2.2. Colchicine treatmentThe experi

2.2. Colchicine treatment
The experiment had a factorial arrangement with three factors(genotype, colchicine concentration, and exposure time)and was conducted on in vitro propagated shoots, which were obtained from calluses induced on inflorescence segments originating from plants grown in a ground greenhouse. For callus induction, 1-mm segments of immature inflorescences (0.1–2.5cm in length) were dissected and grown in the dark on a modified
MS medium (Murashige and Skoog, 1962) containing 5mg/l 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) and 0.1 mg/l 6-benzylaminopurine (BAP) (Głowacka et al., 2010). For shoot regeneration, calluses were transferred into MS medium supplemented with 2mg/l BAP and cultured under 16-h photoperiod conditions (100molm−2 s−1) at 26±2 ◦C. The shoots were subcultured at least twice (every 4 weeks), and shoot clusters were then divided into single axillary shoots, trimmed to 5cm in length and placed in test tubes containing 5ml of an aqueous, filtersterilised solution of colchicine. In the experiment, we tested four colchicine concentrations (156.5, 313, 626 and 1252M) and three exposure times (6, 18 and 24 h) in all combinations except for the lowest colchicine concentration (156.5M), for which the shortest exposure time (6 h) was not tested. Non-colchicine-treated shoots (0M/0 h) transferred directly into shoot regeneration medium
were used as controls. Thirty shoots were used in each treatment. Colchicine treatments were given under 40–50molm−2 s−1 light conditions. After treatment, the remaining colchicine solution was removed using filter paper, and the shoots were washed three
times with sterile water. All of the shoots were transferred into MS medium supplemented with 2mg/l BAP. The shoots were grown for 12 weeks, subculturing every 4weeks. During subculture, the shoot clumps were subdivided into single shoots and counted. These data
were used to calculate the survival rate (the percentage of the shoots that survived) and the tillering rate of the shoots (defined as the ratio between the number of the multiplied shoots and the total number of the treated shoots). The rates were estimated
for the cultures in the 12th week after the colchicine treatment. For the root induction of single shoots, MS medium with 1 mg/l 1-naphthylacetic acid (NAA) was used. Shoot cultures were regenerated and maintained under light conditions (16 h photoperiod, 100molm−2 s−1) at 26±2 ◦C. Regenerated plants were transplanted into plastic boxes containing a 1:3 mixture of peat and sand,and they were kept in a greenhouse.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.2. โคลชิซีนรักษาทดลองมีจัดแฟกกับปัจจัยสามประการ (ลักษณะทางพันธุกรรม ความเข้มข้นของโคลชิซีน และเวลาเปิดรับแสง) และวิธีการในการถ่ายภาพเครื่องเผยแพร่ ที่ได้รับจาก calluses เกิดในเซ็กเมนต์ inflorescence เกิดจากพืชที่ปลูกในเรือนกระจกดิน การเหนี่ยวนำให้ 1 มม.ส่วนของช่อเขียว immature (0.1 – 2.5 ซม.ยาว) dissected และปลูกในมืดในการแก้ไขกลาง MS (Murashige และ Skoog, 1962) ประกอบด้วยกรด 2, 4-dichlorophenoxyacetic 5mg/l (2, 4-D) และ 0.1 mg/l 6-benzylaminopurine (BAP) (Głowacka et al., 2010) สำหรับยิงฟื้นฟู calluses ได้โอนเข้า MS กลางเสริม ด้วย 2mg/l BAP และอ่างภายใต้เงื่อนไข 16 h ชั่วโมง (100 molm−2 s−1) ที่ 26±2 ◦C ถ่ายภาพมี subcultured น้อยครั้ง (ทุก 4 สัปดาห์), และยิง คลัสเตอร์ถูกแบ่งออกเป็นยอดเดียวรักแร้ ตัด 5 ซม.ความยาว แล้ววางลงในหลอดทดสอบประกอบด้วย 5ml ของการ filtersterilised ละลายของโคลชิซีน ในทดลอง เราทดสอบความเข้มข้นโคลชิซีนสี่ (156.5, 313, 626 และ 1252 M) และแสงสามเวลา (h 6, 18 และ 24) ในชุดทั้งหมดยกเว้นต่ำโคลชิซีนความเข้มข้น (156.5 M), ซึ่งเวลาเปิดรับแสงสั้นที่สุด (6 h) ไม่ทดสอบ ไม่ใช่โคลชิซีนรับถ่ายภาพ (0 M/0 h) โอนตรงเข้ายิงกลางฟื้นฟูถูกใช้เป็นตัวควบคุม ถ่ายภาพ 30 ถูกใช้ในการรักษาแต่ละ โคลชิซีนรักษาได้รับภายใต้ 40 – 50 molm−2 s−1 สภาพแสง หลังการรักษา โซลูชันโคลชิซีนที่เหลือถูกเอาออกโดยใช้กระดาษกรอง และการถ่ายภาพถูกล้างสามเวลาใส่น้ำ การถ่ายภาพทั้งหมดถูกโอนเข้ากลาง MS เสริม ด้วย 2mg/l BAP. การถ่ายภาพได้ปลูก 12 สัปดาห์ subculturing ทุก 4 สัปดาห์ ระหว่างวัฒนธรรม กระจุกยิงถูกปฐมภูมิเป็นยอดเดียว และนับ ข้อมูลเหล่านี้ถูกใช้ในการคำนวณอัตราการอยู่รอด (เปอร์เซ็นต์ของยอดที่รอดชีวิต) และอัตรา tillering ถ่ายภาพ (กำหนดเป็นอัตราส่วนระหว่างจำนวนยอดคูณและจำนวนยอดบำบัด) มีประเมินราคาสำหรับวัฒนธรรมในสัปดาห์ 12 หลังการรักษาโคลชิซีน การเหนี่ยวนำรากของถ่ายภาพเดียว มีใช้ MS กลาง ด้วยกรด 1-naphthylacetic 1 mg/l (NAA) วัฒนธรรมยิงถูกสร้าง และเก็บรักษาภายใต้สภาพแสง (16 h ชั่วโมง 100 molm−2 s−1) ที่ 26±2 ◦C พืชสร้างได้ transplanted ลงในกล่องพลาสติกที่ประกอบด้วยส่วนผสม 1:3 ของพรุและทราย และพวกเขาถูกเก็บไว้ในเรือนกระจก

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.2 การรักษา colchicine
การทดลองมีการจัดปัจจัยที่มีสามปัจจัย (genotype เข้มข้น colchicine และเวลารับแสง) และได้รับการดำเนินการเกี่ยวกับการขยายพันธุ์ในหลอดทดลองยิงซึ่งได้จากแคลลัสเกิดในส่วนช่อดอกที่มาจากพืชที่ปลูกในเรือนกระจกพื้นดิน การชักนำแคลลัส, กลุ่ม 1 มิลลิเมตรช่อดอกที่ยังไม่บรรลุนิติภาวะ (0.1-2.5cm ความยาว) ได้รับการชำแหละและการเจริญเติบโตในที่มืดในการปรับเปลี่ยน
สูตร MS (Murashige และ Skoog, 1962) ที่มี 5mg / ลิตรกรด 2,4-dichlorophenoxyacetic (2 , 4-D) และ 0.1 mg / l 6-benzylaminopurine (BAP) (Głowacka et al., 2010) สำหรับการฟื้นฟูยิงหยาบถูกย้ายลงใน MS กลางเสริมด้วย 2mg / ลิตร BAP และเพาะเลี้ยงภายใต้สภาพแสง 16 ชั่วโมง (100 molm-2 s-1) ที่อุณหภูมิ 26 ± 2 ◦C ถ่ายได้ทำการถ่ายเชื้ออย่างน้อยสองครั้ง (ทุก 4 สัปดาห์) และยิงกลุ่มถูกแบ่งออกแล้วเป็นใบเดี่ยวออกที่ซอกใบตัดเพื่อ 5cm ยาวและวางไว้ในหลอดทดลองที่มี 5ml ของน้ำ, filtersterilised แก้ปัญหาของโคลชิซิน ในการทดลองที่เราได้ทดสอบสี่ความเข้มข้นของโคลชิซิน (156.5, 313, 626 และ 1,252 M?) และสามครั้งสัมผัส (6, 18 และ 24 ชั่วโมง) ในการรวมกันทั้งหมดยกเว้นความเข้มข้นของโคลชิซินที่ต่ำที่สุด (156.5 M?) ซึ่ง เวลารับแสงที่สั้นที่สุด (6 ชั่วโมง) ก็ไม่ได้ทดสอบ ยิงไม่ได้รับการรักษา colchicine (0? M / 0 ชั่วโมง) โอนโดยตรงในกลางฟื้นฟูยิง
ถูกนำมาใช้เป็นตัวควบคุม สามสิบใบถูกนำมาใช้ในการรักษาแต่ละครั้ง การรักษา colchicine ได้รับภายใต้ 40-50? molm-2 s-1 สภาพแสง หลังจากการรักษา, การแก้ปัญหาโคลชิซินที่เหลือจะถูกลบออกโดยใช้กระดาษกรองและยอดถูกล้างสาม
ครั้งด้วยน้ำหมัน ทั้งหมดของหน่อถูกย้ายลงใน MS กลางเสริมด้วย 2mg / ลิตร BAP ใบมีปลูกอยู่เป็นเวลา 12 สัปดาห์ที่ผ่านมาเชื้อทุก 4 อาทิตย์ ระหว่างวัฒนธรรม, กอยิงถูกแบ่งออกเป็นใบเดี่ยวและนับ ข้อมูลเหล่านี้
ถูกนำมาใช้ในการคำนวณอัตราการอยู่รอด (ร้อยละของยอดที่รอดชีวิต) และอัตราการแตกกอของหน่อ (หมายถึงอัตราส่วนระหว่างจำนวนของใบคูณและจำนวนรวมของยอดที่ได้รับ) ราคาอยู่ที่ประมาณ
วัฒนธรรมในสัปดาห์ที่ 12 หลังการรักษา colchicine สำหรับการชักนำรากของหน่อเดียวสูตร MS 1 mg / l 1 naphthylacetic กรด (NAA) ถูกนำมาใช้ ยิงวัฒนธรรมที่ถูกสร้างขึ้นใหม่และการบำรุงรักษาภายใต้สภาวะที่มีแสง (16 ชั่วโมงช่วงแสง, 100 molm-2 s-1) ที่อุณหภูมิ 26 ± 2 ◦C พืชอาศัยได้รับการปลูกถ่ายลงในกล่องพลาสติกที่มี 1: 3 ส่วนผสมของพีทและทรายและพวกเขาจะถูกเก็บไว้ในเรือนกระจก

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.2 . ใช้รักษา
ทดลองจัดแบบเดียวกับสามปัจจัย ( genotype โคลชิซินความเข้มข้น , และเวลา ) และมีวัตถุประสงค์ในการเพาะขยายพันธุ์ต้น ซึ่งได้จากแคลลัสเกิดบนช่อดอก ส่วนที่มาจากพืชที่ปลูกในดินเพาะชำ ชักนำ 1-mm อ่อน , ส่วนของช่อดอก ( 0.1 – 25 เซนติเมตรในความยาว ) ถูกตัดและเติบโตในที่มืดในการแก้ไข
MS ( อาหารสูตร Murashige and Skoog , 1962 ) ประกอบด้วย 5 mg / l ครู ( 2 ) และ 0.1 มก. / ล. 6-benzylaminopurine ( BAP ) ( G ł owacka et al . , 2010 ) สำหรับการยิง , แคลลัสถูกย้ายลงในอาหารสูตร MS ที่เติมผงถ่าน Nicotinell / เพาะเลี้ยงภายใต้สภาวะแสง 16-h ( 100  molm − 2 s − 1 ) ที่ 26 ± 2 ◦ Cยอด subcultured อย่างน้อย 2 ครั้ง ( ทุก 4 สัปดาห์ ) และยิงกลุ่มเดียวแล้วแบ่งออกเป็นจำนวนยอดตัดกับ 5cm ยาวและอยู่ในหลอดทดลองที่มี 5ml ของส่วนประกอบที่ filtersterilised สารละลายโคลชิซิน . ในการทดลองที่เราทดสอบความเข้มข้นของโคลชิซิน ( 156.5 4 , 313 , และมัน  M ) และ 3 เวลา ( 618 และ 24 ชั่วโมง ) ในชุดทั้งหมดยกเว้นสารความเข้มข้นต่ำสุด ( 156.5  M ) ที่เวลาเปิดรับแสงสั้น ( 6 ชั่วโมง ) ยังไม่ได้ทดสอบ ไม่ใช้รักษายอด ( 0  M / 0 H ) โอนโดยตรงในการยิงปานกลาง
ที่ใช้ควบคุม 30 ยอดที่ใช้ในการรักษาแต่ละ ผลการทดลองให้อายุ 40 – 50  molm s −− 2 เบา 1 เงื่อนไขหลังจากการรักษา ที่เหลือใช้โซลูชั่นจะถูกลบออกโดยใช้กระดาษกรอง และยิงได้ซัก 3
ครั้งด้วยน้ำหมัน ทั้งหมดของยอดโอนลงในอาหารสูตร MS ที่เติม BAP Nicotinell / L . ยอดโต 12 สัปดาห์ เลี้ยงทุก 4weeks . ระหว่างวัฒนธรรม , ยิงกระจุกมีหน่อเดียวและนับ
ข้อมูลเหล่านี้ถูกใช้ในการคำนวณอัตรารอด ( ร้อยละของยอดรอดมาได้ ) และอัตราการแตกกอหน่อ ( หมายถึง อัตราส่วนระหว่างจำนวนของคูณยอดและจำนวนการรักษายอด ) ราคาประมาณ
สำหรับวัฒนธรรมใน 12 สัปดาห์หลังการรักษาผล . เพื่อให้เกิดรากของหน่อเดียวสูตร MS ที่มีกรด 1 mg / l 1-naphthylacetic ( NAA ) คือใช้ วัฒนธรรมที่ถูกยิงได้ และเก็บรักษาภายใต้สภาวะแสง ( 16 ชม. ต่อ 100  molm − 2 s − 1 ) ที่ 26 ± 2 ◦ C . ต้นข้าวถูกปลูกถ่ายลงในกล่องพลาสติกที่มีส่วนผสมของพีชและทราย 1 : 3 และพวกเขาเก็บไว้ในเรือนกระจก