขึ้นต้นระยะ III จากเวทีIV granulomas (เช่นสายระยะ granulomas) เนื่องจากมีก็ไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติระหว่างขั้นสองเหล่านี้ ข้อมูลจากขั้นตอนทั้งสองถูกรวมสำหรับการวิเคราะห์ขั้นสุดท้าย ขั้นตอนสุดท้ายวิเคราะห์เปรียบเทียบฉัน granulomas (ต้น) กับปลายขั้น granulomas (IIIและ IV รวม) และ microscopically ปกติ nonlesional ปอด (Fig. 3) อย่างไร Cytokine และ chemokine ยีนนิพจน์ที่มีมากขึ้นอย่างมีนัยสำคัญภายใน granulomas เทียบกับปอดไม่ lesional มีการข้อยกเว้นของนิพจน์ IL 17A และ IL-10mRNA ซึ่งไม่ได้แตกต่างกันระหว่าง granulomasและไม่ใช่ lesional ปอด (Fig. 3) เปรียบเทียบ lomas granu ด้วย หรือ ไม่เห็น AFB ไม่เปิดเผยเพิ่มเติมแตกต่างกัน (ข้อมูลไม่แสดง)เมื่อทุกขั้นตอนของ granuloma ได้รวม นิพจน์ระดับระหว่างยีนอย่างไร cytokine ที่แตกต่างกัน มีค่ามากที่สุดของ TNF- TGF b และ IL-16ค่ากลางของ IFN gand ต่ำนิพจน์IL 17A และ IL-10 (Fig. 4) อย่างไร Cytokine และ chemokine นิพจน์ในปอดไม่ lesional ได้โดยทั่วไปต่ำมาก อย่างไรก็ตาม มีความแตกต่างระหว่างเป้าหมายที่ มีค่ามากที่สุดของ TNF-aandค่าต่ำสุดของ IFN-g, IL 17A และ CXCL10
การแปล กรุณารอสักครู่..

ผลสำหรับทุกไซโตไคน์หรือ chemokine mRNAs ตรวจสอบเช่นเดียวกับเป้าหมายการควบคุมบวกการติดฉลากของmRNA จิตบำบัดถูกมองว่าเป็นจุดของพื้นผิว chromogenic สีแดง (เช่นอย่างรวดเร็วสีแดง) (รูปที่. 2) จำนวนจุดภายในเซลล์เดียวที่แตกต่างกันจากที่หนึ่งไปหลายจุดซึ่งรวมตัวกันบางครั้งในรูปแบบเน้นรูปร่างของการติดฉลากรุนแรงที่บดบังนิวเคลียสเซลล์หรือพรมแดน ขนาดของจุดเดียวอยู่ในช่วงประมาณ 0.2-1.5 มม. ภายใน granulomas เซลล์สัณฐานสอดคล้องกับเซลล์เม็ดเลือดขาวขนาดใหญ่และเซลล์ยักษ์ multinucleated มีระดับของการติดฉลากบางอย่างสำหรับchemokines และ cytokines ตรวจสอบ (รูปที่. 2). ดังนั้นมาตรการบางส่วนของการติดฉลากที่เห็นในทั้งสองโซน macrophage ที่อุดมด้วยและเม็ดเลือดขาวที่อุดมไปด้วยของ granulomas ในหลายกรณีตัวเลขตัวแปรจุดเดียวก็ยังสามารถมองเห็นได้ในหลักเศษของgranulomas ได้. จำนวนเงินของการติดฉลาก mRNA ที่เป็นวัดโดยการติดฉลากบวกร้อยละTNF-a, TGF-B, IFNg, IL-17A, IL-16 , IL-10, CXCL9 และ CXCL10, ไม่แตกต่างกันระหว่าง granulomas ที่แตกต่างกันของขั้นตอนทางสัณฐานวิทยาฉันถึงIV มีขั้นตอนน้อยกว่าครั้งที่สอง granulomas กว่าอีกสามขั้นตอน; ดังนั้นขั้นตอนที่สอง granulomas ได้รับการยกเว้นจากขั้นสุดท้ายการวิเคราะห์ แม้ว่าแต่ละขั้นตอนได้รับการกำหนดโดยเฉพาะลักษณะทางสัณฐานวิทยาที่ส่วนตัวมากที่สุดความแตกต่างได้รับความแตกต่างขั้นตอนที่สามจากเวทีIV granulomas (เช่น granulomas ขั้นตอนปลาย) เนื่องจากมีไม่แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญระหว่างทั้งสองขั้นตอนขั้นตอนข้อมูลจากทั้งสองได้ร่วมกันเพื่อวิเคราะห์สุดท้าย การวิเคราะห์ขั้นตอนสุดท้ายเมื่อเทียบผม (ต้น) granulomas กับ granulomas ขั้นตอนปลาย (III และ IV รวม) และกล้องจุลทรรศน์ปกติปอด nonlesional (รูปที่. 3) ไซโตไคน์และยีน chemokine การแสดงออกอย่างมีนัยสำคัญมากขึ้นภายใน granulomas เมื่อเทียบกับที่ไม่ใช่รอยโรคปอดที่มีข้อยกเว้นของการแสดงออกของIL-17A และ IL-10 mRNA ซึ่งไม่ได้แตกต่างกันระหว่าง granulomas และไม่ใช่รอยโรคปอด (รูปที่. 3) เปรียบเทียบ Granu Lomas มีหรือไม่มี AFB มองเห็นไม่ได้เปิดเผยความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญเพิ่มเติม(ไม่ได้แสดงข้อมูล). เมื่อขั้นตอน granuloma ทั้งหมดถูกรวมระดับการแสดงออกระหว่างยีนไซโตไคน์ที่แตกต่างกันกับการแสดงออกที่ยิ่งใหญ่ที่สุดของ TNF-a, TGF-B และ IL-16 การแสดงออกของกลาง IFN-Gand แสดงออกต่ำของIL-17A และ IL-10 (รูปที่. 4) ไซโตไคน์และการแสดงออก chemokine ไม่ใช่รอยโรคปอดโดยทั่วไปต่ำมาก แต่มีความแตกต่างระหว่างเป้าหมายกับการแสดงออกที่ยิ่งใหญ่ที่สุดของ TNF-aand แสดงออกต่ำสุดของ IFN-กรัม IL-17A และ CXCL10
การแปล กรุณารอสักครู่..

ผลลัพธ์
ทั้งหมดหรือคีโมไคน์ไซโตไคน์รหัสตรวจสอบ เช่น
ดีเป็นเป้าหมายควบคุมบวกฉลากของ mRNA transcripts
เห็นเป็นจุดสีแดง ( เช่นการสนทนาผ่านข้อความโต้ตอบแบบทันทีฐานรองสีแดงอย่างรวดเร็ว ) ( รูปที่ 2 ) จำนวนของจุด
ภายในเซลล์เดียวแตกต่างจากหนึ่งจุดมากมาย
ซึ่งบางครั้ง coalesced เป็นโฟกัสสำหรับเข้มฉลากที่บดบังเซลล์นิวเคลียสหรือเส้นขอบขนาดของจุดเดียวอยู่
จากประมาณ 0.2 ถึง 1.5 mm .
ภายในแกรนูโลมา เซลล์จากสอดคล้องกับเม็ดเลือดขาวและเซลล์แมคโครฟาจ multinucleated ยักษ์ที่มีอยู่บางส่วนของการติดฉลาก
ทั้งหมดคีโมไคนส์และ cytokines ตรวจ ( รูปที่ 2 ) .
จากนั้น บางวัด กล่าวคือ ได้เห็นทั้งรวยและ lymphocyte โซน
แมโครเฟจรวย
ศัลยกรรมพลาสติก . ในหลายกรณีตัวแปรตัวเลข
จุดเดียวยังปรากฏในอาการหลักของศัลยกรรมพลาสติก
.
ปริมาณ mRNA ของการติดฉลากซึ่งวัดโดย
% การติดฉลาก tgf-b tnf-a , บวก , ifng il-17a il-16 เตอร์ , , , , และ cxcl10
cxcl9 , ไม่แตกต่างกันระหว่างลักษณะทางสัณฐานวิทยาที่แตกต่างกันของขั้นตอนการศัลยกรรมพลาสติก
ฉัน IV มี น้อยกว่าเวที
2 แกรนูโลมามากกว่าอีกสามขั้นตอน ดังนั้น
ระยะที่ 2 ศัลยกรรมพลาสติกได้รับการยกเว้นจากการวิเคราะห์สุดท้าย
แม้ว่าแต่ละขั้นตอนที่ถูกกำหนดไว้โดยเฉพาะ
ลักษณะ , ความแตกต่างอัตนัยมากที่สุด คือ ความแตกต่างของระยะที่ 3 จากเวที
4 ( เช่นระยะสายศัลยกรรมพลาสติกศัลยกรรมพลาสติก ) มีพบว่าไม่มีความแตกต่างระหว่าง
ขั้นตอนเหล่านี้สอง ข้อมูลจากทั้งสองได้รวมการวิเคราะห์ขั้นสุดท้ายการวิเคราะห์เปรียบเทียบระยะสุดท้าย
ฉัน ( ต้น ) ศัลยกรรมพลาสติกศัลยกรรมพลาสติก กับช่วงปลาย ( 3
4 รวมกัน ) และผลปกติ ปอด nonlesional ( รูปที่ 3 ) ไซโตไคน์และการแสดงออกของยีน
คีโมไคน์อย่างมีนัยสำคัญมากขึ้นในศัลยกรรมพลาสติกเมื่อเทียบกับไม่ lesional ปอด ด้วยข้อยกเว้นของการแสดงออกของ il-17a
และเอนเตอร์ ซึ่งไม่แตกต่างกันระหว่างแกรนูโลมา
lesional ( รูปและไม่มีปอด3 ) การเปรียบเทียบ granu Lomas มี หรือ ไม่มี เห็นบีไม่ได้เปิดเผย
ความแตกต่างเพิ่มเติม ( ข้อมูลไม่แสดง ) .
เมื่อขั้นตอนทั้งหมดเป็นจำนวนรวม ระดับการแสดงออกระหว่างไซโตไคน์ยีนแปรผันกับการแสดงออกที่ยิ่งใหญ่ที่สุดของ tnf-a tgf-b il-16 , และ , การแสดงออกของ IFN
กลางต่ำ และการแสดงออก แกนด์ il-17a เตอร์ ( รูปที่ 4 )และการแสดงออกในไม่ lesional คีโมไคน์ไซโตไคน์ปอดโดยทั่วไป
น้อยมาก อย่างไรก็ตาม มีความแตกต่างระหว่างเป้าหมายกับการแสดงออกที่ยิ่งใหญ่ที่สุด
สุดของ TNF และการแสดงออกของ ifn-g il-17a cxcl10 , และ
การแปล กรุณารอสักครู่..
