The purity of Xcn1 was determined a

The purity of Xcn1 was determined according to the
method of Huang (Huang et al.
2005
). The pH of the cell-
free supernatant was adjusted to 3.0 with oxalic acid, and
then adjusted to 6.0 with NaOH. After removing sediment,
the supernatant was loaded onto a X-5 macroporous resin
column (100 cm
9
8 cm, Nankai University Chemical
Factory) at a flow rate of 2.0 mL/min and eluted with 30%
acetone containing 0.01 NH
4
Cl.

Eluate was concentrated
with a vacuum rotary evaporator and subsequently loaded
onto a 110 cation exchange chromatography column and
eluted with 0.2 M NH
4
Cl. Further purification was carried
out on a CM-Sephadex-C-25 weak acid cation exchange
resin (Pharmacia), and the bound fraction was eluted with
0.1 M NH
4
Cl. Active fractions containing Xcn1 were col-
lected and the purity was determined using HPLC on a
reversed-phase C
18
column (Waters 2695 system). Five
microliters of sample were injected into a column (2.1
9
150 mm), eluted with acetonitrile-0.1% TFA (10:90) at a
flow rate of 0.3 mL/min, and monitored at 312 nm

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กำหนดความบริสุทธิ์ของ Xcn1 ตามวิธีของหวง (หวง et alปี 2005). PH ของเซลล์-supernatant ฟรีถูกปรับ 3.0 ที่มีกรดออกซาลิก และจากนั้น ปรับปรุง 6.0 กับ NaOH หลังจากเอาตะกอนsupernatant ถูกโหลดลงในเรซิ่นมี macroporous X-5คอลัมน์ (100 ซม98 ซม. เคมีมหาวิทยาลัยนานไคโรงงาน) ที่อัตราการไหลของ 2.0 mL/min และ eluted 30%อะซีโตนที่ประกอบด้วย 0.01 NH4ทั้งหมด Eluate เข้มข้นevaporator โรตารี่เป็นเครื่องดูดฝุ่น และโหลดในเวลาต่อมาลงในคอลัมน์ 110 cation exchange chromatography และeluted กับ 0.2 M NH4ทั้งหมด ทำการฟอกออกใน CM-Sephadex-C-25 อ่อนกรด cation แลกเงินเรซิ่น (Pharmacia), และเศษผูกถูก eluted ด้วย0.1 M NH4Cl.ส่วนงานประกอบด้วย Xcn1 มีคอลัมน์-lected และความบริสุทธิ์ที่ถูกกำหนดโดยใช้ HPLC ในการกลับเฟส C18คอลัมน์ (ระบบน้ำ 2695) ห้าmicroliters ของตัวอย่างถูกฉีดเข้าไปในคอลัมน์ (2.19มม. 150), eluted กับ acetonitrile-0.1% TFA (10:90) ที่เป็นไหลอัตรา 0.3 mL/min และตรวจสอบที่ 312 nm

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ความบริสุทธิ์ของ Xcn1 ถูกกำหนดให้เป็นไปตาม
วิธีการของ Huang (Huang et al,
2005
) ค่า pH ของเซลล์
ใสฟรีมีการปรับถึง 3.0 ด้วยกรดออกซาลิกและ
จากนั้นปรับ 6.0 กับ NaOH หลังจากลบตะกอน
ใสถูกโหลดไปยัง X-5 เรซิน macroporous
คอลัมน์ (100 ซม.
9
8 ซม, Nankai เคมีมหาวิทยาลัย
โรงงาน) ที่อัตราการไหล 2.0 มิลลิลิตร / นาทีและชะด้วย 30%
อะซีโตนที่มี 0.01 NH
4
Cl Eluate สมาธิที่มีสูญญากาศเครื่องระเหยแบบหมุนและต่อมาโหลดลงบนคอลัมน์โครมาแลกเปลี่ยนไอออนบวก 110 และชะด้วย 0.2 M NH 4 Cl การทำให้บริสุทธิ์ต่อไปได้รับการดำเนินการใน CM-เอนไซม์-C-25 อ่อนแอกรดไอออนบวกแลกเปลี่ยนเรซิน (Pharmacia) และส่วนที่ถูกผูกไว้ถูกชะด้วย0.1 M NH 4 Cl ส่วนการใช้งานที่มี Xcn1 เป็นเพื่อนร่วมlected และความบริสุทธิ์ถูกกำหนดโดยใช้ HPLC และกลับเฟส C 18 คอลัมน์ (น้ำระบบ 2695) ห้าmicroliters ของตัวอย่างถูกฉีดเข้าไปในคอลัมน์ (2.1 9 150 มิลลิเมตร), ชะด้วย acetonitrile-0.1% TFA (10:90) ที่อัตราการไหล 0.3 มิลลิลิตร / นาทีและตรวจสอบที่ 312 นาโนเมตร

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ความบริสุทธิ์ของ xcn1 ตั้งใจตาม
วิธีหวง ( หวง et al 2005 .

) ค่า pH ในเซลล์ -
ฟรีนำปรับไป 3.0 กับกรดออกซาลิกและ
แล้วปรับ 6.0 ด้วย NaOH หลังจากเอาตะกอนสูงถูกโหลดลง

macroporous X-5 คอลัมน์เรซิน ( 100 cm
9
8 ซม. Nankai University เคมี
โรงงาน ) ที่อัตราการไหล 2 มล. / นาทีและ 30 %
ตัวอย่างอะซิโตนที่มี 0.01 NH
4



คลิกจากการลบที่เกี่ยวข้องกับสุญญากาศระเหยและโหลดลงคอลัมน์โครมาโตกราฟีในภายหลัง

ตัวอย่างและ 110 แลกเปลี่ยนประจุกับ 0.2 M NH
4
CL เพิ่มเติมบริสุทธิ์ถูกหามออกใน cm-sephadex-c-25 กรดอ่อน

เรซินแลกเปลี่ยนประจุ ( มุ่งมั่น ) และ ผูกพัน เศษส่วน มีตัวอย่างด้วย 0.1 M NH
4

คลิกปราดเปรียวเศษส่วนที่มี xcn1 มีคอลัมน์ -
lected และความบริสุทธิ์ถูกกำหนดโดยใช้ HPLC ใน reversed-phase C


18 คอลัมน์ ( น้ำ 2695 ระบบ ) 5
ตัวเลขตัวอย่างถูกฉีดเข้าไปในคอลัมน์ ( 2
9
150 มม. ) , ตัวอย่างกับ acetonitrile-0.1 % กรดไขมัน ( 10:90 ) ที่
อัตรา 0.3 มิลลิลิตรต่อนาที และตรวจสอบ ที่ 312 นาโนเมตร