Quantitative analysis of biofilm wa

Quantitative analysis of biofilm was performed by adding 200 μL of 33% (v/v) glacial acetic acid (Merck, Darmstadt, Germany) per well for thick biofilms. The optical density (OD) of 135 μL of each well was measured using an ELISA reader (Molecular Devices, Spectra Max Plus 384) at 492 nm. Each strain and/or each condition was tested in (at least) three independent experiments, and each used eight biological replicates. Based on using OD of the biofilms and the corresponding blanks (ODc), strains were classified as per the criteria described by Stepanovic, Vulcovic, Dakic, and Savic (2000).

In order to differentiate between the behavior of single bacterial cells (L. plantarum 33 and E. coli) and of cells resulting from biofilm on adhesion ability, bacterial cells from both treatments were submitted to the adhesion assay in a Caco-2 cell line as described previously. To monitor the biofilm composition (in terms of viable counts of LAB and E. coli), cells were collected from each well, plated on MRS agar for Lactobacillus strains, and VRBD for E. coli, and incubated at 37 °C for 24–48 h to enumerate bacterial counts per mL.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การวิเคราะห์เชิงปริมาณของไบโอฟิล์มได้ดำเนินการโดยการเพิ่ม 200 ไมโครลิตร 33% (v / v) น้ำแข็งกรดอะซิติก (เมอร์ค, Darmstadt, Germany) ต่อดีสำหรับไบโอฟิล์มหนา ความหนาแน่นของแสง (OD) 135 ไมโครลิตรของดีแต่ละคนถูกวัดโดยใช้เครื่องอ่านวิธี ELISA (อุปกรณ์โมเลกุล Spectra พลัสแม็กซ์ 384) ที่ 492 นาโนเมตร แต่ละสายพันธุ์และ / หรือสภาพแต่ละคนถูกทดสอบใน (อย่างน้อย) สามทดลองที่เป็นอิสระและแต่ละแปดใช้ซ้ำทางชีวภาพ ขึ้นอยู่กับการใช้ยาของไบโอฟิล์มและช่องว่างที่สอดคล้องกัน (ODC) สายพันธุ์ที่ถูกจัดให้เป็นตามเกณฑ์ที่อธิบายไว้โดย Stepanovic, Vulcovic, Dakićและ Savic (2000). เพื่อที่จะแยกความแตกต่างระหว่างพฤติกรรมของเซลล์แบคทีเรียเดียว (แอล plantarum 33 และเชื้อ E. coli) และของเซลล์ที่เกิดจากไบโอฟิล์มกับความสามารถในการยึดเกาะเซลล์แบคทีเรียจากการรักษาทั้งสองถูกส่งไปทดสอบการยึดเกาะในเซลล์ Caco-2 ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ในการตรวจสอบองค์ประกอบของไบโอฟิล์ม (ในแง่ของการทำงานของนับ LAB และเชื้อ E. coli) เซลล์ที่ถูกเก็บรวบรวมจากกันอย่างดีชุบในอาหารเลี้ยงเชื้อ MRS สำหรับสายพันธุ์แลคโตบาซิลลัสและ VRBD สำหรับเชื้อ E. coli และบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 48 ชั่วโมงที่จะระบุปริมาณแบคทีเรียต่อมิลลิลิตร

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การวิเคราะห์เชิงปริมาณของฟิล์มทำโดยการเพิ่ม 200 μ L 33 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) กรดแอซีติก ( เมอร์คดาร์มสตัดท์ , เยอรมนี ) ต่อด้วยไบโอฟิล์มหนา ความหนาแน่นของแสง ( OD ) 135 μ L ของแต่ละคือการวัดอ่าน ELISA ( อุปกรณ์ระดับโมเลกุลนี้แม็กซ์พลัส 384 ) ที่ 492 นาโนเมตร แต่ละสายพันธุ์ และ / หรือ แต่ละสภาวะการทดสอบ ( อย่างน้อย ) สามการทดลองที่เป็นอิสระและแต่ละใช้แปดแบบชีวภาพ ใช้ OD ของไบโอฟิล์ม และช่องว่างที่สอดคล้องกัน ( ODC ) สายพันธุ์จำแนกตามเกณฑ์ที่ระบุไว้ โดย stepanovic vulcovic dakic , , , และซาวิค ( 2000 ) .

เพื่อแยกความแตกต่างระหว่างพฤติกรรมของแบคทีเรียเซลล์เดียว ( L . plantarum 33 และ E . coli ) และเซลล์ที่เกิดจากฟิล์มใน ความสามารถในการยึดเกาะ ,เซลล์แบคทีเรียทั้งจากการรักษาที่ถูกส่งไปยังเกาะ assay ในเซลล์ caco-2 ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ตรวจสอบฟิล์มองค์ประกอบ ( ในแง่ของรัฐนับจากห้องทดลองและ E . coli ) , เซลล์ที่เก็บจากแต่ละอย่างดีชุบบนอาหารวุ้นคุณนายสำหรับสายพันธุ์แลคโตบาซิลลัส และ vrbd ใน E . coli , บ่มที่ 37 ° C เป็นเวลา 24 และ 48 ชั่วโมง เพื่อนับจำนวนจุลินทรีย์ต่อมิลลิลิตร