Serial dilutionsof extract, fractio

Serial dilutions
of extract, fractions, or compounds, as well as the reference compound
chloroquine, were prepared in assay medium [MEM Rega3 (cat. no.
19993013; Invitrogen), 2% FCS (Integro), 5 mL of 200 mM Lglutamine,
and 5 mL of 7.5% sodium bicarbonate] that was added to
empty wells of a 96-well microtiter plate (Falcon, BD). Subsequently,
50 μL of a 4× virus dilution in assay medium was added, followed by
50 μL of a cell suspension. This suspension, with a cell density of 25
000 cells/50 μL, was prepared from a Vero cell line subcultured in cell
growth medium (MEM Rega3 supplemented with 10% FCS, 5 mL of
L-glutamine, and 5 mL of sodium bicarbonate) at a ratio of 1:4 and
grown for 7 days in 150 cm2 tissue culture flasks (Techno Plastic
Products). The assay plates were returned to the incubator for 6−7
days (37 °C, 5% CO2, 95−99% relative humidity), a time at which
maximal virus-induced cell death or cytopathic effect (CPE) is
observed in untreated, infected controls.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Dilutions ประจำของสารสกัด เศษ ส่วน หรือสาร สารประกอบอ้างอิงยาอาทิ ถูกเตรียมในวิเคราะห์ [หน่วยความจำ Rega3 (cat. ไม่19993013 Invitrogen), 2% FCS (Integro), 5 mL ของ Lglutamine 200 mMและ 5 mL ของ 7.5% โซเดียมไบคาร์บอเนต] ที่ถูกเพิ่มเข้าไปบ่อว่างของจานดี 96 microtiter (เหยี่ยว BD) ในเวลาต่อมาΜL 50 ของเจือจางไวรัสรายที่ 4 ในวิเคราะห์เพิ่ม ตามด้วยΜL 50 ของระงับเซลล์ ระบบกันสะเทือนนี้ มีความหนาแน่นเซลล์ 25μL เซลล์/50 000 ถูกเตรียมจากบรรทัดเซลล์ Vero subcultured ในเซลล์เจริญเติบโตปานกลาง (หน่วยความจำ Rega3 เสริมกับ FCS 10%, 5 mL ของL-glutamine และ 5 mL ของโซเดียมไบคาร์บอเนต) ในอัตราส่วน 1:4 และปลูก 7 วัน 150 cm2 เยื่อน้ำ (พลาสติกเทคโนผลิตภัณฑ์) แผ่นทดสอบส่งคืนเพื่อบ่มเพาะวิสาหกิจสำหรับ 6−7วัน (37 ° C, 5% CO2 ความชื้นสัมพัทธ์% 95−99), เวลาที่สูงสุดเกิดไวรัสเซลล์ตายหรือผล cytopathic (CPE)สังเกตในตัวควบคุมที่ไม่ถูกรักษา ติดเชื้อ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เจือจางอนุกรมของสารสกัดจากเศษส่วนหรือสารประกอบเช่นเดียวกับสารประกอบอ้างอิงมาลาเรียถูกจัดทำขึ้นในระดับปานกลางทดสอบ[MEM Rega3 (แมวไม่มี.. 19993013; Invitrogen), 2% FCS (Integro) 5 มิลลิลิตร 200 มิลลิ Lglutamine, และ 5 มิลลิลิตรโซเดียมไบคาร์บอเนต 7.5%] ที่ถูกบันทึกอยู่ในที่ว่างเปล่าหลุมของแผ่นไมโคร96 หลุม (เหยี่ยว BD) ต่อมา50 ไมโครลิตรของ 4 ×เจือจางไวรัสในสื่อการวิเคราะห์ถูกเพิ่มเข้ามาตามด้วย50 ไมโครลิตรของการระงับมือถือ ระงับนี้มีความหนาแน่นของเซลล์ 25 000 เซลล์ / 50 ไมโครลิตรถูกจัดทำขึ้นจากเซลล์เวโรเลี้ยงในเซลล์เจริญเติบโตปานกลาง(MEM Rega3 เสริมด้วย 10% FCS 5 มิลลิลิตรL-glutamine และ 5 มิลลิลิตรโซเดียมไบคาร์บอเนต) ในอัตราส่วน 1: 4 และเติบโตขึ้นเป็นเวลา7 วันใน 150 cm2 ขวดเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ (เทคโนพลาสติกผลิตภัณฑ์) แผ่นทดสอบถูกส่งกลับไปยังศูนย์บ่มเพาะสำหรับ 6-7 วัน (37 ° C, CO2 5%, 95-99% ความชื้นสัมพัทธ์) ซึ่งเป็นช่วงเวลาที่สูงสุดการตายของเซลล์ที่เกิดจากไวรัสหรือผลcytopathic (CPE) เป็นข้อสังเกตในการรักษาการควบคุมการติดเชื้อ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ซีเรียลเจือจาง
แยกเศษส่วนหรือสาร รวมทั้งอ้างอิงประกอบ
ครุฑถูกเตรียมในการทดสอบกลาง [ MEM rega3 ( แมว . .
19993013 ; Invitrogen ) 2% FCS ( integro ) 5 มิลลิลิตร lglutamine 200 มม.
5 ml 7.5 % โซเดียมไบคาร์บอเนตที่เพิ่ม

ว่างบ่อจาน 96 ดีไมโคร ( เหยี่ยว BD ) ต่อมา
50 μล. 4 ×ไวรัสเจือจางในการทดสอบกลางเพิ่ม ตามด้วย
μ 50 ลิตรมือถือระบบ ช่วงล่างนี้มีความหนาแน่นเซลล์ 25
000 เซลล์ / 50 μล. เตรียมจากเวโรเซลล์เส้น subcultured ปานกลางการเจริญเติบโตของเซลล์
( แหม่ม rega3 เสริม 10% FCS , 5 ml
L Glutamine และ 5 กรัมของโซเดียมไบคาร์บอเนต ) ในอัตราส่วน 1 : 4
ปลูก 7 วัน ในการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ ( 150 cm2 flasks ผลิตภัณฑ์พลาสติก
เทคโน ) ( แผ่นกลับเพื่อฟักไข่− 6
7 วัน ( 37 ° C , 5% CO2 , 95 − 99% ความชื้นสัมพัทธ์ ) , เวลาที่กระตุ้นการตายของเซลล์หรือไวรัสสูงสุด
cytopathic Effect ( CPE )
) และการควบคุมการติดเชื้อ