MATERIALS AND METHODS
Samples and reagents Forty various types of sake samples, such as ordinary
sake and specially designated sake, were purchased from the market (June 2012,
Hiroshima, Japan). The sample descriptions are shown in Table 1.
Ribitol, 3-octanol, pyridine, dichloromethane, ethanol, sodium chloride,
ammonium sulfate and sodium sulfate were purchased from Wako Pure Chemical
Industries, Ltd. (Osaka, Japan). Methoxyamine hydrochloride was purchased from
SigmaeAldrich Co. LLC. (Milwaukee, WI, USA). N-Methyl-N-(trimethylsilyl) tri-
fluoroacetamide (MSTFA) and n-alkanes (C6eC25) were purchased from GL Science,
Inc. (Tokyo, Japan). 13C2-sotolon was synthesized according to (16).
Nonvolatile component analysis Twenty microliters of sake was dispensed
into a 1.5 mL micro tube. As an internal standard, ribitol (60 mL, diluted in deionized
water to 0.2 mg/mL) was added and mixed with the sample. Then, vacuum centrifugation
was performed for 2 h (Spin Dryer Standard VC-96R, TAITEC Co. Ltd., Tokyo,
Japan; Dry Vacuum Pump DTC-41, ULVAC, Inc., Kanagawa, Japan; Freeze Trap VA-
500R, TAITEC Co. Ltd.), followed by freeze-drying overnight (Freeze Dryer VD-800F,
TAITEC Co. Ltd.). All samples were analyzed in triplicates (n ¼ 3).
Oximation and trimethylsilylation were used for derivatization. First,
methoxyamine hydrochloride (100 mL, 20 mg/mL in pyridine) was added to the dried
sample and the mixture was incubated at 30C for 90 min (Thermomixer comfort,
Eppendorf Co. Ltd., Tokyo, Japan). MSTFA (50 mL) was then added and the mixture
was incubated at 37C for 30 min.
วัสดุและวิธีการตัวอย่างและ reagents สี่สิบสาเกชนิดต่าง ๆ ตัวอย่าง เช่นปกติซื้อจากตลาด (2555 มิถุนายน สาเกและสาเกที่กำหนดเป็นพิเศษฮิโรชิมา ญี่ปุ่น) คำอธิบายตัวอย่างแสดงในตารางที่ 1Ribitol, 3 octanol, pyridine, dichloromethane เอทานอล โซเดียม คลอไรด์ซื้อจาก Wako เพียวเคมีแอมโมเนียซัลเฟตและโซเดียมซัลเฟตอุตสาหกรรม จำกัด (โอซาก้า ญี่ปุ่น) ไฮโดรคลอไรด์ Methoxyamine ที่ซื้อจากSigmaeAldrich บริษัท LLC (มิลวอกี WI สหรัฐอเมริกา) ตรี N-Methyl-N-(trimethylsilyl)-fluoroacetamide (MSTFA) และ n-alkanes (C6eC25) ซื้อจากวิทยาศาสตร์ GLอิงค์ (โตเกียว ญี่ปุ่น) 13C 2-sotolon ถูกสังเคราะห์ตาม (16)คอมโพเนนต์ nonvolatile วิเคราะห์ยี่สิบ microliters ของสาเกเป็นคำลงในหลอดขนาดเล็ก 1.5 mL เป็นการ ribitol มาตรฐาน ภายใน (60 mL ผสมใน deionizedน้ำ 0.2 mg/mL) ถูกเพิ่ม และผสมกับตัวอย่าง Centrifugation แล้ว เครื่องดูดฝุ่นมีดำเนินการสำหรับ h 2 (หมุนเป่ามาตรฐาน VC-96R, TAITEC จำกัด โตเกียวญี่ปุ่น แห้งสูญญากาศ DTC-41, ULVAC, Inc. คานางาวะ ญี่ปุ่น ตรึงกับดัก VA-500R, TAITEC Co. Ltd.), ตาม ด้วยขั้นแอร์พอร์ตโอเวอร์ไนท์ (ตรึงเป่า VD-800FTAITEC จำกัด) มีวิเคราะห์ตัวอย่างทั้งหมดใน triplicates (n ¼ 3)Oximation และ trimethylsilylation ถูกใช้สำหรับ derivatization ครั้งแรกไฮโดรคลอไรด์ methoxyamine (100 มล 20 mg/mL ใน pyridine) ถูกเพิ่มไปที่แห้งตัวอย่างและส่วนผสมที่ incubated ที่ 30C สำหรับ 90 นาที (Thermomixer สบายEppendorf จำกัด โตเกียว ญี่ปุ่น) MSTFA (50 มล.) แล้วเพิ่มส่วนผสมและมี incubated ที่ 37C สำหรับ 30 นาที
การแปล กรุณารอสักครู่..
วัสดุและวิธีการ
ตัวอย่างและสารเคมีสี่สิบชนิดต่าง ๆ ของกลุ่มตัวอย่างประโยชน์เช่นสามัญ
ประโยชน์และประโยชน์ที่กำหนดพิเศษที่ซื้อมาจากตลาด (มิถุนายน 2012,
ฮิโรชิมา, ญี่ปุ่น) รายละเอียดตัวอย่างที่แสดงในตารางที่ 1.
Ribitol 3 อล, ไพริดีน, ไดคลอโรมีเทน, เอทานอลโซเดียมคลอไรด์,
แอมโมเนียมซัลเฟตและโซเดียมซัลเฟตที่ซื้อมาจากสารเคมี Wako บริสุทธิ์
อุตสาหกรรม จำกัด (โอซาก้า, ญี่ปุ่น) ไฮโดรคลอไร methoxyamine ซื้อมาจาก
SigmaeAldrich จำกัด LLC (Milwaukee, WI, USA) N-Methyl-N- (trimethylsilyl) ไตร
fluoroacetamide (MSTFA) และ n-อัลเคน (C6eC25) ที่ซื้อมาจาก GL วิทยาศาสตร์,
Inc. (โตเกียว, ญี่ปุ่น) 13C2-sotolon ถูกสังเคราะห์ตาม (16).
การวิเคราะห์องค์ประกอบ Nonvolatile ยี่สิบ microliters สาเกถูกจ่าย
เป็น 1.5 มิลลิลิตรหลอดไมโคร ในฐานะที่เป็นมาตรฐานภายใน ribitol (60 มิลลิลิตรเจือจางในกลั่น
น้ำถึง 0.2 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร) ถูกบันทึกและผสมกับตัวอย่าง จากนั้นหมุนเหวี่ยงสูญญากาศ
ได้รับการดำเนินการเป็นเวลา 2 ชั่วโมง (สปินเป่ามาตรฐาน VC-96R, Taitec จำกัด , โตเกียว,
ประเทศญี่ปุ่นฝุ่นแห้งปั๊ม DTC-41, ULVAC, Inc. , คานากาว่าประเทศญี่ปุ่นตรึงดัก VA-
500R, Taitec จำกัด ) ตามด้วยการแช่แข็งแห้งข้ามคืน (ตรึงเป่า VD-800F,
Taitec จำกัด ) ตัวอย่างทั้งหมดถูกวิเคราะห์ใน triplicates (n ¼ 3).
Oximation trimethylsilylation และถูกนำมาใช้สำหรับอนุพันธ์ แรก
ไฮโดรคลอไร methoxyamine (100 มล, 20 mg / ml ในไพริดีน) ถูกบันทึกอยู่ในแห้ง
ตัวอย่างและส่วนผสมที่ได้รับการบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 90 นาที (ความสะดวกสบาย Thermomixer,
Eppendorf จำกัด , โตเกียว, ญี่ปุ่น) MSTFA (50 มิลลิลิตร) ถูกเพิ่มเข้ามาแล้วและส่วนผสมที่
ได้รับการบ่มที่อุณหภูมิ 37C เป็นเวลา 30 นาที
การแปล กรุณารอสักครู่..
วัสดุและวิธีการ
ตัวอย่างและสารเคมีชนิดต่าง ๆเพื่อ 40 ตัวอย่าง เช่น สาเกธรรมดา
และพิเศษเขตสาเก ซื้อมาจากตลาด ( มิถุนายน 2012
ฮิโรชิมา , ประเทศญี่ปุ่น ) ตัวอย่างรายละเอียดแสดงในตารางที่ 1 .
ไรบิทอล 3-octanol pyridine , , , สิ่ง , เอทานอล , โซเดียมคลอไรด์ , โซเดียม ซัลเฟต และแอมโมเนียม ซัลเฟต
ซื้อจาก Wako เคมีบริสุทธิ์อุตสาหกรรมจำกัด ( โอซาก้า ) methoxyamine ไฮโดรคลอไรด์ซื้อมาจาก
sigmaealdrich Co . LLC ( Milwaukee , WI , USA ) n-methyl-n - -
( ไตรเมทิลไตรฟลูอ รอะเซทตาไมด์ ( mstfa ) และ n-alkanes ( c6ec25 ) ซื้อจาก GL วิทยาศาสตร์
อิงค์ ( โตเกียว , ญี่ปุ่น ) 13c2 sotolon สังเคราะห์ตาม ( 16 ) .
การวิเคราะห์องค์ประกอบ nonvolatile ยี่สิบตัวเลขของผลประโยชน์คือจ่าย
เป็น 1หลอดจิ๋ว 5 ml . เป็นมาตรฐานภายในไรบิทอล ( 60 มล. เจือจางในน้ำคล้ายเนื้อเยื่อประสาน
0.2 มก. / มล. ) เพิ่มและผสมกับตัวอย่าง งั้น
3 สูญญากาศแสดง 2 H ( ปั่นแห้งมาตรฐาน vc-96r taitec , จำกัด , โตเกียว , ญี่ปุ่น dtc-41
; บริการรับซ่อมปั๊มสูญญากาศ , Inc . , คานางาวะ , ญี่ปุ่น ; ตรึงกับดัก VA -
500r taitec Co . Ltd . , ) , ตามด้วยการทำแห้งแบบแช่แข็งค้างคืน ( vd-800f
,taitec Co . Ltd . ) ตัวอย่างวิเคราะห์ 3 ซ้ำ ( N ¼ 3 )
oximation trimethylsilylation และถูกใช้กับ . ก่อน
methoxyamine ไฮโดรคลอไรด์ ( 20 mg / ml ใน pyridine 100 ml ) ถูกเพิ่มลงในส่วนผสมแห้ง
ตัวอย่างและบ่มที่อุณหภูมิ 30 C 90 นาที ( thermomixer สบาย
เพนดอร์ฟ จำกัด , โตเกียว , ญี่ปุ่น ) mstfa ( 50 ml ) แล้วเพิ่มและผสม
คืออุณหภูมิ 37c
เป็นเวลา 30 นาที
การแปล กรุณารอสักครู่..