2.2.2.2. RFLP analysis. For RFLP an

2.2.2.2. RFLP analysis. For RFLP analysis, the following restriction enzymes
(NewEngland Biolabs)were used CfoI, HaeIII and HinfI for yeasts
and HinfI, HaeIII, TaqI and RsaI for lactic acid and acetic acid bacteria. The
amplified DNAs (5 μl) were digested by 5 U of restriction enzyme in
20 μl reaction mixtures for 2 h at 37 °C, except for the TaqI reaction
which was conducted at 65 °C. Restriction fragments were analyzed
by horizontal 3% agarose gel electrophoresis. DNA ladder markers of
20 and 100 bp (GeneWorks, Adelaide, Australia) were used as the size
standard. Electrophoresis was performed at 140 V for 3 h and the gels
were stainedwith GelRed dye and photographed under transluminated
UV light. To determine species identity, the restriction fragment profiles
were comparedwith those of reference cultures and those published by
Esteve-Zarzoso et al. (1999) and Granchi et al. (1999) for yeasts, Yu et al.
(2009) for lactic acid bacteria and Ruiz et al. (2000) for acetic acid
bacteria.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.2.2.2 RFLP วิเคราะห์ สำหรับการวิเคราะห์ RFLP เอนไซม์จำกัดต่อไปนี้(NewEngland Biolabs) ได้ใช้ CfoI, HaeIII และ HinfI สำหรับ yeastsHinfI, HaeIII, TaqI และ RsaI สำหรับแบคทีเรียกรดแลกติกและกรดอะซิติกด้วย ที่ขยาย DNAs (5 μl) ถูกต้อง โดย 5 U ของเอนไซม์จำกัดในน้ำยาผสมปฏิกิริยา μl 20 สำหรับ h 2 ที่° C 37 ยกเว้นปฏิกิริยา TaqIซึ่งได้ดำเนินการใน 65 องศาเซลเซียส มีวิเคราะห์ชิ้นส่วนจำกัดโดยแนวนอน 3% agarose เจ electrophoresis ดีเอ็นเอเครื่องหมายบันไดของใช้เป็นขนาด 20 และ 100 bp (GeneWorks แอดิเลด ออสเตรเลีย)มาตรฐาน Electrophoresis ทำที่ 140 V 3 h และเจถูกย้อม GelRed stainedwith และการถ่ายภาพภายใต้ transluminatedแสง UV การกำหนดเอกลักษณ์พันธุ์ โพรไฟล์ส่วนจำกัดมีผู้อ้างอิงวัฒนธรรมและผู้เผยแพร่โดย comparedwithEsteve Zarzoso et al. (1999) และ Granchi et al. (1999) สำหรับ yeasts, Yu et al(2009) สำหรับแบคทีเรียกรดแลกติกและ Ruiz และ al. (2000) ในกรดอะซิติกแบคทีเรีย

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.2.2.2 การวิเคราะห์ RFLP สำหรับการวิเคราะห์ RFLP, เอนไซม์ข้อ จำกัด ดังต่อไปนี้
(Biolabs NewEngland) ถูกนำมาใช้ CfoI, HaeIII และ HinfI สำหรับยีสต์
และ HinfI, HaeIII, Taqi และ RsaI สำหรับกรดแลคติคและแบคทีเรียกรดอะซิติก
DNAs ขยาย (5 ไมโครลิตร) ถูกย่อยโดย 5 U ของเอนไซม์ข้อ จำกัด ในการ
ผสมปฏิกิริยา 20 ไมโครลิตรเป็นเวลา 2 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 ° C ยกเว้นสำหรับปฏิกิริยา Taqi
ซึ่งได้รับการดำเนินการที่ 65 ° C ชิ้นส่วนข้อ จำกัด ที่ได้มาวิเคราะห์
โดยแนวนอน 3% ข่าวคราว agarose บันไดเครื่องหมายดีเอ็นเอของ
20 และ 100 bp (GeneWorks ในแอดิเลด, ออสเตรเลีย) ถูกนำมาใช้เป็นขนาด
มาตรฐาน Electrophoresis ถูกดำเนินการที่ 140 V เวลา 3 ชั่วโมงและเจล
ถูก GelRed stainedwith สีย้อมและถ่ายภาพภายใต้ transluminated
แสงยูวี เพื่อตรวจสอบตัวตนของสายพันธุ์โปรไฟล์ส่วนข้อ จำกัด
อยู่เทียบกับบรรดาของวัฒนธรรมและการอ้างอิงที่ประกาศโดย
Esteve-Zarzoso และคณะ (1999) และ Granchi และคณะ (1999) สำหรับยีสต์ Yu et al.
(2009) สำหรับแบคทีเรียกรดแลคติกและรุยซ์และคณะ (2000) สำหรับกรดอะซิติก
แบคทีเรีย

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.2.2.2 . การวิเคราะห์ RFLP . สำหรับการวิเคราะห์ RFLP , เอนไซม์
ต่อไปนี้ ( นิวอิงแลนด biolabs ) ใช้ cfoi haeiii hinfi สำหรับ , และยีสต์ และ hinfi haeiii
, , และ taqi rsai สำหรับกรดแลคติก และแบคทีเรียกรดอะซิติก .
ขยายแถบ ( 5 μ L ) ถูกย่อยโดยเอนไซม์ใน
5 U ของ L 20 μปฏิกิริยาผสม 2 H ที่ 37 ° C ยกเว้น taqi ปฏิกิริยา
ซึ่งดำเนินการที่ 65 องศา Restriction fragments were analyzed
by horizontal 3% agarose gel electrophoresis. DNA ladder markers of
20 and 100 bp (GeneWorks, Adelaide, Australia) were used as the size
standard. Electrophoresis was performed at 140 V for 3 h and the gels
were stainedwith GelRed dye and photographed under transluminated
UV light. To determine species identity, the restriction fragment profiles
were comparedwith those of reference cultures and those published by
Esteve-Zarzoso et al. (1999) and Granchi et al. (1999) for yeasts, Yu et al.
(2009) for lactic acid bacteria and Ruiz et al. (2000) for acetic acid
bacteria.