MATERIAL AND METHODS For the produc

MATERIAL AND METHODS For the production of amylase from microbial sources, samples from different habitats like soil sample, rotted potato and spoiled food waste were collected and used for isolation studies. Soil and rotted potato were collected from CPPRI Campus, Saharanpur and spoiled food waste from city canteen CPPI, Saharanpur. The culture media used Nutrient Agar Medium (NAM), Isolation Medium-I, Isolation Medium- II, Starch agar medium, Nutrient broth, Media- A. Growth measurement was analyzed by using two methods, spectrophotometric method and oven dry method. Isolation of amylase producing bacteria from different source was done by serial
dilution method 1gm sample was added in 9 ml of sterile distilled water and homogeneous suspension was obtained, aseptically transferred 1ml sample of above dilution into 9ml sterile distilled water blanks and shake well to obtain 10-5 and 10-6 dilution. 1 ml of each dilution was pipette out and spread into the isolating media (Nutrient agar for bacteria only). After this the inoculated plates were incubated at 340C for 5-6 days. Purification & Screening of isolated strains for amylase enzyme is done. During primary and secondary screening iodine solution, Nutrient Agar Medium, Starch Agar Medium were used. Amylase producing microorganisms were primarily screened by activity zone technique with iodine solution. The pure cultures were inoculated at the centre of the sterile media poured plates and were incubated at 370C for 24 hrs for bacterial strains. After incubation, 1% iodine solution was over layered on the agar plates and the observation was made to note the substrate utilized zone around the colony. The isolated pure strains were screened for the production of extra cellular amylase production using starch agar medium. Amylase activity was assayed by measuring the reducing sugar formed by the enzymatic hydrolysis of soluble starch. The reaction mixture containing 1 ml of1% (w/v) soluble starch in citrate phosphate buffer (pH 6.5) and 1 ml culture extract enzyme was incubated at 400 C for 30 min. The reaction was stopped by addition of 2 ml of dinitrosalicylic acid (DNS) reagents. The reaction mixture was heated for 5 min in boiling water bath and absorbance was read at 540 nm to estimate reducing sugars released. The activity of amylase enzyme was determined as IU/ ml Enzyme activity was calculated from the amount of reduced sugar produced in 30 minutes, by following formula-

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัสดุและวิธีการสำหรับการผลิตของอะไมเลสเป็นจากแหล่งจุลินทรีย์ ตัวอย่างจากแหล่งที่อยู่อาศัยแตกต่างกันเช่นตัวอย่างดิน มันฝรั่งที่สองกล่าวอาหารบูดเสียเก็บ และถูกใช้สำหรับการศึกษาแยก ดินและมันฝรั่งที่สองกล่าวถูกรวบรวมจากมหาวิทยาลัย CPPRI, Saharanpur และอาหารบูดเสียจากโรงอาหารเมือง CPPI, Saharanpur สื่อวัฒนธรรมการใช้สื่อวุ้นสารอาหาร (น้ำ), แยกกลาง-I แยกกลาง II แป้งวุ้นปานกลาง สารอาหารซุป สื่อ - ก.เจริญเติบโตของวัดถูกวิเคราะห์ โดยใช้วิธีการสองวิธี วิธี spectrophotometric และเตาอบแห้งวิธี แยกของอะไมเลสที่ผลิตแบคทีเรียมาทำสินค้า ตัวอย่าง 1 กรัมวิธีเจือจางเพิ่มใน 9 ml ของน้ำกลั่นที่ผ่านการฆ่าเชื้อ และระงับเหมือนได้รับ aseptically โอน 1 มล.ตัวอย่างข้างต้นเจือจางเข้าช่อง 9 มล.น้ำกลั่นที่ปลอดเชื้อและสั่นดีการเจือจาง 10-5 และ 10-6 1 มิลลิลิตรเจือจางแต่ละถูกเปตออก และแพร่กระจายไปยังสื่อที่ isolating (สารอาหารวุ้นสำหรับแบคทีเรียเท่านั้น) หลังจากนี้ แผ่น inoculated ได้รับการกกที่ 340C 5-6 วัน จะทำให้บริสุทธิ์และคัดเลือกสายพันธุ์ที่แยกสำหรับเอนไซม์อะไมเลส ตรวจแก้ปัญหาไอโอดีน สารอาหารวุ้นขนาดกลาง ปานกลางแป้งวุ้นใช้ ระหว่างประถม และมัธยม อะไมเลสที่ผลิตจุลินทรีย์คัด โดยเทคนิคโซนกิจกรรมแก้ไขปัญหาไอโอดีนเป็นหลัก วัฒนธรรมบริสุทธิ์ถูก inoculated ที่ศูนย์ของเทแผ่นสื่อผ่านการฆ่าเชื้อ และได้รับการกกที่ 370C 24 ชั่วโมงสำหรับสายพันธุ์แบคทีเรีย หลังจากบ่ม แก้ปัญหาไอโอดีน 1% เป็นกว่าชั้นบนแผ่นวุ้น และทำการสังเกตเพื่อทราบโซนพื้นที่ใช้ทั่วอาณานิคม มีคัดแยกสายพันธุ์บริสุทธิ์ในการผลิตการผลิตอะไมเลสเป็นพิเศษโทรศัพท์มือถือโดยใช้แป้งวุ้นขนาดกลาง อะไมเลสกิจกรรมถูก assayed โดยการวัดลดน้ำตาลที่เกิดจากการย่อยสลายของแป้งละลายเอนไซม์ % (W/v) of1 1 มล.แป้งละลายในซิเตรตฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 6.5) ที่ประกอบด้วยส่วนผสมของปฏิกิริยา และเอนไซม์สกัดวัฒนธรรม 1 มล. incubated 400 c เป็นเวลา 30 นาที ปฏิกิริยาได้หยุดลง โดยเพิ่ม 2 มล.ของ reagents (DNS) กรด dinitrosalicylic ส่วนผสมของปฏิกิริยาถูกความร้อนสำหรับ 5 นาทีในการต้มน้ำและค่าถูกอ่านที่ 540 nm การประเมินลดน้ำตาลออก กำหนดกิจกรรมของเอนไซม์อะไมเลสเป็น IU / ml เอนไซม์ถูกคำนวณจากจำนวนผลิต 30 นาทีที่แล้ว โดยสูตรต่อไปนี้ - ลดน้ำตาล

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัสดุและวิธีการสำหรับการผลิตของอะไมเลสจากแหล่งจุลินทรีย์ตัวอย่างจากแหล่งที่อยู่อาศัยที่แตกต่างกันเช่นตัวอย่างดินมันฝรั่งเน่าและเศษอาหารเน่าเสียที่ถูกรวบรวมและใช้สำหรับการศึกษาการแยก ดินและมันฝรั่งเน่าถูกรวบรวมมาจากวิทยาเขต CPPRI, Saharanpur และของเสียจากอาหารบูดเมืองโรงอาหาร CPPI, Saharanpur สื่อวัฒนธรรมที่ใช้ธาตุอาหารวุ้นปานกลาง (NAM) การแยก Medium-I, II แยกปานกลางกลางแป้งวุ้นธาตุอาหารน้ำซุปสื่อการวัดการเจริญเติบโตของเอได้รับการวิเคราะห์โดยใช้สองวิธีวิธีสเปกและเตาอบแห้งวิธี การแยกอะไมเลสแบคทีเรียที่ผลิตจากแหล่งที่มาที่แตกต่างกันทำโดยอนุกรม
เจือจางตัวอย่างวิธี 1gm ถูกเพิ่มเข้ามาใน 9 มิลลิลิตรของน้ำกลั่นผ่านการฆ่าเชื้อและระงับเป็นเนื้อเดียวกันได้รับตัวอย่าง 1ml โอนปลอดเชื้อของการลดสัดส่วนข้างต้นลงใน 9ml หมันช่องว่างน้ำกลั่นและเขย่าดีที่จะได้รับ 10 -5 และ 10-6 เจือจาง 1 มิลลิลิตรของแต่ละเจือจางเป็นหลอดออกมาและแพร่กระจายเข้าไปในสื่อแยก (อาหารเลี้ยงเชื้อแบคทีเรียเท่านั้น) หลังจากนี้จานเพาะเชื้อที่ถูกบ่มที่ 340C ใช้เวลาประมาณ 5-6 วัน บริสุทธิ์และการคัดเลือกสายพันธุ์ที่แยกเอนไซม์อะไมเลสจะทำ ในระหว่างการแก้ปัญหาการคัดกรองสารไอโอดีนประถมศึกษาและมัธยมศึกษาธาตุอาหารวุ้นขนาดกลาง, แป้งวุ้นกลางถูกนำมาใช้ อะไมเลสผลิตจุลินทรีย์ที่ถูกคัดกรองเบื้องต้นโดยเทคนิคโซนกิจกรรมด้วยสารละลายไอโอดีน วัฒนธรรมบริสุทธิ์ถูกเชื้อที่เป็นศูนย์กลางของสื่อผ่านการฆ่าเชื้อเทแผ่นและได้รับการบ่มที่ 370C เป็นเวลา 24 ชั่วโมงสำหรับสายพันธุ์ของเชื้อแบคทีเรีย หลังจากบ่ม 1 แก้ปัญหาไอโอดีน% ถูกกว่าชั้นบนจานอาหารเลี้ยงเชื้อและการสังเกตที่ถูกสร้างขึ้นมาเพื่อทราบตั้งต้นโซนใช้ทั่วอาณานิคม สายพันธุ์บริสุทธิ์ที่แยกได้ถูกคัดกรองสำหรับการผลิตการผลิตอะไมเลสมือถือที่เพิ่มขึ้นโดยใช้สื่อแป้งวุ้น กิจกรรมอะไมเลสได้รับการวิเคราะห์โดยการวัดน้ำตาลลดที่เกิดขึ้นจากการย่อยของเอนไซม์ของแป้งที่ละลายน้ำได้ ผสมปฏิกิริยาที่มี 1 มิลลิลิตรของ 1% (w / v) แป้งที่ละลายในบัฟเฟอร์ซิเตรทฟอสเฟต (pH 6.5) และ 1 มิลลิลิตรเอนไซม์สารสกัดจากวัฒนธรรมได้รับการบ่มที่อุณหภูมิ 400 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 นาที ปฏิกิริยาก็หยุดโดยนอกเหนือจาก 2 มิลลิลิตรของกรด dinitrosalicylic (DNS) น้ำยา ผสมปฏิกิริยาถูกความร้อนเป็นเวลา 5 นาทีในอ่างน้ำเดือดและการดูดกลืนแสงได้อ่านที่ 540 นาโนเมตรในการประมาณการลดน้ำตาลได้รับการปล่อยตัว กิจกรรมของเอนไซม์อะไมเลสถูกกำหนดเป็นกิจกรรม IU / ml เอนไซม์ที่คำนวณได้จากปริมาณน้ำตาลที่ลดลงการผลิตใน 30 นาทีโดยทำตามสูตรยา