2.2. Yeasts growth and isolation
The yeast populationwas counted twice aweek in the first twoweeks,
once a week in the following two months and twice in the last month of
the fermentation. Fromeach sample, 25 ml of fermentingmasswas diluted
with Ringer solution following the decimal dilution protocol and aliquots
were plated, in duplicate by surface spreading on Malt Extract
Agar (MEA, Scharlau, Spain) (pH 4.0). After the incubation period at
25 °C during 5 days, colonies were counted and yeast species diversity
was studied at four sampling points: on the 4th day (50 isolates), the
11th day (36 isolates), the 32nd day (42 isolates) and on the 108th day
(37 isolates) of fermentation. Representative colonies of all morphotypes
of yeasts were selected according to their macromorphology and isolated
in proportion to their frequencies and subcultured onto YEPD (yeast extract
5 g/l, peptone, 5 g/l, dextrose. 40 g/l agar 20 g/l) or Potato Dextrose
Agar (PDA, Scharlau, Spain) for subsequent identification. The isolated
strains were preserved at −70 °C using glycerol as cryoprotectant agent
(20% v/v).
2.2 การเจริญเติบโตของยีสต์และการแยก
populationwas ยีสต์นับ aweek สองครั้งในครั้งแรก twoweeks,
สัปดาห์ละครั้งในต่อไปนี้สองเดือนและครั้งที่สองในเดือนสุดท้ายของ
การหมัก ตัวอย่าง Fromeach 25 มิลลิลิตร fermentingmasswas เจือจาง
กับการแก้ปัญหาต่อไปนี้ Ringer โปรโตคอลเจือจางทศนิยมและ aliquots
ถูกชุบในที่ซ้ำกันโดยพื้นผิวการแพร่กระจายของสารสกัดจากมอลต์บน
วุ้น (กฟน, Scharlau, สเปน) (pH 4.0) หลังจากระยะเวลาการบ่มที่
อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียสในช่วง 5 วัน, อาณานิคมนับและความหลากหลายยีสต์สายพันธุ์ที่
ได้รับการศึกษาที่สี่จุดเก็บตัวอย่างในวันที่ 4 (50 ไอโซเลท) ซึ่งเป็น
วันที่ 11 (36 สายพันธุ์) วันที่ 32 (42 สายพันธุ์) และในวันที่ 108
(37 ไอโซเลท) ของการหมัก อาณานิคมตัวแทนของ morphotypes ทั้งหมด
ของยีสต์ได้รับการคัดเลือกตาม macromorphology ของพวกเขาและแยกได้
ในสัดส่วนที่ความถี่ของพวกเขาและเลี้ยงบน YEPD (สารสกัดจากยีสต์
5 กรัม / ลิตรเปปโตน, 5 g / l, เดกซ์โทรส. 40 g / l วุ้น 20 กรัม / ลิตร ) หรือมันฝรั่ง Dextrose
Agar (PDA, Scharlau, สเปน) สำหรับประชาชนที่ตามมา ที่แยก
สายพันธุ์ที่ได้รับการเก็บรักษาไว้ที่อุณหภูมิ -70 องศาเซลเซียสโดยใช้กลีเซอรีนเป็นตัวแทน cryoprotectant
(20% v / v)
การแปล กรุณารอสักครู่..

2.2 . การแยกยีสต์ยีสต์ใน twoweeks populationwas นับสองครั้งละ ครั้งแรกสัปดาห์ละครั้งในต่อไปนี้สองเดือนและครั้งที่สองในเดือนสุดท้ายของการหมัก ของตัวอย่าง , 25 มล. fermentingmasswas เจือจางกับ Ringer solution ตามทศนิยม ( โปรโตคอลและเฉยๆถูกชุบในที่ซ้ำกันโดยกระจายบนผิวสารสกัดจากข้าวมอลต์วุ้น ( กฟน , scharlau สเปน ) ( pH 4.0 ) หลังจากระยะเวลาที่25 ° C ในช่วง 5 วัน อาณานิคมถูกนับและชนิดของยีสต์ศึกษาตัวอย่างที่ 4 คะแนน ในวันที่ 4 ( 50 ไอโซเลท )11 วัน ( 36 ไอโซเลต ) , วันที่ 32 ( 42 isolates และวันครั้งที่ 108( 37 ไอโซเลทของการหมัก ตัวแทนของ morphotypes อาณานิคมทั้งหมดของยีสต์ที่คัดเลือกตาม macromorphology และแยกในสัดส่วนความถี่และ subcultured บนอาหารเลี้ยงเชื้อ ( สารสกัดจากยีสต์5 g / l ตามลำดับ 5 กรัมต่อลิตร , เดกซ์โทรส . 40 กรัมต่อลิตร ขนาด 20 กรัม / ลิตร ) หรือน้ำผึ้งมันฝรั่งAgar ( PDA , scharlau , สเปน ) ต่างๆ ที่ตามมา การแยกสายพันธุ์ที่ถูกเก็บรักษาไว้ที่ 70 องศา C โดยใช้กลีเซอรอล−เป็นตัวแทนน้ำยา( 20 % v / v )
การแปล กรุณารอสักครู่..
