The biofilm formation was assessed

The biofilm formation was assessed on 12 well polystyrene (PS)
plates (Greiner Bio-One). Eachwell was filled with 1.5 ml of BHIMnG inoculated
with L. plantarum as described in the above paragraph and incubated
up to 72 h at 30 °C sealed with parafilm to avoid evaporation.
The biofilm formation was determined both by the CV assay and plate
counting to determine the number of culturable cells in the biofilm.
For this purpose, the medium was removed and the adhering cells in
each well were washed three times with 2ml of PBS and the remaining
biofilm was resuspended by scraping and rigorous pipetting in 2 ml of
PBS (Kubota et al., 2009; van der Veen and Abee, 2011). In addition,
the absence of clumps and cell aggregateswas confirmed by phase contrast
microscopy. Serial dilutions were prepared in PBS and plated on
MRS agar (Oxoid) and incubated at 30 °C for 48 h. Biofilm formation
was followed as a function of time (24, 48 or 72 h at 30 °C) and temperature
(20, 25, 30 and 37 °C for 72 h). All experiments involved three independent
biological replicates and each replicate included three
technical replicates.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การสร้างไบโอฟิล์มที่ได้รับการประเมินในวันที่ 12 สไตรีนดี (PS)
แผ่น (Greiner Bio-One) Eachwell ก็เต็มไปด้วย 1.5 มิลลิลิตร BHIMnG
เชื้อกับplantarum
ลิตรตามที่อธิบายไว้ในย่อหน้าข้างต้นและบ่มถึง72 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสปิดผนึกด้วย parafilm เพื่อหลีกเลี่ยงการระเหย.
การสร้างไบโอฟิล์มถูกกำหนดโดยการทดสอบทั้ง CV
และแผ่นนับถึงกำหนดจำนวนของเซลล์ culturable ในไบโอฟิล์มที่.
เพื่อจุดประสงค์นี้สื่อจะถูกลบออกและเซลล์ที่ยึดมั่นในแต่ละดีถูกล้างสามครั้งด้วย 2ml ของพีบีเอสและส่วนที่เหลือไบโอฟิล์มถูกresuspended โดยขูดและปิเปตอย่างเข้มงวดใน 2 มิลลิลิตรพีบีเอส( . คูโบต้า et al, 2009; ฟานเดอร์วีนและ Abee 2011) นอกจากนี้กรณีที่ไม่มีการกระจุกและเซลล์ aggregateswas ได้รับการยืนยันโดยเฟสตรงกันข้ามกล้องจุลทรรศน์ เจือจางอนุกรมได้จัดทำพีบีเอสและชุบบนMRS agar (Oxoid) และบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมง การสร้างไบโอฟิล์มตามมาเป็นหน้าที่ของเวลา (24, 48 หรือ 72 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียส) และอุณหภูมิ (20, 25, 30 และ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 72 ชั่วโมง) การทดลองที่เกี่ยวข้องทั้งหมดสามอิสระซ้ำทางชีวภาพและทำซ้ำแต่ละรวมสามซ้ำทางเทคนิค

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การสร้างไบโอฟิล์มและ 12 คือพอลิสไตรีน ( PS )
( ไกรเนอร์ไบจาน ) eachwell เต็มไปด้วย 1.5 มิลลิลิตร จาก bhimng
กับ L . plantarum ตามที่อธิบายไว้ในย่อหน้าข้างต้น และบ่ม
ถึง 72 H 30 ° C ปิดผนึกด้วยพาราฟิล์มเพื่อหลีกเลี่ยงการระเหย การสร้างไบโอฟิล์ม
ตั้งใจทั้ง CV ) และจาน
นับเพื่อหาจำนวนเซลล์ในฟิล์ม culturable .
สำหรับวัตถุประสงค์นี้ สื่อจะถูกลบออกและการยึดมั่นในแต่ละเซลล์
มีซักครั้งที่สามกับ 2ml ของ PBS และฟิล์มที่เหลือ
คือ resuspended โดยขูด และเคร่งครัด pipetting 2 มล.
PBS ( คูโบต้า et al . , 2009 ; ฟาน เดอ วีน และ abee , 2011 ) นอกจากนี้
การกระจุกและเซลล์ aggregateswas ยืนยันด้วยกล้องจุลทรรศน์ตรงกันข้าม
เฟส วิธีการเตรียมอนุกรมใน PBS และชุบบน
MRS agar ( oxoid ) และบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศา C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง กล่าวคือการพัฒนา
ตามมาเป็นฟังก์ชันของเวลา ( 24 , 48 และ 72 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิ 30 องศา C )
( 20 , 25 , 30 และ 37 ° C เป็นเวลา 72 ชั่วโมง ) การทดลองที่เกี่ยวข้องกับสามอิสระ
ซ้ำซ้ำซ้ำเทคนิคทางชีวภาพและแต่ละรวม 3