MaterialsSalt tolerant bacterial st

Materials
Salt tolerant bacterial strains
Samples taken for salt tolerant bacterial isolation contained
seawater, marine soil, salt lake water (15% and
20% NaCl w/v) and salt lake sediment clay; Samples were
collected from salt lake around coastal areas in Mahabalipuram
(60 km from Chennai) and from Adyar beach in
Chennai. Tannery saline wastewater samples were collected
from a commercial tannery at Chromepet, Chennai,
India. Serial dilution technique was adopted and the
separated colonies (> 10-6 dilution) were spread plated in
saline nutrient agar plates (varying salt concentrations
from 0–25% NaCl (w/v), covering all salt tolerant, moderate
and extreme halophilic ranges) and incubated at
37°C for 24 h. Screening of potent salt tolerant bacterial
strains was done based on salt tolerance limit and time of
adaptation. The isolated salt tolerant bacterial strains were
identified by 16S rRNA analysis (MWG AGBiotech, Bangalore,
India) (See additional files 1, 2, 3 and 4)
Culture medium
Isolation of salt tolerant bacterial colonies from saline
samples was made with nutrient agar (Himedia, MO12)
media with the following composition (in g l-1): Peptone;
10, NaCl; 5, Beef extract; 5 and Agar; 15. Solid NaCl was
added to the agar to obtain the desired salt concentration
and pH was adjusted to 7.0. Cultivation and optimization
experiments were performed with nutrient broth (NB)
media with the following composition: Peptic digest of
animal 5 g l-1, Yeast extract 1.5 g l-1, Beef extract 1.5 g l-1,
NaCl 5 g l-1. Dunda's media (for salt tolerant bacterial cultivation)
composed of MgSO4. 7H2O (20 g l-1), NaCl (150
g l-1), Trisodium citrate dihydrate (3 g l-1) CaCl2. 2H2O (1
g l-1), Peptone (10 g l-1) and Yeast extract (1 g l-1) was also
used in media optimization experiments.
Inoculum preparation
Frozen cultures of pure salt tolerant bacterial colonies
stored in agar slants were inoculated on 5 ml nutrient
broth media at aseptic conditions. The inoculated broth
was incubated in an orbitary shaker (Scigenics, India),
150 rpm and 37°C, for 24 h. Well-grown culture suspensions
with uniform concentration (absorbance at 600 nm
≈ 1) were used as sources of inoculum for all growth optimization
and wastewater experiments.
Analytical methods
Salinity was measured by the argentometric method [16].
Total dissolved and suspended solids were determ

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัสดุสายพันธุ์แบคทีเรียทนกับเกลือตัวอย่างที่ใช้สำหรับเกลือทนกับแบคทีเรียแยกอยู่ทะเล ดินทะเล เกลือน้ำทะเลสาบ (15% และNaCl 20% w/v) และเกลือทะเลตะกอนดิน ตัวอย่างดีรวบรวมจากเกลือทั่วพื้นที่ชายฝั่งทะเลในมหาพลีปุรัม(60 กม.จากเจนไน) และ จากหาดแอดยาร์เจนไน ตัวอย่างน้ำเสีย saline tannery ถูกเก็บรวบรวมจาก tannery พาณิชย์ที่ Chromepet เจนไนอินเดีย ถึงเทคนิคประจำเจือจางและได้แพร่กระจายชุบในอาณานิคมแยก (เจือจาง > 10-6)แผ่นธาตุอาหาร agar saline (เกลือความเข้มข้นแตกต่างกันจาก 0 – 25% NaCl (w/v), ครอบคลุมทั้งหมดเกลือทนกับ บรรเทาและช่วงที่ชอบเกลือมาก) และ incubated ที่37° C ใน 24 h. การคัดกรองของแบคทีเรียทนกับเกลือมีศักยภาพสายพันธุ์ทำตามวงเงินเผื่อเค็มและเวลาปรับตัว เกลือการแยกสายพันธุ์แบคทีเรียป้องกันความผิดพลาดได้ระบุ 16S rRNA วิเคราะห์ (MWG AGBiotech บังกาลอร์อินเดีย) (ดูเพิ่มเติมแฟ้ม 1, 2, 3 และ 4)สื่อวัฒนธรรมแยกเกลือทนกับอาณานิคมแบคทีเรียจากน้ำเกลือทำตัวอย่างกับ agar ธาตุอาหาร (Himedia, MO12)สื่อกับองค์ประกอบต่อไปนี้ (ใน g l-1): Peptone10, NaCl 5 แยกเนื้อ 5 และ Agar 15. มี NaCl แข็งagar เพื่อให้ได้ความเข้มข้นเกลือต้องเพิ่มและมีปรับค่า pH 7.0 เพาะปลูกและเพิ่มประสิทธิภาพดำเนินการทดลองกับธาตุอาหารซุป (NB)สื่อกับองค์ประกอบต่อไปนี้: Peptic ย่อยของ5 กรัมสัตว์ l-1, 1.5 g l-1 สารสกัดจากยีสต์ เนื้อแยก 1.5 g l-1NaCl 5 g l-1 สื่อของ Dunda (สำหรับปลูกทนกับแบคทีเรียเกลือ)ประกอบ MgSO4 7H2O (20 g l-1), NaCl (150g l-1), dihydrate Trisodium ซิเตรต (3 g l-1) CaCl2 2H2O (1g l-1), Peptone (10 g l-1) และยีสต์สกัด (1 g l-1) ยังใช้ในการทดลองเพิ่มประสิทธิภาพสื่อเตรียม inoculumแช่แข็งวัฒนธรรมของบริสุทธิ์เกลืออาณานิคมแบคทีเรียป้องกันความผิดพลาดเก็บใน agar slants มี inoculated บนอาหาร 5 mlสื่อซุปที่เข้มข้นเงื่อนไข ซุป inoculatedมี incubated ในการเชคเกอร์ orbitary (Scigenics อินเดีย),150 รอบต่อนาทีและ° C 37 สำหรับ 24 h. วัฒนธรรมปลูกห้องพักมีความเข้มข้นสม่ำเสมอ (absorbance ที่ 600 nm≈ 1) ใช้เป็นแหล่งของ inoculum สำหรับเพิ่มประสิทธิภาพการเจริญเติบโตทั้งหมดและทดลองบำบัดน้ำเสียวิธีวิเคราะห์เค็มถูกวัด โดยวิธี argentometric [16]ของแข็งที่ละลาย และระงับรวมได้ determ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัสดุ
เกลือสายพันธุ์แบคทีเรียใจกว้าง
ตัวอย่างดำเนินการสำหรับการแยกเกลือใจกว้างแบคทีเรียที่มี
น้ำทะเลดินทะเลเกลือน้ำในทะเลสาบ (15% และ
20% NaCl w / v) และเกลือดินตะกอนทะเลสาบ; ตัวอย่าง
ที่เก็บรวบรวมจากทะเลสาบเกลือรอบพื้นที่ชายฝั่งทะเลใน Mahabalipuram
(60 กิโลเมตรจากเชนไน) และจากชายหาดดายเออร์ใน
เมืองเชนไน โรงฟอกหนังตัวอย่างน้ำเสียน้ำเกลือที่ถูกเก็บรวบรวม
จากโรงฟอกหนังในเชิงพาณิชย์ที่ Chromepet เชนไน
ประเทศอินเดีย เทคนิคการเจือจางอนุกรมถูกนำมาใช้และ
อาณานิคมแยกออกจากกัน (> เจือจาง 10-6) ได้รับการแพร่กระจายชุบใน
จานอาหารเลี้ยงเชื้อสารอาหารน้ำเกลือ (เกลือที่แตกต่างกันมีความเข้มข้น
0-25% โซเดียมคลอไรด์ (w / v) ครอบคลุมเกลือทั้งหมดใจกว้างปานกลาง
ช่วงชอบเกลือและรุนแรง ) และบ่มที่
อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง การคัดเลือกแบคทีเรียที่มีศักยภาพเกลือใจกว้าง
สายพันธุ์ที่ได้กระทำขึ้นอยู่กับขีด จำกัด ของความอดทนเกลือและเวลาในการ
ปรับตัว เกลือที่แยกสายพันธุ์แบคทีเรียใจกว้างถูก
ระบุโดยการวิเคราะห์ 16S rRNA (MWG AGBiotech บังกาลอร์,
อินเดีย) (ดูแฟ้มเพิ่มเติม 1, 2, 3 และ 4)
วัฒนธรรมกลาง
แยกแบคทีเรียทนเค็มจากเกลือ
ตัวอย่างถูกทำให้มีสารอาหารวุ้น (HIMEDIA , MO12)
สื่อที่มีองค์ประกอบดังต่อไปนี้ (ก l-1): เปปโตน;
10, โซเดียมคลอไรด์; 5 สารสกัดจากเนื้อ; 5 และวุ้น; 15. ของแข็งโซเดียมคลอไรด์ที่ถูก
เพิ่มเข้ามาในอาหารเลี้ยงเชื้อเพื่อให้ได้ความเข้มข้นของเกลือที่ต้องการ
และมีการปรับค่า pH 7.0 การเพาะปลูกและการเพิ่มประสิทธิภาพ
ทดลองดำเนินการกับน้ำซุปสารอาหาร (NB)
สื่อที่มีองค์ประกอบต่อไปนี้: กระเพาะอาหารย่อยของ
สัตว์ 5 กรัม l-1, สารสกัดจากยีสต์ 1.5 กรัม l-1, เนื้อสารสกัดจาก 1.5 กรัม l-1,
5 กรัมโซเดียมคลอไรด์ l-1 . สื่อของ Dunda (เกลือเพาะปลูกใจกว้างแบคทีเรีย)
ประกอบด้วย MgSO4 7H2O (20 กรัม l-1), โซเดียมคลอไรด์ (150
กรัม l-1), ไตรโซเดียมซิเตรท dihydrate (3 กรัม l-1) CaCl2 2H2O (1
กรัม l-1), เปปโตน (10 กรัม l-1) และสารสกัดจากยีสต์ (1 กรัม l-1) ก็ยัง
ใช้ในการทดลองเพิ่มประสิทธิภาพของสื่อ.
เตรียมกล้าเชื้อ
แช่แข็งวัฒนธรรมของแบคทีเรียเกลือบริสุทธิ์ใจกว้าง
เก็บไว้ใน slants วุ้นอยู่ เชื้อเมื่อวันที่ 5 มลสารอาหารที่
สื่อน้ำซุปที่สภาวะปลอดเชื้อ น้ำซุปเชื้อ
ถูกบ่มในเครื่องปั่น orbitary (Scigenics, อินเดีย),
150 รอบต่อนาทีและ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง ดีปลูกสนองวัฒนธรรม
ที่มีความเข้มข้นสม่ำเสมอ (การดูดกลืนแสงที่ 600 นาโนเมตร
≈ 1) ถูกนำมาใช้เป็นแหล่งที่มาของเชื้อสำหรับทุกการเพิ่มประสิทธิภาพการเจริญเติบโต
และการทดลองบำบัดน้ำเสีย.
วิธีการวิเคราะห์
ความเค็มวัดโดยวิธี argentometric [16].
รวมของแข็งที่ละลายได้และระงับ determ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัสดุ

ตัวอย่างแบคทีเรียทนเค็มเกลือใจกว้างแบคทีเรียแยกที่มีอยู่
น้ำทะเล ดิน ทะเล ทะเลสาบ น้ำเค็ม ( 15 % และ 20 % NaCl
w / v ) และทะเลสาบเกลือ ตะกอนดิน ; จำนวน
เก็บจากทะเลสาบเกลือรอบพื้นที่ชายฝั่งทะเลใน Mahabalipuram
( 60 km จากเจนไน ) และจากเดีย
ชายหาดในเจนไน สามารถเก็บตัวอย่างน้ำเสีย
โรงฟอกหนังจากวิธีเชิงพาณิชย์ที่ chromepet เจนไน
อินเดีย เทคนิคการใช้อนุกรมและอาณานิคม ( >
แยกสามารถเจือจาง ) ชุบน้ำเกลือถูกแพร่กระจายใน
อาหารเลี้ยงเชื้อสารอาหารแผ่น ( ความเข้มข้นแตกต่างกันเกลือ
0 - 25 % NaCl ( w / v ) , ครอบคลุมทุกทนเค็มปานกลางและรุนแรงช่วงชั่น

) บ่มที่ 37 ° C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง การตรวจคัดกรองที่มีศักยภาพของแบคทีเรียทนเค็ม
สายพันธุ์ทนเค็มได้ตามวงเงินและระยะเวลา
การปรับตัว การแยกแบคทีเรียทนเค็มสายพันธุ์ระบุการวิเคราะห์ 16S rRNA (

agbiotech mwg , Bangalore , อินเดีย ) ( ดูไฟล์เพิ่มเติม 1 , 2 , 3 และ 4 )

สื่อวัฒนธรรมการแยกเกลือโคโลนีแบคทีเรียใจกว้างจากตัวอย่างเกลือ
ากับ NUMB3RS ( himedia mo12 , )
สื่อกับองค์ประกอบดังต่อไปนี้ ( G L-1 )เปปโตน ;
10 , เกลือ ; 5 , สารสกัดจากเนื้อ และวุ้น ; 15 แข็ง เกลือคือ
เพิ่มในวุ้นเพื่อให้ได้ความเข้มข้นของเกลือ
ที่ต้องการและปรับ pH 7.0 . การพัฒนาและเพิ่มประสิทธิภาพ
ทดลองกับน้ำซุปสารอาหาร ( NB )
สื่อที่มีองค์ประกอบดังต่อไปนี้ : ย่อยของสัตว์โดย
5 g L-1 , ยีสต์สกัด 1.5 กรัม L-1 , เนื้อสกัด 1.5 กรัม L-1
5 กรัม , เกลือ L-1 .dunda มีเดีย ( แบคทีเรียทนเค็มปลูก )
ประกอบด้วย MgSO4 ใ . 7h2o ( 20 กรัม L-1 ) , เกลือ ( 150
g L-1 ) , ไตรโซเดียมซิเตรต 2 ( 3 G L-1 ) CaCl2 . 2H2O-dx ( 1
g L-1 ) เปปโตน ( 10 กรัม ( L-1 ) และสารสกัดจากยีสต์ 1 กรัม L-1 ) ถูกทดลองใช้ในการเพิ่มประสิทธิภาพของสื่อ
.

เตรียมเชื้อแช่แข็งวัฒนธรรมของเกลือบริสุทธิ์ใจกว้างแบคทีเรียโคโลนี
เก็บไว้ในวุ้น slants ปลูกเชื้อบน 5 มล. สารอาหาร
ซุปสื่อที่สภาวะปลอดเชื้อ ที่ใส่ในเครื่องปั่นซุป
ถูกบ่ม orbitary ( scigenics อินเดีย ) ,
150 รอบต่อนาทีและ 37 ° C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง แล้วปลูกวัฒนธรรมสารแขวนลอย
กับความเข้มข้นของเครื่องแบบ ( การดูดกลืนแสงที่ 600 nm
≈ 1 ) ถูกใช้เป็นแหล่งที่มาของเชื้อที่เหมาะสมสำหรับการเจริญเติบโต และน้ำเสีย


วิธีการวิเคราะห์ผลการทดลองความเค็มวัดโดยวิธี argentometric [ 16 ] .
ทั้งหมดละลายและของแข็งแขวนลอยมีการรกร้างกำหนดไว