Strains and growth conditions.
Strains used in this study are described in Table S1 in the supplemental material. Lactobacillus plantarum WCFS1 (32) was grown at 20°C in MRS (de Man-Rogosa-Sharpe) broth (Difco, West Molesey, United Kingdom) with either 8% (vol/vol) additional water or 8% (vol/vol) ethanol. Growth and cell density were determined by measurement of the optical density at 600 nm (OD600) of the culture using a spectrophotometer (Ultraspec 2000; Pharmacia Biotech, Cambridge, United Kingdom). Citrate, lactate, formate, pyruvate, 2,3-butadiol, acetoin, succinate, acetate, propionate, and ethanol concentrations were measured in culture supernatants by high-performance liquid chromatography (HPLC) as described previously (51). Cells were harvested at an OD600 of 1.0 for transcript profiling, cross-protection experiments, microscopy, and lipid extraction.
สายพันธุ์และสภาพการเจริญเติบโตสายพันธุ์ที่ใช้ในการศึกษานี้จะอธิบายไว้ในตาราง S1 ในวัสดุเสริม แลคโตบาซิลลัส WCFS1 (32) ปลูกที่อุณหภูมิ 20° C ใน MRS (de Man-Rogosa-Sharpe) ซุป (Difco, Molesey ตะวันตก สหราชอาณาจักร) กับน้ำ 8% (vol/vol) เพิ่มเติมหรือเอทานอล 8% (vol/vol) เจริญเติบโตและความหนาแน่นเซลล์ดำเนินการ โดยวัดความหนาแน่นออปติคัลที่ 600 นาโนเมตร (OD600) ของวัฒนธรรมที่ใช้สเปค (Ultraspec 2000 เทคโนโลยีชีวภาพฟาร์ เคมบริดจ์ สหราชอาณาจักร) ซิเตรท น้ำนม รูปแบบเอกสาร pyruvate, butadiol 2, 3, acetoin, succinate, acetate, propionate และเอทานอลความเข้มข้นถูกวัดในวัฒนธรรม supernatants โดยประสิทธิภาพของเหลว chromatography (HPLC) ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (51) เซลล์เก็บเกี่ยวที่มี OD600 1.0 สำหรับโปรไฟล์เสียงบรรยาย การทดลองข้ามการป้องกัน กล้องจุลทรรศน์ และดูดไขมัน
การแปล กรุณารอสักครู่..
สายพันธุ์และสภาวะการเจริญเติบโต.
สายพันธุ์ที่นำมาใช้ในการศึกษาครั้งนี้ได้อธิบายไว้ในตาราง S1 ในวัสดุเสริม Lactobacillus plantarum WCFS1 (32) คือการเติบโตที่ 20 ° C ใน MRS (de Man-Rogosa-ชาร์ป) น้ำซุป (Difco, เวสต์เลส, สหราชอาณาจักร) กับทั้ง 8% (ปริมาตร / ปริมาตร) น้ำเพิ่มเติมหรือ 8% (ปริมาตร / ปริมาตร ) เอทานอล การเจริญเติบโตและความหนาแน่นของเซลล์ได้รับการพิจารณาโดยการวัดความหนาแน่นของแสงที่ 600 นาโนเมตร (OD600) ของวัฒนธรรมโดยใช้สเปก (Ultraspec 2000 Pharmacia ไบโอเทค, เคมบริดจ์, สหราชอาณาจักร) ซิเตรต, นมรูปแบบไพรู, 2,3-butadiol, acetoin, succinate, อะซิเตท, propionate และความเข้มข้นของเอทานอลอยู่ในวัด supernatants วัฒนธรรมโดยมีประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography (HPLC) ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (51) เซลล์ที่ถูกเก็บเกี่ยว OD600 1.0 สำหรับโปรไฟล์หลักฐานการทดลองข้ามป้องกันกล้องจุลทรรศน์และการสกัดไขมัน
การแปล กรุณารอสักครู่..
สายพันธุ์และเงื่อนไขการเจริญเติบโตสายพันธุ์ที่อธิบายไว้ในการศึกษานี้ใช้ตาราง S1 ในวัสดุเสริม Lactobacillus plantarum wcfs1 ( 32 ) คือปลูกที่ 20 ° C ( de Man rogosa MRS broth ( ชาร์ป ) difco ตะวันตก molesey , สหราชอาณาจักร ) กับทั้ง 8 % ( ปริมาตร / ปริมาตร ) น้ำเพิ่มเติมหรือ 8 % ( ปริมาตร / ปริมาตร ) เอทานอล การเจริญเติบโตและปริมาณความหนาแน่นเซลล์ถูกกำหนดโดยการวัดความหนาแน่นของแสงที่ 600 nm ( od600 ) ของวัฒนธรรมการใช้วัสดุ ( ultraspec 2000 ; มุ่งมั่น ไบโอเทค เคมบริดจ์ สหราชอาณาจักร ) แลคเตรท , , รูปแบบ , ไพรูเวท 2,3-butadiol อะซิโตอินซิ , , , acetate , propionate และความเข้มข้นของเอทานอลเป็นวัดใน supernatants วัฒนธรรมโดยวิธีโครมาโทกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง ( HPLC ) ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( 51 ) เซลล์เก็บที่ od600 1.0 สำหรับบันทึกการไขว้ป้องกันการทดลอง กล้องจุลทรรศน์ และการสกัดไขมัน
การแปล กรุณารอสักครู่..