programmed temperature involved an

programmed temperature involved an initial denaturation
step of 95 C for 2 min followed by 29 cycles at
94 C for 30 s, annealing at 55 C for 1 min and
extension at 72 C for 1 min; a final elongation cycle
of 72 C for 5 min was included. Amplification
products were left at 4 C prior to electrophoresis.
The SCAR marker profile had an initial denaturation
of 95 C for 2 min followed by 34 cycles at 94 C for
30 s, annealing at 50 C for 1 min and extension at
72 C for 1 min, a final elongation of 72 C for 5 min.
DNA loading dye was added to the PCR amplification
products and the SSR fragments were separated by
electrophoresis on 1.5 % agarose and the SCAR
marker on 6 % polyacrylamide gels. Both SSR and
SCAR markers were used for the CMD2 gene.
Results
Field and marker screening for the CMD2 gene
in parental genotypes
With the exception of CR42-4, the other seven
CIAT elite lines were CMD resistant. The landraces
from Ghana used in these crosses had varying
reactions to CMD, with landraces Dabodabo and
IITA genotype TMEII being resistant with an
average score of 2 while landraces Afeb and Tuaka
were moderately susceptible to the disease with an
average score of 3 (Table 3).
Moderately susceptible landraces Afeb and Tuaka
In each of these landraces only one of the four markers
had alleles associated with the CMD2 gene. Therefore,
CMD2 gene resistance cannot be confirmed in these
landraces based on the genotypic data. However, the
phenotypic data available suggest that these two
landraces are susceptible to the CMD disease and
therefore cannot have the dominant CMD2 gene
(Table 3).
Resistant parental genotypes Dabodabo and TMEII
In the genotype TMEII, three of the four markers
revealed alleles associated with the CMD2 gene;
however, only one marker had an allele associated
with the CMD2 gene in Dabodabo (Table 3). Since not
all alleles of the four markers were found in these two
genotypes (landrace and IITA material), CMD resistance
cannot be confirmed with certainty in these
genotypes. Nonetheless, both landraces were phenotypically
classified as resistant. Further study will be
needed to confirm the source of resistance to CMD in
these parents. Further crosses involving these landraces
with a susceptible parent will be required to
verify this. If results are consistent with the banding
patterns as observed, then CMD2 gene resistance will
be inferred. If results are not consistent, then both
genotypes may represent a new source of CMD
resistance in these genotypes

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

อุณหภูมิช่องโปรแกรมเกี่ยวข้อง denaturation เป็นต้นขั้นตอน C 95 สำหรับ 2 นาทีตาม ด้วยรอบ 29 ที่C 94 สำหรับ 30 s การอบเหนียวที่ 55 C ใน 1 นาที และ72 C สำหรับ 1 นาที รอบสุดท้าย elongationของ C 72 สำหรับ 5 นาทีได้รวม ขยายผลิตภัณฑ์ถูกปล่อยที่ 4 C ก่อน electrophoresisประวัติเครื่องหมายรอยมี denaturation เป็นต้นของ C 95 สำหรับ 2 นาทีตาม ด้วยรอบ 34 ที่ 94 C สำหรับ30 s การอบเหนียวที่ 50 C 1 นาทีและภายในที่C 72 ใน 1 นาที elongation ขั้นสุดท้ายของ 72 C สำหรับ 5 นาทีโหลดย้อมดีเอ็นเอที่เพิ่มขยาย PCRผลิตภัณฑ์และชิ้นส่วน SSR ถูกคั่นด้วยelectrophoresis ใน agarose 1.5% และแผลเครื่องหมายบน polyacrylamide 6% SSR ทั้งสอง และรอยเครื่องหมายที่ใช้สำหรับยีน CMD2ผลลัพธ์ฟิลด์และการคัดกรองทำเครื่องหมายสำหรับยีน CMD2ในการศึกษาจีโนไทป์โดยผู้ปกครองยกเว้น CR42-4 อื่นเจ็ดCIAT ยอดรายการ CMD ที่ทนได้ Landracesจากกานาที่ใช้ในการตัดเหล่านี้มีแตกต่างกันปฏิกิริยากับ CMD กับ landraces Dabodabo และลักษณะทางพันธุกรรม IITA TMEII ทนอยู่กับการเฉลี่ยคะแนน 2 ขณะ landraces Afeb และ Tuakaได้ค่อนข้างไวต่อโรคด้วยการเฉลี่ยคะแนน 3 (ตาราง 3)Landraces ค่อนข้างไวต่อ Afeb และ Tuakaใน landraces เหล่านี้เพียงหนึ่งเครื่องหมาย 4มี alleles สัมพันธ์กับยีน CMD2 ดังนั้นCMD2 ยีนต้านทานไม่สามารถยืนยันในเหล่านี้landraces ที่ยึดตามข้อมูลจีโนไทป์ อย่างไรก็ตาม การไทป์ข้อมูลแนะนำที่สองเหล่านี้landraces มีความไวต่อโรค CMD และดังนั้นจึง ไม่มียีน CMD2 หลัก(ตาราง 3)ทนผู้ปกครองศึกษาจีโนไทป์ Dabodabo และ TMEIIในลักษณะทางพันธุกรรม TMEII สามเครื่องหมาย 4เปิดเผย alleles ที่เกี่ยวข้องกับยีน CMD2อย่างไรก็ตาม เครื่องหมายเดียวมี allele เกี่ยวข้องกับยีน CMD2 ใน Dabodabo (ตาราง 3) เนื่องจากไม่alleles ทั้งหมดของเครื่องหมายสี่พบในสองศึกษาจีโนไทป์ (แม่และวัสดุ IITA) ต่อต้านคำสั่งไม่สามารถยืนยัน ด้วยความแน่นอนในเหล่านี้ศึกษาจีโนไทป์ กระนั้น landraces ทั้งสองได้ phenotypicallyจัดเป็นทน จะศึกษาต่อต้องยืนยันแหล่งที่มาของความต้านทานต่อคำสั่งในผู้ปกครองเหล่านี้ เพิ่มเติม ตัด landraces เหล่านี้เกี่ยวข้องกับด้วยหลักไวต่อจะต้องตรวจสอบ ถ้าผลลัพธ์ไม่สอดคล้องกับแถบรูปแบบเป็นสังเกต แล้ว CMD2 ยีนต้านทานจะสรุป ถ้าผลลัพธ์ไม่สอดคล้องกัน ทั้งสองแล้วศึกษาจีโนไทป์อาจแสดงแหล่งใหม่ของคำสั่งความต้านทานในเหล่านี้ศึกษาจีโนไทป์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

โปรแกรมอุณหภูมิเกี่ยวข้องเริ่มต้น ( ขั้นตอน 95  C 2 นาที ตามด้วย 29 รอบใน
94  C 30 S , อบอ่อนที่อุณหภูมิ 55 องศาเซลเซียสนาน 1 นาที และ 
ส่วนขยายที่ 72  องศาเซลเซียสนาน 1 นาที ; สุดท้ายวงจรการ 
72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาทีรวม ผลิตภัณฑ์ขยาย
เหลือ 4  C ก่อน electrophoresis

( มีแผลเป็นเครื่องหมายโปรไฟล์เริ่มต้น95  C เป็นเวลา 2 นาที ตามด้วย 34 รอบที่ 94  C
30 S , อบอ่อนที่อุณหภูมิ 50 องศาเซลเซียสนาน 1 นาที และ  ส่วนขยายที่
72  องศาเซลเซียสนาน 1 นาที สุดท้ายการยืดตัวของ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที 
DNA โหลดย้อมถูกเพิ่มเข้าไป PCR (
ผลิตภัณฑ์และชี้นำ ชิ้นส่วนถูกแยกจากกันโดยวิธีอิเล็กโทรโฟรีซีสบน 1.5 %
, แผลเป็น
เครื่องหมายบน 6 % เจลอะคริลาไมด์ . ทั้งแผลเป็นเครื่องหมาย SSR และ
ถูกใช้เพื่อ cmd2
ยีนด้านผลการคัดกรองสำหรับ cmd2 เครื่องหมาย


พ่อแม่พันธุ์ ใน ยีน ด้วยข้อยกเว้นของ cr42-4 , อื่น ๆเจ็ด
เกี๊ยตยอดเส้นติดทน และ landraces
จากกานาใช้ไม้กางเขนเหล่านี้มีปฏิกิริยาแตกต่างกัน
cmd , และ landraces dabodabo
iita พันธุกรรม tmeii ป้องกันด้วย
คะแนนเฉลี่ย 2 ในขณะที่ landraces และ afeb tuaka
เป็นปานกลางต่อโรคด้วย
คะแนนเฉลี่ย 3 ( ตารางที่ 3 )

และ landraces afeb ไวปานกลางในแต่ละ tuaka landraces เหล่านี้เพียงหนึ่งในสี่ของเครื่องหมาย
มียีนที่เกี่ยวข้องกับ cmd2 ยีน ดังนั้น ,
cmd2 ยีนไม่สามารถต้านทานได้รับการยืนยันใน landraces เหล่านี้
ตามข้อมูลทางพันธุกรรม . อย่างไรก็ตาม คุณสมบัติของข้อมูลให้

สองคนนี้จะเสี่ยงต่อการเกิดโรค landraces และ CMD
จึงไม่สามารถมียีนเด่น cmd2
( ตารางที่ 3 )

และผู้ปกครอง dabodabo ทนน้ำหนัก tmeii ในพันธุกรรม tmeii สามสี่เครื่องหมาย
พบยีนที่เกี่ยวข้องกับ cmd2 ยีน ;
แต่เพียงหนึ่งเครื่องหมายมี
เกี่ยวข้องเป็นใน cmd2 ยีน ใน dabodabo ( ตารางที่ 3 ) เนื่องจากไม่ได้
พบทั้งหมดสี่เครื่องหมายที่พบในทั้งสอง
พันธุ์ ( แลนด์เรซและวัสดุ iita ) ไม่สามารถต้านทาน
cmd จะยืนยันกับความแน่นอนในสายพันธุ์เหล่านี้

อย่างไรก็ตาม ทั้งคู่ถูกจัดเป็น phenotypically landraces
ทน การศึกษาต่อจะ
จำเป็นเพื่อยืนยันแหล่งที่มาของความต้านทานใน CMD
ผู้ปกครองเหล่านี้ เพิ่มเติมที่เกี่ยวข้องกับสายพันธุ์ landraces เหล่านี้
กับพ่อแม่พันธุ์จะต้อง
ตรวจสอบนี้ ถ้าได้ผลสอดคล้องกับแถบ
รูปแบบอย่างสังเกต แล้วยีนจะต้านทาน cmd2
จะคิดได้เอง ถ้าผลไม่สอดคล้องกัน ทั้ง
พันธุ์อาจเป็นตัวแทนของแหล่งใหม่ของ CMD
ต้านทานในสายพันธุ์เหล่านี้