3. Results and discussion3.1. Mediu

3. Results and discussion
3.1. Medium screening for cell growth and kefiran production
The cell growth and kefiran production of L. kefiranofaciens
ATCC 8007 were determined in five different media as
described in materials and method section. The inoculated
flasks for each medium were incubated at 30 C on a rotary
shaker at 200 rpm for 72 h. Samples were taken at the end of
the fermentation for the analysis of pH, cell growth and kefiran
production. The most suitable medium for kefiran fermentation
was selected based on kefiran production. Fig. 1 shows
the kefiran produced for five different media. From this figure,
it can be observed that medium 5 gave the highest kefiran production
of about 0.72 g L1. This was followed by media 3, 4,
2, and 1, where the produced kefiran was 0.62, 0.31, 0.20, and
0.09 g L1, respectively. After 72 h incubation, the maximal
cell dry weight obtained in medium 4 was 4.49 g L1 followed
by media 3, 1, 2, and 5, where the cell biomass reached 1.70,
1.53, 1.06, and 1.01 g L1, respectively.
Media 4 and 5 differ only in the carbon source used, i.e. soluble
starch and sucrose, respectively. From the data presented
in Fig. 1, although sucrose as the carbon source gave the lowest
cell dry weight in medium 5, it gave the highest production
of kefiran compared to soluble starch used in medium 4. This
indicates that the production of kefiran is not highly dependent
on the amount of biomass achieved by the end of the fermentation,
but rather on the type and concentration of nutrients
added. These results are in good agreement with those
obtained by Elsayed et al. (2013), who investigated the effect
of medium supplementation with various short-chain carboxylic
acids on the kinetics of cell growth and natamycin production
by Streptomyces natalensis. Their results showed that
the natamycin production increased due to medium supplementation
with acetate or propionate and not due to the
change in biomass. While their butyrate supplemented medium
resulted in a decreased specific natamycin production, with
higher increase in cell biomass. They concluded that the production
of the secondary metabolite is largely affected by the
type of nutrients added to the cultivation medium rather than
the concentration of the produced cell biomass. Based on these
data, medium 5 composed of (g L1): sucrose, 100; yeast
extract, 10; Tween 80, 1; K2HPO4, 2; sodium acetate, 5;
triammonium citrate, 2; MgSO4.7H2O, 0.2; MnSO4.5H2O,
0.05 was chosen for further optimization.
3.2. Kinetics of cell growth and kefiran production in unoptimized
medium
Cultivations were carried out in shake flasks for 72 h to investigate
the kinetics of cell growth and kefiran production by
L. kefiranofaciens using the selected production medium.
During cultivations, samples were taken every 6 h for the
determination of pH, cell dry weight and kefiran. Fig. 2 shows
the profile of pH, cell growth and kefiran production for the
un-optimized medium. It can be clearly observed that kefiran
was not produced during the first 6 h of cultivation, which
can be considered as the lag phase where the cells were adapted
to the new environment. After that, the cells grew exponentially
with a growth rate of 0.021 g L1 h1 and reached their
maximal cell mass (1.02 g L1) after 60 h. On the other hand,
kefiran production increased proportionally to the cell mass
with a production rate of 0.015 g L1 h1, where it reached a
maximum of 0.81 g L1 after 72 h. The pH increased up to
36 h of the start of cultivation and then started to drop reaching
a final pH of 4.70.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3. ผล และการอภิปราย3.1. กลางตรวจเซลล์เจริญเติบโตและ kefiran ผลิตเซลล์เจริญเติบโตและ kefiran ผลิต L. kefiranofaciensATCC 8007 กำหนดในห้าสื่อเป็นอธิบายไว้ในส่วนวิธีการและวัสดุ การ inoculatedได้รับการกกขวดสำหรับสื่อแต่ละที่ 30 C บนหมุนปั่นที่ 200 rpm 72 h. ตัวอย่างถ่ายที่การหมักสำหรับการวิเคราะห์ค่า pH การเจริญเติบโตของเซลล์ และ kefiranการผลิต สื่อเหมาะสมที่สุดสำหรับหมัก kefiranเลือกตาม kefiran ผลิต รูปที่ 1 แสดงkefiran การผลิตสื่อต่าง ๆ ห้า จากรูปนี้สามารถสังเกตว่า ปานกลาง 5 ให้ผลิต kefiran สูงสุดประมาณ 0.72 กรัม L 1 นี้ตามมา ด้วยสื่อ 3, 42 และ 1 ที่ kefiran ผลิตเป็น 0.62, 0.31, 0.20 และ0.09 g L 1 ตามลำดับ หลังจากบ่ม 72 ชม. สูงสุดน้ำหนักแห้งของเซลล์ได้ใน 4 ถูก 4.49 g L 1 ตามสื่อ 3, 1, 2 และ 5 ซึ่งชีวมวลเซลล์ถึง 1.701.53, 1.06 และ 1.01 g L 1 ตามลำดับสื่อ 4 และ 5 ที่แตกต่างเฉพาะในแหล่งคาร์บอนใช้ ละลายน้ำได้เช่นแป้งและน้ำตาลซูโครส ตามลำดับ จากข้อมูลที่นำเสนอในรูปที่ 1 แม้ว่าซูโครสเป็นแหล่งคาร์บอนให้ต่ำที่สุดเซลล์แห้งน้ำหนักปานกลาง 5 ให้การผลิตสูงสุดของ kefiran เมื่อเทียบกับละลายแป้งใช้ใน 4 นี้บ่งชี้ว่า การผลิต kefiran ไม่สูงขึ้นในจำนวนของชีวมวลโดยสิ้นสุดการหมักแต่แทนที่จะอยู่กับชนิดและความเข้มข้นของสารอาหารเพิ่ม ผลลัพธ์เหล่านี้อยู่ในข้อตกลงที่ดีกับโดย Elsayed et al. (2013), ผู้ตรวจสอบผลที่ได้รับของเสริมกลางสั้นต่าง ๆ -carboxylic สายโซ่กรดในจลนพลศาสตร์ของเซลล์เจริญเติบโตและ natamycinโดย Streptomyces natalensis ผลลัพธ์แสดงให้เห็นว่าnatamycin การผลิตเพิ่มขึ้นเนื่องจากการเสริมกลางอะซิเตทหรือ propionate และไม่กำหนดให้การเปลี่ยนแปลงในชีวมวล ในขณะที่ของกลางบิวทิเรตเสริมผลผลิตลดลงเฉพาะ natamycin ด้วยชีวมวลเซลล์เพิ่มสูงขึ้น พวกเขาสรุปว่า การผลิตของ metabolite รองส่วนใหญ่ผลกระทบจากการชนิดของสารอาหารเพิ่มกลางเพาะปลูกแทนความเข้มข้นของชีวมวลเซลล์ผลิต ตามนี้ข้อมูล กลาง 5 ประกอบด้วย (g L 1): ซูโครส 100 ยีสต์แยก 10 แต่ 80, 1 K2HPO4, 2 โซเดียมอะซิเตท 5triammonium ซิเตรท 2 MgSO4.7H2O, 0.2 MnSO4.5H2O0.05 ถูกเลือกสำหรับการเพิ่มประสิทธิภาพต่อไป3.2. จลนพลศาสตร์ของเซลล์การเจริญเติบโตและ kefiran ผลิตใน unoptimizedปานกลางCultivations ได้ดำเนินการในขวดเขย่าสำหรับ 72 ชั่วโมงการตรวจสอบจลนพลศาสตร์ของเซลล์เจริญเติบโตและ kefiran ผลิตโดยL. kefiranofaciens ที่ใช้สื่อผลิตที่เลือกระหว่าง cultivations ตัวอย่างที่ถ่ายทุก 6 ชม.สำหรับการวัดค่า pH น้ำหนักเซลล์แห้ง และ kefiran รูปที่ 2 แสดงโพรไฟล์ของค่า pH การเติบโตของเซลล์ และผลิต kefiran สำหรับการสื่อที่ไม่เหมาะสม มันจะชัดเจนสังเกตได้จากว่า kefiranไม่ได้ผลิตในช่วง 6 ชม.แรกของการเพาะปลูก ซึ่งถือได้ว่าเป็นขั้นตอนความล่าช้าที่มีการดัดแปลงเซลล์กับสภาพแวดล้อมใหม่ หลังจากนั้น เซลล์เติบโตชี้แจงมีอัตราการเติบโตของ 0.021 กรัม L 1 h 1 และถึงของพวกเขามวลเซลล์สูงสุด (1.02 g L 1) หลังจากชม. 60 ในทางตรงข้ามผลิต kefiran เพิ่มสัดส่วนเป็นเซลล์มวลอัตราผลิต 0.015 g L 1 h 1 ของที่มันถึงสูงสุด 0.81 กรัม L 1 หลัง 72 ชม ค่า pH เพิ่มขึ้น36 ชั่วโมงของการเริ่มต้นของการเพาะปลูกและเริ่มปล่อยถึงและค่า pH ที่สุดท้ายของ 4.70

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3. ผลการทดลองและการอภิปราย
3.1 การตรวจคัดกรองสื่อกลางในการเจริญเติบโตของเซลล์และการผลิตคีเฟอรัน
การเจริญเติบโตของเซลล์และการผลิตคีเฟอรันลิตร kefiranofaciens
ATCC 8007 ได้รับการพิจารณาในห้าสื่อที่แตกต่างกัน
ที่อธิบายไว้ในวัสดุและวิธีการแสดง เชื้อ
ขวดสำหรับแต่ละสื่อถูกบ่มที่ 30 องศาเซลเซียสในแบบหมุน
ปั่นที่ 200 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 72 ชั่วโมง ถูกนำตัวอย่างในตอนท้ายของ
การหมักสำหรับการวิเคราะห์ค่า pH, การเจริญเติบโตของเซลล์และคีเฟอรัน
ผลิต สื่อที่เหมาะสมที่สุดสำหรับการหมักคีเฟอรัน
ได้รับเลือกขึ้นอยู่กับการผลิตคีเฟอรัน มะเดื่อ. 1 แสดง
คีเฟอรันผลิตห้าสื่อที่แตกต่างกัน จากตัวเลขนี้
ก็สามารถที่จะตั้งข้อสังเกตว่าสื่อที่ 5 ให้การผลิตคีเฟอรันสูงสุด
ประมาณ 0.72 กรัม L? 1 นี้ตามมาด้วยสื่อ 3, 4,
2 และ 1 ที่ผลิตคีเฟอรันเป็น 0.62, 0.31, 0.20 และ
0.09 กรัม L? 1 ตามลำดับ หลังจาก 72 ชั่วโมงบ่มที่สูงสุด
น้ำหนักเซลล์แห้งได้ในระดับปานกลาง 4 เป็น 4.49 กรัม L? 1 ตามมา
โดยสื่อ 3, 1, 2 และ 5 ที่ชีวมวลเซลล์ถึง 1.70,
1.53, 1.06 และ 1.01 กรัม L? 1 ตามลำดับ.
สื่อที่ 4 และ 5 แตกต่างกันเฉพาะในแหล่งคาร์บอนที่ใช้ละลายน้ำเช่น
แป้งและน้ำตาลซูโครสตามลำดับ จากข้อมูลที่นำเสนอ
ในรูป 1 แม้ว่าน้ำตาลซูโครสเป็นแหล่งคาร์บอนให้ต่ำสุด
น้ำหนักเซลล์แห้งในระดับปานกลาง 5 มันทำให้การผลิตสูงสุด
ของคีเฟอรันเมื่อเทียบกับแป้งที่ละลายน้ำได้ใช้ในกลาง 4. นี้
แสดงให้เห็นว่าการผลิตของคีเฟอรันไม่ได้สูงขึ้นอยู่
กับปริมาณของชีวมวล ประสบความสำเร็จในตอนท้ายของการหมักที่
แต่อยู่กับชนิดและความเข้มข้นของสารอาหาร
เพิ่ม ผลลัพธ์เหล่านี้อยู่ในข้อตกลงที่ดีกับผู้ที่
ได้รับจากการ Elsayed, et al (2013) ซึ่งการตรวจสอบผลกระทบ
ของการเสริมขนาดกลางที่มีห่วงโซ่สั้นต่างๆคาร์บอกซิ
กรดในจลนศาสตร์ของการเจริญเติบโตของเซลล์และการผลิต natamycin
โดย Streptomyces natalensis ผลของพวกเขาแสดงให้เห็นว่า
การผลิต natamycin เพิ่มขึ้นเนื่องจากการเสริมกลาง
ด้วยอะซิเตทหรือโพรพิโอเนตและไม่ได้เกิดจากการ
เปลี่ยนแปลงในชีวมวล ในขณะที่พวกเขา butyrate เสริมกลาง
ส่งผลให้การผลิตลดลง natamycin เฉพาะกับ
การเพิ่มขึ้นที่สูงขึ้นในเซลล์ชีวมวล พวกเขาสรุปว่าการผลิต
ของสารรองได้รับผลกระทบส่วนใหญ่โดย
ประเภทของสารอาหารที่เพิ่มเข้ามาในกลางการเพาะปลูกมากกว่า
ความเข้มข้นของชีวมวลเซลล์ผลิต ขึ้นอยู่กับเหล่านี้
ข้อมูลกลาง 5 ประกอบด้วย (1 กรัม L?): น้ำตาลซูโครส 100; ยีสต์
สารสกัด, 10; Tween 80, 1; K2HPO4, 2; acetate โซเดียม 5;
triammonium ซิเตรต, 2; MgSO4.7H2O 0.2; MnSO4.5H2O,
0.05 เป็นทางเลือกสำหรับการเพิ่มประสิทธิภาพต่อไป.
3.2 จลนพลศาสตร์ของการเจริญเติบโตของเซลล์และการผลิตคีเฟอรันในไม่ได้เพิ่มประสิทธิภาพ
สื่อ
เพาะปลูกได้ดำเนินการในขวดเขย่า 72 ชั่วโมงเพื่อตรวจสอบ
จลนศาสตร์ของการเจริญเติบโตของเซลล์และการผลิตคีเฟอรันโดย
ลิตร kefiranofaciens การผลิตโดยใช้สื่อที่เลือก.
ในระหว่างการเพาะปลูก, ถูกนำตัวอย่างทุก 6 ชั่วโมงสำหรับ
การกำหนดค่า pH, น้ำหนักเซลล์แห้งและคีเฟอรัน มะเดื่อ. 2 แสดง
รายละเอียดของค่า pH เจริญเติบโตของเซลล์และการผลิตคีเฟอรันสำหรับที่
กลางยกเลิกการเพิ่มประสิทธิภาพ มันสามารถมองเห็นได้อย่างชัดเจนว่าคีเฟอรัน
ไม่ได้ผลิตในช่วง 6 ชั่วโมงแรกของการเพาะปลูกซึ่ง
ถือได้ว่าเป็นขั้นตอนการล่าช้าที่เซลล์ได้รับการปรับ
เข้ากับสภาพแวดล้อมใหม่ หลังจากนั้นเซลล์เพิ่มขึ้นชี้แจง
ที่มีอัตราการเจริญเติบโตของ 0.021 กรัม L? 1 ชั่วโมง 1 และถึงของพวกเขา
มวลเซลล์สูงสุด (1.02 กรัม L? 1) หลังจาก 60 ชั่วโมง บนมืออื่น ๆ ,
การผลิตคีเฟอรันเพิ่มขึ้นตามสัดส่วนเพื่อมวลเซลล์
ที่มีอัตราการผลิต 0.015 กรัม L? 1 ชั่วโมง 1 ที่มันถึง
สูงสุด 0.81 กรัม L? 1 หลังจาก 72 ชั่วโมง ค่าความเป็นกรดเพิ่มขึ้นถึง
36 ชั่วโมงของการเริ่มต้นของการเพาะปลูกและจากนั้นก็เริ่มที่จะลดลงถึง
ค่า pH สุดท้ายของ 4.70