To determine the mechanism of Na-Ca

To determine the mechanism of Na-Ca exchange, we estimated the ratio of maximum velocity to Michaelis constant for extra-cellular Ca by measuring the rate of Ca uptake at very low extracellular Ca. In a Ping-Pong mechanism, one set of sites alternatively transports Ca and Na. In a sequential mechanism, Ca and Na sites are both filled during part of the transport cycle. In each set of experiments, two intracellular Na concentrations were studied. The Ca uptake rate (at low Ca) increased as Na increased; this is consistent with a sequential model, as has been found in other cells. We also examined the alternative hypothesis that the exchanger followed Ping-Pong kinetics and that the red blood cells had a submembrane pool for Ca that limited mixing with the cytosol. In these experiments Ca pump activity was monitored by measuring ATP hydrolysis. This model was disproven by experiments that indicated that greater than 80% of the Ca that entered the cell became bound to EGTA and less than 20% resulted in Ca efflux by the Ca pump.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เพื่อกำหนดกลไกของการแลกเปลี่ยน Na-Ca เราโดยประมาณอัตราส่วนของความเร็วสูงสุดการคง Michaelis สำหรับ Ca พิเศษโทรศัพท์มือถือ โดยการวัดอัตราการดูดซึม Ca ที่ Ca สารที่ต่ำมาก ในกลไกปิงปอง ชุดของไซต์อีกวิธีหนึ่งคือการขนส่ง Ca และนราธิวาส ในกลไกตามลำดับ Na และ Ca ไซต์ทั้งสองเต็มไปช่วงของรอบการขนส่ง มีศึกษาความเข้มข้น Na สองภายในเซลล์ในแต่ละชุดการทดลอง เพิ่มอัตราการดูดซึม Ca (ที่ Ca ต่ำ) เป็นนาเพิ่มขึ้น สอดคล้องกับแบบจำลองลำดับ ตามที่พบในเซลล์อื่น ๆ ได้ นอกจากนี้เรายังตรวจสอบสมมติฐานอื่นที่แลกเปลี่ยนตามปิงปองจลนพลศาสตร์ และว่า เซลล์เม็ดเลือดแดงมีสระว่ายน้ำ submembrane สำหรับ Ca ที่ผสมกับไซโตซอลที่จำกัด ในการทดลองนี้ กิจกรรมปั๊ม Ca ถูกตรวจสอบ โดยการวัดการย่อยสลาย ATP รุ่นนี้ถูก disproven โดยการทดลองที่ระบุว่า มากกว่า 80% ของ Ca ที่ป้อนเซลล์กลายเป็นผูกไว้กับ EGTA และน้อยกว่า 20% ส่งผลให้ Ca efflux โดย Ca ปั๊ม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เพื่อตรวจสอบกลไกของการแลกเปลี่ยน Na-CA เราประมาณอัตราส่วนของความเร็วสูงสุดที่ Michaelis คงที่สำหรับ CA พิเศษโทรศัพท์มือถือโดยการวัดอัตราการดูดซึมแคลเซียมที่ต่ำมาก extracellular แคลิฟอร์เนีย ในกลไกปิงปองหนึ่งชุดของเว็บไซต์ผลัดลำเลียงแคลเซียมและนา ในกลไกลำดับแคลเซียมและนาเว็บไซต์ที่เต็มไปทั้งในส่วนของวงจรการขนส่ง อยู่ในชุดการทดลองแต่ละสองความเข้มข้นนาภายในเซลล์มีการศึกษา อัตราการดูดซึมแคลเซียม (Ca ที่ต่ำ) เพิ่มขึ้นเป็นนาเพิ่มขึ้น ซึ่งสอดคล้องกับรูปแบบการเรียงตามลำดับตามที่ได้รับพบในเซลล์อื่น ๆ นอกจากนี้เรายังตรวจสอบสมมติฐานทางเลือกที่แลกเปลี่ยนที่ใช้จลนพลศาสตร์ปิงปองและเซลล์เม็ดเลือดแดงมีสระว่ายน้ำสำหรับ CA submembrane ที่ จำกัด ผสมกับเซลล์ ในการทดลองเหล่านี้ Ca ปั๊มกิจกรรมได้รับการตรวจสอบโดยการวัดเอทีพีจองจำ รุ่นนี้ได้รับการ disproven โดยการทดลองที่แสดงให้เห็นว่ามากกว่า 80% ของ Ca ที่ป้อนเซลล์กลายเป็นที่ผูกไว้กับ EGTA และน้อยกว่า 20% ส่งผลให้ใน Ca ไหลออกจากปั๊ม Ca

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เพื่อศึกษากลไกของนา CA ตรา เราคาดว่าอัตราส่วนของความเร็วสูงสุดคงที่มากพิเศษมือถือ CA โดยการวัดอัตราการใช้ที่น้อยมากและ CA CA ในปิงปองกลไกชุดหนึ่งของเว็บไซต์หรือลำเลียง Ca และ Na . ในกลไกต่อเนื่อง , Ca และ Na เว็บไซต์มีทั้งเติมในส่วนของรอบการขนส่ง ในแต่ละชุดการทดลอง ภายในเซลล์ความเข้มข้นสองนา ) อัตราการดูดซับ ( CA ต่ำ CA ) เพิ่มขึ้นเป็นนาขึ้น ซึ่งสอดคล้องกับรูปแบบต่อเนื่อง ขณะที่ยังพบในเซลล์อื่น ๆ นอกจากนี้เรายังตรวจสอบการแลกเปลี่ยนตามสมมติฐานว่า ปิงปอง จลนพลศาสตร์ และที่เซลล์เม็ดเลือดแดงมี submembrane สระ CA ที่ จำกัด ผสมกับเข็มทิศ . ในการทดลองเหล่านี้สามารถถูกตรวจสอบโดยการวัด ATP ปั๊มกิจกรรมการย่อยสลาย . รุ่นนี้มีการทดลองที่พบว่า disproven โดยกว่า 80% ของ CA ที่เข้าไปในเซลล์กลายเป็นผูกพันกับหน่วยและน้อยกว่า 20% ส่งผลโดย CA CA การปั๊ม