The visualization and quantificatio

The visualization and quantification of adherent bacteria is still one of the most relevant topics in
microbiology. Besides electron microscopic techniques such as transmission electron
microscopy, scanning electron microscopy and environmental scanning electron microscopy,
modern fluorescence microscopic approaches based on fluorogenic dyes offer detailed insight
into bacterial biofilms. The aim of the present review was to provide an overview of the advantages
and disadvantages of different methods for visualization of adherent bacteria with a special focus
on the experiences gained in dental research.
Oral biofilm – an example of adherent
micro-organisms
In 1675, Leeuwenhoek was the first to detect microorganisms
using a microscope in water and in saliva. Only
a few years later, he was already investigating bacteria in
adherent oral biofilms. Since then, oral biofilm formation
has been investigated thoroughly using different approaches.
In particular, the influence of different surfaces on the
process of bioadhesion can be easily explored (Hannig &
Hannig, 2009). Much experience on the visualization of in
situ or in vivo formed biofilms has been gained in the area of
dental research, and the methods which were adopted have
proven to be of relevance to all other fields of microbiology
(Nyvad & Kilian, 1987; Hannig, 1999; Bergmans et al., 2005;
Hannig et al., 2007b). The efficacy of antibacterial oral
health-care products as well as bacterial colonization of the
oral hard and soft tissues, such as enamel, dentin, the root
canal or periodontal pockets, have been intensively investigated
(Marsh, 1993; Marsh & Bradshaw, 1995; Netuschil
et al., 1995; Hannig, 1999; Marsh & Martin, 1999; Bergmans
et al., 2005; Hannig et al., 2007b, 2009). A special advantage
of oral biofilm research is the opportunity to non-invasively
monitor biofilm formation in humans using samples of
different materials mounted on individual splints for
bacterial adherence in situ (Hannig & Hannig, 2009). The
aim of the present short review is to give an insight into
traditional and current methods for the visualization and
quantification of adherent bacteria or biofilms, with a
special focus on the experiences gained in dental research.
Quantification by determination of c.f.u.
The traditional method of determining the number of
adherent micro-organisms is the measurement of viability
by prior desorption through the use of ultrasonication or
vigorous agitation and subsequent plating on different agar
plates (Hannig et al., 2007b). Though this technique has
the advantage of determining the number of active
bacteria, there are some disadvantages to it which could
lead to misleading conclusions. This technique is not only
both labour- and time-intensive but it may very well select
for certain species when studying multispecies biofilms
from natural niches (Amann et al., 1995; Donlan &
Costerton, 2002). Furthermore, it is difficult to quantify
semi-planktonic adherent bacteria or desorbed biofilms
(Hannig et al., 2007b, 2009; Al-Ahmad et al., 2008a, b). In
Figs 1 and 2, flocks of adherent salivary bacteria are shown.
Quantification of such adherent bacterial agglomerates
with fluorescent dyes or by electron microscopy can differ
considerably from the c.f.u. numbers after ultrasonication
(Hannig et al., 2007b; Al-Ahmad et al., 2009a). Only a very
low percentage of bacteria in seawater, earth or sewage
sludge are culturable. This illustrates the necessity of
methods other than culture plates for the visualization,
quantification and identification of bacteria (Amann et al.,
1995).
High-resolution microscopic techniques
Though light microscopy as well as fluorescence microscopy
allow the visualization of bacteria, higher-resolution
techniques are required for detailed insight into the
ultrastructure of the bacteria and the surrounding matrix.
Several microscopic techniques with completely different
physical background are available. All electron microscopic
methods offer detailed insight into the ultrastructure of
bacteria and their environment but quantification of the
adherent micro-organisms is difficult.
Journal of Medical Microbiology (2010), 59, 1–7 DOI 10.1099/jmm.0.015420-0
015420 G 2010 SGM Printed in Great Britain 1
Downloaded from www.microbiologyresearch.org by
IP: 49.228.39.194
On: Wed, 17 Aug 2016 01:32:23
Scanning electron microscopy (SEM) allows visualization
of surface structures with a three-dimensional appearance
at very different resolutions (Fig. 2). However, due to the
high vacuum required for evaluation of the samples and
due to the fact that biological samples have non-conductive
properties, fixation, dehydration and coating with a
conductive material are necessary. Therefore, procedures
are required which do not destroy the structure of the
samples or cause artefacts (Bergmans et al., 2005). After
fixation with aldehydes in phosphate or ca

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แสดงภาพประกอบเพลงและการนับจำนวนแบคทีเรียสาวกยังคงเป็นหนึ่งในหัวข้อที่เกี่ยวข้องมากที่สุดในจุลชีววิทยา นอกจากเทคนิคกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนเช่นส่งอิเล็กตรอนกล้องจุลทรรศน์ การสแกนชาวดัตช์และสิ่งแวดล้อมแกนชาวดัตช์วิธีด้วยกล้องจุลทรรศน์เรืองแสงที่ทันสมัยอิงสี fluorogenic ให้เข้าใจรายละเอียดเป็นแบคทีเรียไบโอฟิล์มที่ จุดมุ่งหมายของการทบทวนอยู่เป็นการ ให้ภาพรวมของข้อดีและข้อเสียของวิธีต่าง ๆ สำหรับการแสดงของสาวกแบคทีเรียมีความสำคัญพิเศษจากประสบการณ์ได้รับในด้านทันตกรรมฟิล์มปาก – ตัวอย่างของมติจุลินทรีย์ใน 1675, Leeuwenhoek เป็นครั้งแรกในการตรวจสอบจุลินทรีย์โดยใช้กล้องจุลทรรศน์ ในน้ำ และน้ำลาย เท่านั้นกี่ปีต่อมา เขาได้แล้วตรวจสอบแบคทีเรียในไบโอฟิล์มที่ปากที่สาวก ตั้งแต่การก่อตัวของฟิล์มแล้ว ทางปากได้ถูกตรวจสอบอย่างละเอียดโดยใช้แนวทางโดยเฉพาะอย่างยิ่ง อิทธิพลของพื้นผิวที่แตกต่างจากการกระบวนการของ bioadhesion สามารถเดินเที่ยว (Hannig &Hannig, 2009) ประสบการณ์มากในการแสดงในแหล่งกำเนิดหรือไบโอฟิล์มที่เกิดขึ้นในร่างกายได้รับรับในพื้นที่ของวิจัยทางทันตกรรม และวิธีการซึ่งถูกนำมาใช้มีพิสูจน์แล้วว่ามีความเกี่ยวข้องกับเขตข้อมูลอื่น ๆ ทั้งหมดของจุลชีววิทยา(Nyvad & วิจิต 1987 Hannig, 1999 Bergmans et al. 2005Hannig et al. 2007b) ประสิทธิภาพของการต้านเชื้อแบคทีเรียที่ช่องปากผลิตภัณฑ์ดูแลสุขภาพเช่นเดียวกับแบคทีเรียล่าอาณานิคมของปากแข็ง และอ่อนเนื้อเยื่อ สารเคลือบ เนื้อฟัน รากคลองหรือกระเป๋าปริทันต์ ได้รับการตรวจสอบเข้ม(มาร์ช 1993 มาร์ชและแบรด 1995 Netuschilet al. 1995 Hannig, 1999 มาร์ชและมาร์ติน 1999 Bergmanset al. 2005 Hannig et al. 2007b, 2009) ผลประโยชน์พิเศษฟิล์มปากวิจัยเป็นโอกาสไม่ใช่ invasivelyตรวจสอบการก่อตัวของฟิล์มในมนุษย์โดยใช้ตัวอย่างวัสดุต่าง ๆ ที่ติดตั้งบนแต่ละ splints สำหรับแบคทีเรียยึดมั่นในแหล่งกำเนิด (Hannig & Hannig, 2009) การจุดมุ่งหมายของรีวิวสั้นปัจจุบันจะให้ความเข้าใจในวิธีการแบบดั้งเดิม และปัจจุบันสำหรับการแสดง และนับจำนวนแบคทีเรียสาวกหรือไบโอฟิล์มที่ มีการพิเศษเน้นประสบการณ์ได้รับในด้านทันตกรรมนับ โดยการกำหนด c.f.u.วิธีการแบบดั้งเดิมของการกำหนดจำนวนสาวกจุลินทรีย์คือ การวัดศักยภาพโดยคายออกก่อนโดยใช้ ultrasonication หรือความปั่นป่วนที่แข็งแรงและชุบวุ้นต่าง ๆ ตามมาแผ่น (Hannig et al. 2007b) แม้ว่าเทคนิคนี้มีประโยชน์ของการกำหนดหมายเลขที่ใช้งานอยู่แบคทีเรีย มีข้อเสียบางอย่างไปซึ่งอาจจะนำไปสู่ข้อสรุปที่เข้าใจผิด เทคนิคนี้จะไม่เพียงทั้งแรงงาน และเวลามากแต่มันอาจดีเลือกบางสายพันธุ์เมื่อเรียนไบโอฟิล์มที่ multispeciesจากธรรมชาติซอก (Amann et al. 1995 Donlan &Costerton, 2002) นอกจากนี้ มันเป็นเรื่องยากที่จะกำหนดปริมาณแบคทีเรียกึ่ง planktonic สาวกหรือไบโอฟิล์มที่ desorbed(Hannig et al. 2007b, 2009 Al-Ahmad et al. 2008a, b) ในมะเดื่อ 1 และ 2 ฝูงของแบคทีเรียน้ำลายสาวกที่จะแสดงขึ้นนับจำนวน agglomerates แบคทีเรียเช่นสาวกด้วยสีเรืองแสง หรือกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนสามารถแตกต่างอย่างมากจากหมายเลข c.f.u. หลัง ultrasonication(Hannig et al. 2007b Al-Ahmad et al., (2009a)) เฉพาะตัวมากเปอร์เซ็นต์ต่ำของเชื้อแบคทีเรียในน้ำทะเล โลก หรือสิ่งปฏิกูลตะกอนจะ culturable นี้แสดงให้เห็นถึงความจำเป็นของวิธีอื่นที่ไม่ใช่วัฒนธรรมแผ่นสำหรับการแสดงนับและรหัสของแบคทีเรีย (Amann et al.,1995)เทคนิคกล้องจุลทรรศน์ความละเอียดสูงแม้ว่ากล้องจุลทรรศน์แสงเป็นกล้องจุลทรรศน์เรืองแสงทำให้การแสดงภาพของแบคทีเรีย ความละเอียดสูงเทคนิคจำเป็นสำหรับการเข้าใจรายละเอียดในการultrastructure ของแบคทีเรียและเมตริกซ์โดยรอบเทคนิคกล้องจุลทรรศน์หลายอย่างพื้นหลังทางกายภาพได้ อิเล็กตรอนทั้งหมดด้วยกล้องจุลทรรศน์วิธีการนำเสนอเข้าใจรายละเอียดใน ultrastructure ของแบคทีเรีย และสิ่งแวดล้อม แต่นับจำนวนการสาวกจุลินทรีย์ได้ยากวารสารการแพทย์จุลชีววิทยา (2010), 59, 1 – 7 ดอย 10.1099/jmm.0.015420-0015420 G 2010 พิมพ์ขึ้นในสหราชอาณาจักร 1ดาวน์โหลดได้จาก www.microbiologyresearch.org โดยIP: 49.228.39.194ใน: พุธ 17 2559 ส.ค. 01:32:23กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน (SEM) การสแกนช่วยให้แสดงภาพประกอบเพลงของโครงสร้างพื้นผิวมีลักษณะสามมิติความละเอียดแตกต่างกันมาก (รูป 2) อย่างไรก็ตาม เนื่องจากการแรงดูดสูงที่จำเป็นสำหรับการประเมินตัวอย่าง และเนื่องจากข้อเท็จจริงที่ว่าตัวอย่างทางชีวภาพได้ไม่นำไฟฟ้าคุณสมบัติ ตรึง การคายน้ำ และเคลือบด้วยความวัสดุที่นำไฟฟ้ามีความจำเป็น ดังนั้น กระบวนการจำเป็นซึ่งไม่ทำลายโครงสร้างของการตัวอย่างหรือสิ่งประดิษฐ์สาเหตุ (Bergmans et al. 2005) หลังจากตรึงกับอลดีไฮด์ในฟอสเฟตหรือ ca

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สร้างภาพและการหาปริมาณของเชื้อแบคทีเรียสาวกยังคงเป็นหนึ่งในหัวข้อที่เกี่ยวข้องมากที่สุดใน
ทางจุลชีววิทยา นอกจากเทคนิคกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนเช่นอิเล็กตรอนเกียร์
กล้องจุลทรรศน์กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนและการสแกนกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนสิ่งแวดล้อม
เรืองแสงกล้องจุลทรรศน์วิธีการที่ทันสมัยขึ้นอยู่กับสีย้อมแจงเสนอข้อมูลเชิงลึกรายละเอียด
ลงในแผ่นชีวะแบคทีเรีย จุดมุ่งหมายของการตรวจสอบในปัจจุบันคือการให้ภาพรวมของข้อดี
และข้อเสียของวิธีการที่แตกต่างกันสำหรับการแสดงของเชื้อแบคทีเรียที่ยึดเกาะพื้นผิวที่มีความสำคัญเป็นพิเศษ
กับประสบการณ์ที่ได้รับในการวิจัยทางทันตกรรม.
ไบโอฟิล์มช่องปาก - ตัวอย่างของสานุศิษย์
จุลินทรีย์
ใน 1675, Leeuwenhoek เป็นครั้งแรกในการตรวจสอบจุลินทรีย์
โดยใช้กล้องจุลทรรศน์ในน้ำและในน้ำลาย เพียง
ไม่กี่ปีต่อมาเขาได้รับการตรวจสอบแล้วแบคทีเรียใน
แผ่นชีวะในช่องปากสานุศิษย์ ตั้งแต่นั้นมาการสร้างไบโอฟิล์มในช่องปาก
ได้รับการตรวจสอบอย่างถี่ถ้วนโดยใช้วิธีการที่แตกต่างกัน.
โดยเฉพาะอย่างยิ่งอิทธิพลของพื้นผิวที่แตกต่างกันที่
กระบวนการของ bioadhesion สามารถสำรวจได้อย่างง่ายดาย (Hannig &
Hannig 2009) ประสบการณ์มากในการสร้างภาพของใน
แหล่งกำเนิดหรือในร่างกายรูปแบบไบโอฟิล์มได้รับการได้รับในพื้นที่ของ
การวิจัยทางทันตกรรมและวิธีการที่ถูกนำมาใช้มีการ
พิสูจน์แล้วว่ามีความเกี่ยวข้องกับสาขาอื่น ๆ ทั้งหมดของจุลชีววิทยา
(Nyvad & Kilian 1987; Hannig, 1999 Bergmans et al, 2005;.
. Hannig, et al, 2007B) ประสิทธิภาพของช่องปากต้านเชื้อแบคทีเรีย
ผลิตภัณฑ์ด้านการดูแลสุขภาพเช่นเดียวกับแบคทีเรียของ
เนื้อเยื่อแข็งและอ่อนในช่องปากเช่นเคลือบฟันเนื้อฟันราก
คลองหรือกระเป๋าปริทันต์ได้รับการตรวจสอบอย่างเข้มงวด
(มาร์ช 1993; Marsh & Bradshaw, 1995; Netuschil
, et al, 1995;. Hannig 1999; Marsh & มาร์ติน 1999; Bergmans
et al, 2005;. Hannig, et al, 2007B 2009). ประโยชน์พิเศษ
ของการวิจัยไบโอฟิล์มในช่องปากเป็นโอกาสที่จะไม่ invasively
จอภาพก่อไบโอฟิล์มในมนุษย์โดยใช้ตัวอย่างของ
วัสดุที่แตกต่างติดตั้งอยู่บนเฝือกส่วนบุคคลสำหรับ
การยึดมั่นแบคทีเรียในแหล่งกำเนิด (Hannig & Hannig 2009)
จุดมุ่งหมายของการทบทวนสั้นในปัจจุบันคือการให้ข้อมูลเชิงลึกเป็น
วิธีการแบบดั้งเดิมและในปัจจุบันสำหรับการแสดงและ
ปริมาณของเชื้อแบคทีเรียสานุศิษย์หรือไบโอฟิล์มที่มีความ
สำคัญเป็นพิเศษกับประสบการณ์ที่ได้รับในการวิจัยทางทันตกรรม.
ปริมาณโดยกำหนด CFU
วิธีการดั้งเดิมของการกำหนด จำนวนของ
สานุศิษย์จุลินทรีย์คือการวัดความมีชีวิต
โดยการคายออกก่อนที่ผ่านการใช้งานของ ultrasonication หรือ
กวนแข็งแรงและชุบตามมาในอาหารเลี้ยงเชื้อที่แตกต่างกัน
ของแผ่นเปลือกโลก (Hannig et al., 2007B) แม้ว่าเทคนิคนี้มี
ข้อได้เปรียบของการกำหนดจำนวนที่ใช้งานอยู่
แบคทีเรียมีข้อเสียบางอย่างไปซึ่งอาจ
นำไปสู่ข้อสรุปที่ทำให้เข้าใจผิด เทคนิคนี้ไม่ได้เป็นเพียง
ทั้งแรงงานและเวลามาก แต่มันเป็นอย่างดีอาจเลือก
สำหรับบางชนิดเมื่อศึกษาไบโอฟิล์ม multispecies
จากซอกธรรมชาติ (Amann, et al, 1995;. & Donlan
Costerton, 2002) นอกจากนี้มันเป็นเรื่องยากที่จะหาจำนวน
แบคทีเรียสานุศิษย์กึ่ง planktonic หรือไบโอฟิล์มหลุดออก
(Hannig, et al, 2007B 2009;.. อัลอาห์หมัดอัลเอต, 2008a, B) ใน
มะเดื่อ 1 และ 2 ฝูงของแบคทีเรียในน้ำลายสาวกจะแสดง.
ปริมาณ agglomerates แบคทีเรียเช่นสานุศิษย์
ด้วยสีเรืองแสงหรือกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนสามารถแตกต่างกัน
มากจากตัวเลข CFU หลังจาก ultrasonication
(Hannig, et al, 2007B. อัลอาห์หมัดอัลเอต , 2009a) เพียงอย่าง
ต่ำร้อยละของเชื้อแบคทีเรียในน้ำทะเลดินหรือสิ่งปฏิกูล
กากตะกอนเป็น culturable นี้แสดงให้เห็นถึงความจำเป็นของ
วิธีการอื่น ๆ กว่าแผ่นวัฒนธรรมสำหรับการแสดง,
ปริมาณและบัตรประจำตัวของเชื้อแบคทีเรีย (Amann et al.,
1995).
เทคนิคกล้องจุลทรรศน์ความละเอียดสูง
แม้ว่าแสงกล้องจุลทรรศน์เช่นเดียวกับกล้องจุลทรรศน์เรืองแสง
ช่วยให้การมองเห็นของเชื้อแบคทีเรียที่มีความละเอียดสูง
เทคนิคที่จำเป็นสำหรับความเข้าใจรายละเอียดลงใน
ultrastructure ของเชื้อแบคทีเรียและเมทริกซ์โดยรอบ.
เทคนิคกล้องจุลทรรศน์หลายแตกต่างอย่างสิ้นเชิงกับ
พื้นหลังทางกายภาพที่มีอยู่ ทั้งหมดอิเล็กตรอนกล้องจุลทรรศน์
วิธีการมีความเข้าใจรายละเอียดใน ultrastructure ของ
เชื้อแบคทีเรียและสภาพแวดล้อมของพวกเขา แต่ปริมาณของ
สานุศิษย์จุลินทรีย์เป็นเรื่องยาก.
วารสารจุลชีววิทยาทางการแพทย์ (2010), 59, 1-7 ดอย 10.1099 / jmm.0.015420-0
015,420 G 2010 SGM พิมพ์ในสหราชอาณาจักร 1
ดาวน์โหลดจาก www.microbiologyresearch.org โดย
IP: 49.228.39.194
เมื่อ: Wed, 17 สิงหาคม 2016 01:32:23
กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน (SEM) ช่วยให้การสร้างภาพ
ของโครงสร้างพื้นผิวที่มีลักษณะสามมิติ
ที่ดี มติที่แตกต่างกัน (รูปที่. 2) อย่างไรก็ตามเนื่องจากการ
สูญญากาศสูงที่จำเป็นสำหรับการประเมินผลของกลุ่มตัวอย่างและ
เนื่องจากความจริงที่ว่ามีตัวอย่างทางชีวภาพที่ไม่นำไฟฟ้า
คุณสมบัติตรึงการคายน้ำและการเคลือบด้วย
วัสดุนำเป็นสิ่งที่จำเป็น ดังนั้นขั้นตอน
จะต้องที่ไม่ทำลายโครงสร้างของ
กลุ่มตัวอย่างหรือก่อให้เกิดสิ่งประดิษฐ์ (Bergmans et al., 2005) หลังจาก
ตรึงด้วยลดีไฮด์ในฟอสเฟตหรือ CA

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การแสดงปริมาณของแบคทีเรียและสานุศิษย์ยังคงเป็นหนึ่งในหัวข้อที่เกี่ยวข้องมากที่สุดในจุลชีววิทยา นอกจากนี้ทางกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนเทคนิคเช่นการส่งอิเล็กตรอนกล้องจุลทรรศน์และกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบส่องกราด , สิ่งแวดล้อมกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนชนิดส่องกราดทันสมัยด้วยวิธีเรืองแสงตามสี fluorogenic เสนอรายละเอียดลึกเป็นแบคทีเรียไบโอฟิล์ม . จุดมุ่งหมายของการตรวจสอบปัจจุบันเพื่อให้ภาพรวมของประโยชน์และข้อเสียของวิธีการที่แตกต่างกันสำหรับการสร้างภาพของพลพรรคแบคทีเรียที่มีความพิเศษบนประสบการณ์ที่ได้รับในงานวิจัยทางทันตกรรมช่องปากฟิล์ม–ตัวอย่างของพลพรรคจุลินทรีย์ในปีนัง ลูเวนโฮกเป็นครั้งแรก , การตรวจสอบจุลินทรีย์การใช้กล้องจุลทรรศน์ในน้ำและในน้ำลาย เพียงไม่กี่ปีต่อมา เขาก็ตรวจสอบแบคทีเรียในพลพรรคช่องปากไบโอฟิล์ม . ตั้งแต่นั้นมา การสร้างไบโอฟิล์มปากได้รับการตรวจสอบอย่างถี่ถ้วนโดยใช้วิธีที่แตกต่างกันโดยเฉพาะอิทธิพลของพื้นผิวต่าง ๆกระบวนการของ bioadhesion สามารถสำรวจ ( hannig &hannig , 2009 ) ประสบการณ์มากในการแสดงภาพประกอบเพลงในแหล่งกำเนิดหรือในร่างกายเกิดไบโอฟิล์ม ได้รับ ได้รับในพื้นที่ของการวิจัยทางทันตกรรมและวิธีการที่ใช้มีพิสูจน์แล้วว่ามีความเกี่ยวข้องกับสาขาอื่น ๆทั้งหมดของจุลชีววิทยา( nyvad & เลี่ยน , 1987 ; hannig , 1999 ; bergmans et al . , 2005hannig et al . , 2007b ) ประสิทธิภาพของแบคทีเรียในช่องปากผลิตภัณฑ์ดูแลสุขภาพรวมทั้งกลุ่มแบคทีเรียของยาก และเนื้อเยื่ออ่อนในช่องปาก เช่น เคลือบฟัน เนื้อฟัน รากคลองหรือกระเป๋าปริทันต์ ได้ทำการศึกษาอย่างละเอียด( มาร์ช , 1993 ; มาร์ช & Bradshaw , 1995 ; netuschilet al . , 1995 ; hannig , 1999 ; มาร์ช & มาร์ติน , 1999 ; bergmanset al . , 2005 ; hannig et al . , 2007b , 2009 ) ประโยชน์พิเศษของการวิจัย กล่าวคือในช่องปากเป็นโอกาสที่จะไม่ invasivelyตรวจสอบการสร้างไบโอฟิล์มของมนุษย์ในการใช้ตัวอย่างวัสดุที่แตกต่างกัน ติดเฝือกส่วนบุคคลสำหรับแบคทีเรียการยึดมั่นในแหล่งกำเนิด ( hannig & hannig , 2009 ) ที่จุดมุ่งหมายของการรีวิวสั้น ๆให้ข้อมูลเชิงลึกในปัจจุบัน คือแบบดั้งเดิมและระเบียบวิธีการและปริมาณของเชื้อแบคทีเรียที่ติดหรือไบโอฟิล์มด้วยการเน้นเป็นพิเศษเกี่ยวกับประสบการณ์ที่ได้รับในงานวิจัยทางทันตกรรมปริมาณโดยการหา c.f.u.วิธีการดั้งเดิมของการกำหนดจำนวนเป็นการประเมินความมีชีวิตของพลพรรคจุลินทรีย์โดยก่อนการปลดปล่อยผ่านการใช้ ultrasonication หรือการชุบวุ้นแข็งแรงตามมาในที่แตกต่างกันแผ่น ( hannig et al . , 2007b ) ถึงแม้ว่าเทคนิคนี้ได้ประโยชน์ของการกำหนดจำนวนงานแบคทีเรียมีข้อเสียบางอย่างเพื่อมันซึ่งจะทำให้เกิดความเข้าใจผิดเช่นนี้ เทคนิคนี้จะไม่เพียงทั้งแรงงานและเวลามาก แต่มันก็อาจเลือกบางชนิด เมื่อเรียน multispecies ไบโอฟิล์มจาก niches ธรรมชาติ ( แอเมิน et al . , 1995 ; & ดอนเลิ่นcosterton , 2002 ) นอกจากนี้มันเป็นเรื่องยากที่จะหากึ่งสิ่งมีชีวิตขนาดเล็กมากในน้ำติดแบคทีเรียหรือศึกษาไบโอฟิล์ม( hannig et al . , 2007b , 2009 ; อัล อาห์ et al . , 2008a , B ) ในมะเดื่อ 1 และ 2 ฝูงแบคทีเรียติดน้ำลายจะแสดงปริมาณของเชื้อแบคทีเรียดังกล่าว พลพรรครวมด้วยสีเรืองแสง หรือ โดยการใช้กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนสามารถแตกต่างกันมากจาก c.f.u. ultrasonication ตัวเลขหลัง( hannig et al . , 2007b ; อัล อาห์ et al . , 2009a ) เพียง มากค่าต่ำของแบคทีเรียในน้ำทะเล ดิน หรือสิ่งปฏิกูลตะกอนจะ culturable . นี้แสดงให้เห็นถึงความจำเป็นวิธีอื่นมากกว่าวัฒนธรรมแผ่นสำหรับการปริมาณและการจำแนกชนิดของแบคทีเรีย ( แอเมิน et al . ,1995 )ความละเอียดสูงเทคนิคกล้องจุลทรรศน์แม้ว่าแสงกล้องจุลทรรศน์กล้องจุลทรรศน์เรืองแสงเช่นเดียวกับให้ภาพความละเอียดสูงของแบคทีเรียเทคนิคที่จำเป็นสำหรับรายละเอียดลึกลงไปในแบคทีเรียและเมทริกซ์โดยรอบหลายขนาดจิ๋ว ด้วยเทคนิคที่แตกต่างกันอย่างสิ้นเชิงภูมิหลังทางกายภาพมี ทั้งหมดทางกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนวิธีการให้ลึกลงไปในรายละเอียดแบคทีเรีย และสภาพแวดล้อมของพวกเขา แต่ปริมาณของพลพรรคจุลินทรีย์เป็นเรื่องยากวารสารจุลชีววิทยาทางการแพทย์ ( 2010 ) , 59 , 1 – 7 ดอย 10.1099/jmm.0.015420-0015420 G 2010 sgm พิมพ์ในอังกฤษ 1www.microbiologyresearch.org โดยดาวน์โหลดได้จาก49.228.39.194 IP :เมื่อ : วันพุธที่ 17 ส.ค. 2559 01:32:23กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบส่องกราด ( SEM ) ให้แสดงภาพประกอบเพลงโครงสร้างของพื้นผิวที่มีลักษณะ 3 มิติที่ความละเอียดต่างกันมาก ( รูปที่ 2 ) อย่างไรก็ตาม เนื่องจากการสูญญากาศสูงที่จำเป็นสำหรับการประเมิน ตัวอย่างและเนื่องจากข้อเท็จจริงที่ว่ามี non-conductive ตัวอย่างทางชีวภาพคุณสมบัติ , การตรึง dehydration และเคลือบด้วยนำวัสดุที่จำเป็น ดังนั้น วิธีการจะถูกบังคับใช้ ซึ่งไม่ทำลายโครงสร้างของตัวอย่าง หรือเพราะรวบ ( bergmans et al . , 2005 ) หลังจากการตรึงกับอัลดีไฮด์ในฟอสเฟต หรือ ซีเอ