Schwanniomyces occidentalis inverta

Schwanniomyces occidentalis invertase is an extracellular
enzyme that hydrolizes sucrose and releases
-fructose from
various oligosaccharides and essential storage fructan polymers
such as inulin. We report here the three-dimensional structure
of Sw. occidentalis invertase at 2.9A˚ resolution and its complex
with fructose at 1.9 A˚ resolution. The monomer presents a
bimodular arrangement common to other GH32 enzymes, with
an N-terminal 5-fold
-propeller catalytic domain and a C-terminal

-sandwich domain for which the function has been
unknown until now. However, the dimeric nature of Sw. occidentalis
invertase reveals a unique active site cleft shaped by
both subunits that may be representative of other yeast enzymes
reported to be multimeric. Binding of the tetrasaccharide nystose
and the polymer inulin was explored by docking analysis,
which suggested that medium size and long substrates are recognized
by residues from both subunits. The identified residues
were mutated, and the enzymatic activity of the mutants against
sucrose, nystose, and inulin were investigated by kinetic analysis.
The replacements that showed the largest effect on catalytic
efficiency were Q228V, a residue putatively involved in nystose
and inulin binding, and S281I, involved in a polar link at the
dimer interface. Moreover, a significant decrease in catalytic
efficiency against inulin was observed in the mutants Q435A
and Y462A, both located in the
-sandwich domain of the second
monomer. This highlights the essential function that oligomerization
plays in substrate specificity and assigns, for the first
time, a direct catalytic role to the supplementary domain of a
GH32 enzyme.
Fructans, the fru

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Schwanniomyces occidentalis invertase จะเป็น extracellularเอนไซม์ที่ซูโครส hydrolizes และรุ่น-ฟรักโทสจากoligosaccharides และโพลิเมอร์ fructan เก็บข้อมูลสำคัญต่าง ๆinulin เช่น เรารายงานโครงสร้างสามมิติที่นี่ของ Sw. occidentalis invertase 2.9A˚ ความละเอียดและความซับซ้อนกับฟรักโทสที่ความละเอียด A˚ 1.9 น้ำยานำเสนอเป็นทั่วไปเอนไซม์อื่น ๆ GH32, bimodular จัดด้วยมี N-เทอร์มินัล 5-fold - ใบพัดโดเมนตัวเร่งปฏิกิริยาและตัว C-เทอร์มินัล-แซนวิชโดเมนที่ได้รับการทำงานไม่รู้จักจนถึงปัจจุบัน อย่างไรก็ตาม ธรรมชาติของ Sw. occidentalis dimericinvertase เผยเพดานใช้งานเว็บไซต์ที่ไม่ซ้ำรูปโดยsubunits ทั้งที่อาจเป็นตัวแทนของเอนไซม์อื่น ๆ ยีสต์รายงานเป็น multimeric รวม tetrasaccharide nystoseและ inulin พอลิเมอร์ถูกสำรวจ โดยวิเคราะห์เทียบซึ่งแนะนำว่า ขนาดปานกลางยาวพื้นผิวที่รับรู้และโดยตกจาก subunits ทั้ง ตกที่ระบุได้กลาย และกิจกรรมเอนไซม์ในระบบของสายพันธุ์ต่อซูโครส nystose และ inulin ถูกสอบสวน โดยวิเคราะห์เดิม ๆแทนที่แสดงผลที่ใหญ่ที่สุดบนตัวเร่งปฏิกิริยาประสิทธิภาพได้ Q228V สารตกค้าง putatively เกี่ยวข้องกับ nystoseและ inulin ผูก และ S281I ที่เกี่ยวข้องในการเชื่อมโยงที่ขั้วโลกผลิตของ dimer อินเตอร์เฟซ นอกจากนี้ สำคัญลดตัวเร่งปฏิกิริยาประสิทธิภาพกับ inulin ถูกพบในสายพันธุ์ Q435Aและ Y462A ทั้งสองอยู่ในโดเมนที่สองแซนวิช-น้ำยา นี้เน้นฟังก์ชันสำคัญ oligomerization นั้นเล่นในพื้นผิว specificity และกำหนด สำหรับครั้งแรกเวลา บทบาทตัวเร่งปฏิกิริยาโดยตรงกับโดเมนที่ส่งเสริมการขายของการGH32 เอนไซม์Fructans, fru

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

schwanniomyces occidentalis เปรียบเทียบเป็นเอนไซม์ที่สำคัญ
hydrolizes ซูโครสและออก
- ฟรักโทสจากเทคโนโลยีต่าง ๆ และที่สำคัญกระเป๋าฟรุกแทน

( เช่น อินนูลิน . เรารายงานที่นี่โครงสร้างสามมิติ
ของ SW . occidentalis อินเวอร์เทสที่ความละเอียด˚ 2.9a และซับซ้อน
กับฟรักโทสที่ 1.9 เป็น˚ความละเอียด เพื่อนำเสนอ
การจัด bimodular ทั่วไปเอนไซม์ gh32 อื่นด้วย

- ใบพัดไอเสียถูกผู้อื่นเป็นโดเมนและโดเมนซึ่ง

- แซนด์วิช ซึ่งฟังก์ชั่นได้รับ
ยังไม่รู้จนถึงตอนนี้ อย่างไรก็ตาม ธรรมชาติท้องเฟ้อของ SW . occidentalis
เย็นพบเฉพาะงานเว็บไซต์แยกออกรูปโดย
ทั้งหน่วยที่อาจเป็นตัวแทนของเอ็นไซม์ยีสต์อื่น
รายงานที่จะ multimeric .ผูกพันของเททระแซ็กคาไรด์ nystose
และพอลิเมอร์อินนูลินสำรวจโดย Docking การวิเคราะห์
ซึ่งชี้ให้เห็นว่าขนาดและพื้นผิวที่ได้รับการยอมรับจากทั้งหน่วย
โดยตกค้าง . ระบุตกค้าง
ถูกกลายพันธุ์ และกิจกรรมของเอนไซม์กลายพันธุ์ต่อ
nystose ซูโครส และอินนูลินถูกศึกษาโดยการวิเคราะห์จลนศาสตร์ .
ใช้แทนที่พบมากที่สุดผลต่อประสิทธิภาพการ
ถูก q228v , กาก putatively เกี่ยวข้องใน nystose
และ อินนูลินผูกพันและ s281i เกี่ยวข้องในการเชื่อมโยงขั้วโลกที่
เมอร์อินเตอร์เฟซ นอกจากนี้ยังลดลงอย่างมากในประสิทธิภาพการ
กับอินนูลินพบในสายพันธุ์และ q435a
y462a ทั้งตั้งอยู่ใน
- แซนด์วิชโดเมนของมอนอเมอร์ 2

นี้ไฮไลท์สำคัญฟังก์ชันที่เซชัน
เล่นในแผ่นความจำเพาะและกำหนดเป็นครั้งแรก
, บทบาทการโดยตรงโดเมนเพิ่มเติมของ

gh32 ฟรุกแทนผลไม้ , เอนไซม์