2.7. Production of extracellular enzymes
Lemon peel, passion fruit peel, and grapefruit peel were used for the induction
of pectinases because of their high content of pectin (35.0%, 18.4%, and 21.2%,
respectively) [17–19], and also because they are produced in large quantities as
waste from the fruit processing industry. The peels were ground using a food processor,
and then washed three times with double-distilled water. Peels were dried
at 50 ◦C for 24 h before being utilized as substrate for the production of extracellular
enzymes. Parental and hybrid fungi were grown in 500mL Erlenmeyer flasks containing
200mL of liquid medium [0.2% (w/v) (NH4)2SO4, 0.2% (w/v) KH2PO4, 0.2%
(w/v) K2HPO4, pH 3] supplemented with either citric pectin, lemon peel, passion
fruit peel, or grapefruit peel at a concentration of 1% (w/v). The medium was autoclaved
at 121◦C for 20 min. The flasks containing medium were inoculated with
2×106 sporesmL−1. Cultivation was carried out at 37 ◦C, on a rotary shaker (New
Brunswick Scientific Co., NJ, USA) at 200 rpm, for 120 h. Samples were collected at
24-h intervals during 120 h. Samples were centrifuged for 20 min at 2500rpm at
room temperature to remove spores. Supernatants were filtered through Millipore
0.45mmembranes, and kept frozen at −20 ◦C until used. These preparations were
used as enzyme-containing filtrates during the course of the study.
2.7 การผลิตเอนไซม์ extracellularใช้สำหรับการเหนี่ยวนำเปลือกมะนาว เปลือกผลไม้ และเปลือกส้มโอของ pectinases เนื่องจากเนื้อหาของเพกทิน (35.0%, 18.4% และ 21.2% สูงตามลำดับ) [17-19], และเนื่องจากมีผลิตในปริมาณมากเป็นเสียจากอุตสาหกรรมแปรรูปผลไม้ Peels มีดินใช้ประกอบอาหารแล้ว ล้างสามครั้งน้ำกลั่นคู่ Peels ได้แห้งที่ 50 ◦C ใน 24 ชมก่อนที่จะถูกใช้เป็นพื้นผิวสำหรับการผลิตของ extracellularเอนไซม์ เชื้อราโดยผู้ปกครองและไฮบริดถูกปลูกในน้ำ Erlenmeyer ขนาด 500 มล.ประกอบด้วย200 มล.ของเหลวตัวกลาง [0.2% (w/v) (NH4) 2SO4, 0.2% (w/v) KH2PO4, 0.2%(w/v) K2HPO4, pH 3] เสริมอย่างใดอย่างหนึ่งเพกทินแอซิด ซิทริก เปลือกมะนาว ความรักเปลือกผลไม้ หรือเปลือกส้มโอที่ความเข้มข้น 1% (w/v) สื่อถูก autoclavedที่ 121◦C ใน 20 นาที น้ำที่ประกอบด้วยขนาดกลางมี inoculated ด้วย2 × 106 sporesmL−1 เพาะปลูกถูกดำเนินการที่ ◦C 37 ในเชคเกอร์โรตารี่ (ใหม่ไวก์วิทยาศาสตร์ Co., NJ สหรัฐอเมริกา) ที่ 200 รอบต่อนาที สำหรับ 120 h. ตัวอย่างถูกเก็บรวบรวมที่มี centrifuged 24 h ช่วงระหว่าง 120 h. ตัวอย่างใน 20 นาทีที่ 2500 รอบต่อนาทีที่อุณหภูมิห้องเอาเพาะเฟิร์น Supernatants ถูกกรองผ่านมาก0.45 mmembranes และเก็บแช่แข็งที่ −20 ◦C จนใช้ เตรียมเหล่านี้ได้ใช้เป็นเอนไซม์ที่ประกอบด้วย filtrates ในระหว่างหลักสูตรของการศึกษา
การแปล กรุณารอสักครู่..