Aliquots of 250 mg were suspended i

Aliquots of 250 mg were suspended in 250 ml PBS and were serially diluted (from 101 to 108) and immediately plated on OADC-enriched Middlebrook 7H10 agar supplemented with sodium pyruvate for M. bovis in parallel with negative controls of non-inoculated soil.

Plates were incubated at 37 uC for 4 weeks and colonies were counted. Colonies were identified as MTC organisms after Ziehl–Neelsen staining and matrixassisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF-MS) identification; colonies were collected and prepared using the previously described protocol and then applied to a MALDI-TOF-MS 96 Microflex target (Bruker Daltonic) (El Khe´chine et al.; 2011). Further, an aliquot of soil inoculated for 12 months with M. tuberculosis was filtered at 5 mm to remove large particles, and mycobacteria were observed by optical microscopy after Ziehl– Neelsen staining and by electron microscopy.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Aliquots 250 มิลลิกรัมถูกหยุดชั่วคราวใน 250 ml PBS และถูกทำให้เจือจาง (จาก 101 ไป 108) serially และทันทีชุบบน Middlebrook อุดมไป OADC 7H agar 10 เสริม ด้วยโซเดียม pyruvate สำหรับบริษัทเมตรขนานกับควบคุมลบของดินไม่ใช่ inoculated แผ่นก็ incubated ที่ 37 uC สัปดาห์ที่ 4 และนับอาณานิคมได้ อาณานิคมระบุเป็นชีวิต MTC หลัง Ziehl – Neelsen ย้อมสี matrixassisted เลเซอร์ desorption/ionization เวลาและรหัสเที่ยวบินโตรเมทรี (MALDI TOF MS) อาณานิคมถูกรวบรวม และใช้โพรโทคอลที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ และกับเป้าหมาย Microflex 96 MALDI TOF MS (Bruker Daltonic) (al. et Khe´chine เอล 2011) เพิ่มเติม มีส่วนลงตัวของดิน inoculated เดือน 12 กับวัณโรคถูกกรองที่ 5 มม.เพื่อเอาอนุภาคขนาดใหญ่ และ mycobacteria ถูกตรวจสอบ โดยแสง microscopy หลัง Ziehl – Neelsen ย้อมสี และ โดย microscopy อิเล็กตรอน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

aliquots 250 มิลลิกรัมถูกระงับใน 250 มลพีบีเอสและได้รับการปรับลดลำดับ (101-108) และชุบทันทีใน OADC ที่อุดมด้วย Middlebrook 7H10 Agar เสริมด้วยไพรูโซเดียมสำหรับ M. Bovis ควบคู่ไปกับการควบคุมเชิงลบของดินที่ไม่ใช่เชื้อ. แผ่น บ่มที่อุณหภูมิ 37 UC เป็นเวลา 4 สัปดาห์และอาณานิคมนับ อาณานิคมถูกระบุว่าเป็นสิ่งมีชีวิต MTC หลังจากการย้อมสี Ziehl-Neelsen และ matrixassisted เลเซอร์ desorption / ไอออนไนซ์เวลาของมวลสารบิน (MALDI-TOF-MS) บัตรประจำตัว; อาณานิคมถูกเก็บรวบรวมและจัดทำขึ้นโดยใช้โปรโตคอลที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้แล้วนำไปใช้กับเป้าหมาย MALDI-TOF-MS 96 Microflex (Bruker Daltonic) (El Khe'chine และคณะ .; 2011) นอกจากนี้ลงตัวของดินเชื้อนาน 12 เดือนกับเชื้อวัณโรคถูกกรองที่ 5 มมที่จะเอาอนุภาคขนาดใหญ่และเชื้อมัยโคแบคทีเรียถูกตั้งข้อสังเกตโดยใช้กล้องจุลทรรศน์แสงหลังจากการย้อมสี Ziehl- Neelsen และกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เฉยๆ 250 mg หยุดชั่วคราวใน 250 ml PBS และเป็นเจือจาง ( จาก 101 ถึง 108 ) และทันทีที่ชุบในมสธ. อุดม Microdontinae เติมโซเดียมไพรูเวทสำหรับม. bovis ควบคู่กับการควบคุมทางลบที่ไม่ปลูกเชื้อในดิน

จานถูกบ่มที่ 37 เป็นต้น เป็นเวลา 4 สัปดาห์ และอาณานิคมได้ถูกนับอาณานิคมที่ถูกระบุว่าเป็น MTC สิ่งมีชีวิตหลังจากซิล– neelsen staining และ matrixassisted เลเซอร์การคาย / ไอเวลาของเที่ยวบิน ( มวลสาร maldi-tof-ms ) รหัส ; อาณานิคมได้ถูกรวบรวมและเตรียมใช้อธิบายก่อนหน้านี้ โปรโตคอล และประยุกต์ไป maldi-tof-ms 96 microflex เป้าหมาย ( BRUKER daltonic ) ( เอลเคใหม่จีน et al . ( 2011 ) เพิ่มเติมเป็นส่วนลงตัวของดินสำหรับ 12 เดือน เชื้อวัณโรคที่ 5 มม. ถูกกรองเอาอนุภาคขนาดใหญ่และมัยโคแบคทีเรียที่พบด้วยกล้องจุลทรรศน์แสงหลังจากซิล– neelsen การศึกษาด้วยกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน