The crystal growth in chocolate model systems during cooling at 14ÛC was followed using a Leica
TCP SP2 confocal laser scanning microscope, (Mannheim, Germany). Images at a central point of each
sample were taken with 1-2 minute interval using an HCX PL AP0 oil objective with 63 times
magnification and a numerical aperature of 1.4. All images were recorded at a resolution of 1024×1024
pixels.
After 60 minutes of cooling at 14ÛC, FRAP measurements were made using a Leica TCP SP2
confocal laser scanning microscope (Mannheim, Germany) together with the rFRAP application available
on the Leica software according to the procedure described by [16]. The size of the ROI was set to a 10 ×
10 μm square, according to the rectangular FRAP (rFRAP) model developed by [17]. This relatively
small ROI allowed measurement of the local diffusion rate of small molecules, i.e. BODIPY, solely in the
fat crystal structure, so the ROI was always placed on the fat crystal networks visible in the frames. For
each replicate in the model system, five rFRAP measurements were made immediately after 60 min of
cooling and after one week of storage at 15°C. Only the rFRAP measurements where the experimental
and model data coincided were included in the results. Calculations of the local diffusion rate of
BODIPY, expressed in μm2
/s, in the cocoa butter matrix were then made according to the methods of
rectangular FRAP [17].
Global diffusion properties of the small molecule (BODIPY) were assessed with HPLC. The chocolate
model systems used for HPLC analysis were either pure cocoa butter or cocoa butter mixed with both
sugar and cocoa particles. Samples were also produced in which un-tempered cocoa butter (melted at
49°C for 10 min then cooled to 14°C for 60 min) and mixed with BODIPY to a final concentration of 100
ppm. Immediately after cooling, three samples representing 1) seeded/non-seeded cocoa butter, 2) untempered
cocoa butter mixed with BODIPY, and 3) seeded/non-seeded cocoa butter, sugar, and cocoa
particles, were placed into contact and held together by plastic foil. The samples were stored at 15°C for 5
d to allow BODIPY from the central layer to migrate into the adjacent model systems. After 5 d of
storage, the three-layer systems were split to their original layers using a razorblade. Each separated
model system was thereafter sliced into 8 thin layers (160 ȝm thick) using a Leica CM1900 cryostat
(Mannheim, Germany). Every second slice was collected for HPLC analysis corresponding to original
distances of 320, 640, 960, and 1280 ȝm from the cocoa butter/BODIPY layer. The amount of BODIPY
in each slice was determined with HPLC according to the method described by [16]. All three-layer
model systems were produced in duplicates.
การเจริญเติบโตของผลึกในระบบรุ่นช็อคโกแลตในระหว่างการระบายความร้อนที่14ÛCตามมาใช้ Leica
TCP SP2 confocal เลเซอร์สแกนกล้องจุลทรรศน์ (Mannheim, เยอรมนี) ภาพที่จุดกลางของแต่ละ
ตัวอย่างถูกนำ 1-2 ช่วงนาทีใช้น้ำมันวัตถุประสงค์ HCX PL AP0 63 ครั้ง
การขยายและ aperature ตัวเลข 1.4 ภาพทุกภาพที่ถูกบันทึกไว้ที่ความละเอียด 1024 × 1024
พิกเซล.
หลังจาก 60 นาทีของการทำความเย็นที่14ÛCวัด FRAP ถูกสร้างขึ้นมาโดยใช้ Leica TCP SP2
เลเซอร์ confocal กล้องจุลทรรศน์ (Mannheim, เยอรมนี) ร่วมกับโปรแกรมประยุกต์ rFRAP ที่มีอยู่
ในซอฟแวร์ Leica ตาม ขั้นตอนที่อธิบายโดย [16] ขนาดของผลตอบแทนการลงทุนที่ถูกตั้งค่าให้เป็น 10 ×
10 ไมครอนตารางตาม FRAP สี่เหลี่ยม (rFRAP) รุ่นที่พัฒนาโดย [17] นี้ค่อนข้าง
ผลตอบแทนการลงทุนขนาดเล็กที่ได้รับอนุญาตการวัดอัตราการแพร่กระจายของท้องถิ่นโมเลกุลขนาดเล็กเช่น BODIPY แต่เพียงผู้เดียวใน
โครงสร้างผลึกไขมันเพื่อให้ผลตอบแทนการลงทุนที่ถูกวางไว้บนเครือข่ายเสมอคริสตัลไขมันมองเห็นได้ในเฟรม สำหรับ
แต่ละซ้ำในระบบรูปแบบที่ห้าวัด rFRAP ถูกสร้างขึ้นมาทันทีหลังจาก 60 นาทีของ
การทำความเย็นและหลังจากหนึ่งสัปดาห์ของการเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 15 องศาเซลเซียส เฉพาะวัด rFRAP ที่ทดลอง
ข้อมูลและรูปแบบใกล้เคียงถูกรวมอยู่ในผลการค้นหา คำนวณจากอัตราการแพร่กระจายของท้องถิ่น
BODIPY แสดงออกในμm2
/ s ในเมทริกซ์เนยโกโก้ถูกสร้างขึ้นมาแล้วตามวิธีการของ
สี่เหลี่ยม FRAP [17].
คุณสมบัติการแพร่กระจายทั่วโลกของโมเลกุลขนาดเล็ก (BODIPY) ได้รับการประเมินด้วยวิธี HPLC ช็อคโกแลต
แบบจำลองระบบใช้ในการวิเคราะห์ HPLC มีทั้งเนยโกโก้หรือโกโก้บัตเตอร์บริสุทธิ์ผสมกับทั้ง
อนุภาคน้ำตาลและโกโก้ ตัวอย่างนอกจากนี้ยังมีการผลิตที่ยกเลิกอารมณ์เนยโกโก้ (ละลายที่
49 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาทีแล้วระบายความร้อนถึง 14 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 60 นาที) และผสมกับ BODIPY ความเข้มข้นสุดท้ายของ 100
ppm ทันทีหลังจากที่ระบายความร้อนสามตัวอย่างที่เป็นตัวแทน 1) เมล็ด / ไม่ใช่เมล็ดโกโก้บัตเตอร์, 2) ไม่ผ่านกรรมวิธีทำให้
เนยโกโก้ผสมกับ BODIPY และ 3) เมล็ด / ไม่ใช่เมล็ดโกโก้บัตเตอร์, น้ำตาล, และโกโก้
อนุภาคถูกวางไว้ในการติดต่อและจัดขึ้นร่วมกัน โดยฟอยล์พลาสติก ตัวอย่างถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 15 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5
D เพื่อช่วยให้ BODIPY จากชั้นกลางในการอพยพเข้าระบบรูปแบบที่อยู่ติดกัน หลังจาก 5 d จาก
การจัดเก็บระบบสามชั้นแบ่งเป็นชั้นเดิมของพวกเขาโดยใช้คมกริบ แต่ละแยก
ระบบแบบที่ถูกหั่นบาง ๆ หลังจากนั้นเป็น 8 ชั้นบาง ๆ (160 ȝmหนา) โดยใช้ cryostat Leica CM1900
(Mannheim, เยอรมนี) ทุกชิ้นที่สองที่ถูกเก็บรวบรวมเพื่อการวิเคราะห์ HPLC สอดคล้องกับเดิม
ระยะทาง 320, 640, 960 และ 1,280 ȝmจากเนยโกโก้ / ชั้น BODIPY ปริมาณของ BODIPY
ในแต่ละชิ้นถูกกำหนดด้วย HPLC ตามวิธีการอธิบายโดย [16] ทั้งหมดสามชั้น
แบบจำลองระบบการผลิตในที่ซ้ำกัน
การแปล กรุณารอสักครู่..
