2.4. Viruses, cells, cloning, and e

2.4. Viruses, cells, cloning, and expression of neuraminidase A full length cDNA encoding the neuraminidase of novel H1N1 influenza (A/California/08/2009(H1N1)) and oseltamivir-resistant neuraminidase (H274Y mutant) were constructed as previously reported method (Dao et al., 2010). The influenza strains A/Chicken/ Korea/O1310/2001 (H9N2) and A/Sw/Kor/CAH1/04 (H1N1, KCTC 11165BP) were used in this study. 293T cells (human embryonic kidney cells) was maintained in Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM) (Welgene) supplemented with 10% fetal bovine serum at 37 C and 5% CO2. The 293T cells were counted and plated in 6-well plates at a density of 105 cells/well. After 24 h, the cells were transfected with the plasmids containing the cDNAs using a commercial transfection kit (Welfect EX-plus, Welgene, Daegu, Korea), according to the manufacturer’s instructions.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4 ไวรัสเซลล์โคลนและการแสดงออกของ neuraminidase ยีนยาวเต็มรูปแบบการเข้ารหัส neuraminidase ของไข้หวัดใหญ่ H1N1 นวนิยาย (A / แคลิฟอร์เนีย / 08/2009 (H1N1)) และ neuraminidase oseltamivir ทน (กลายพันธุ์ H274Y) ถูกสร้างขึ้นเป็นวิธีการรายงานก่อนหน้านี้ (ดาว et al., 2010) ไข้หวัดใหญ่สายพันธุ์ A / ไก่ / เกาหลี / O1310 / 2001 (H9N2) และ / Sw / ก / CAH1 / 04 (H1N1, KCTC 11165BP) ถูกนำมาใช้ในการศึกษานี้ เซลล์ 293T (มนุษย์เซลล์ไตของตัวอ่อน) ได้รับการเก็บรักษาไว้ใน Dulbecco ของดัดแปลงอินทรีกลาง (DMEM) (Welgene) เสริมด้วย 10% ซีรั่มวัวของทารกในครรภ์ที่ 37 ซีและ CO2 5% เซลล์ 293T นับและชุบในแผ่น 6 ได้ดีที่ความหนาแน่น 105 เซลล์ / ดี หลังจาก 24 ชั่วโมงเซลล์ถูก transfected ที่มีพลาสมิดที่มี cDNAs โดยใช้ชุด transfection เชิงพาณิชย์ (Welfect EX-บวก Welgene, แทกูเกาหลีใต้) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4 . ไวรัส , เซลล์ , การโคลนและการแสดงออกของยีนนิวรามินิเดสเต็มความยาวและนิวรามินิเดสของนวนิยาย H1N1 ไข้หวัดใหญ่ในกลุ่ม ( A / California / 08 / 2009 ( H1N1 ) ) และนิวรามินิเดสดื้อยาโอเซลทามิเวีย ( h274y กลายพันธุ์ ) ได้ถูกสร้างขึ้นตามที่รายงานก่อนหน้านี้วิธี ( ดาว et al . , 2010 ) ไข้หวัดใหญ่สายพันธุ์ A / ไก่ / เกาหลี / o1310 / 2544 ( h9n2 ) และ A / SW / คอ / cah1 / 04 ( )kctc 11165bp ) สถิติที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้ 293t เซลล์ ( เซลล์ไตของมนุษย์ ) คือการรักษาในดัลเบโค่นกอินทรีขนาดกลาง ( dmem ) ( welgene ) เสริมด้วย 10% fetal bovine serum ที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสคาร์บอนไดออกไซด์ 5% เซลล์ 293t ถูกนับและ 6-well แผ่นชุบที่ความหนาแน่นของ 105 เซลล์ / ดี หลังจาก 24 ชั่วโมงเซลล์ก็ transfected ด้วยพลาสมิดที่มี cdnas ใช้สำหรับพาณิชย์ Kit ( welfect อดีตบวก welgene , แดกู , เกาหลีใต้ ) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต