2. Experimental2.1 Chemicals and Ma

2. Experimental
2.1 Chemicals and Materials
All chemicals used in experiment were analytical reagent (AR) grade and solutions were prepared using
high pure water with a resistance of 18 M cm
-1
. Homocysteine (Hcy), dithiothreitol (DTT), cysteine (Cys),
glutathione (Glu) and metal ions (As2+
, Ca2+ Cd2+, Co2+, Cu2+
, Fe3+
, Hg2+
, K
+
,Mg2+, Mn2+, Na+
,Ni2+, Pb2+ and Zn2+)
were bought from Sigma-Aldrich (St. Louis, Missouri). AgNPs was obtained from Sensor Research Unit at
Department of Chemistry, Chulalongkorn University, Thailand. Whatman No.1 filter paper was bought from
Cole-Parmer (Vernon Hills, IL). All glass ware was thoroughly cleaned with freshly prepared 1:1 HCl/HNO3 and
rinsed with Mill-Q 18 M cm
-1
resistance water prior to use.
2.2 Instrumentation
UV–visible absorption spectra were recorded by a UV-visible spectrometer (Lambda 35, Perkin Elmer
Instruments, USA) using 1-cm path length quartz cuvettes. Photographic results were recorded using a digital
camera (PowerShot S95, Canon).
2.3 Synthesis of the modified AgNPs
A yellow 0.1 mM AgNP solution (10 nm in diameter) was prepared from the dilution of AgNPs stock
solution with 18 MΩ cm
-1
water. Then, stock solutions of Hcy and DTT were added to the AgNP solution to
9
generate final concentrations of 3.5 µM Hcy and 3.0 µM DTT. To let the self-assembly of aminothiol compounds
onto the surface of AgNPs, the mixture was left for 2 h at the room temperature. After this step, the AgNP
aggregation was characterized using UV-visible spectrometry. 1.00 mL of modified AgNP solution was mixed
with 1.00 mL of metal ion in 50 mM phosphate buffer at pH 8 (Na2HPO4 and NaH2PO4
). Before analysis using
the spectrometer, the mixture solution was incubated for 30 min at the room temperature.
2.4 Preparationof the paper devices
The cutting method was used to pattern Whatman filter paper 1 according to previously reported
methods [35]. The pattern was created using CorelDraw and then transferred file to the Silhouette Studio
program. Cutting printer (Silhouette America, Inc.) incorporates a knife in place of the traditional ink pen. The
knife rotates freely on a turret, enabling precise cutting of various features, including small-radius corners, small
channel or holes with 100 m resolution. The instrument setup and actual cutting require 60 s and 20 s per
device, respectively.
2.5 Detection of copperon the paper devices
Paper-based assay devices (PADs, holes shape with 4 mm in diameter) were modified with 0.5 L of
homocysteine-dithiothreitol-AgNP solution in the test zone and allowed to dry before use. PADs are differentiated
from PADs by the lack of a flow channel in PADs. 0.5 L of Metal ion solutions (As2+
, Ca2+
, Cd2+, Co2+, Cu2+
,
Fe3+
, Hg2+
, K
+
, Mg2+, Mn2+, Na+
, Ni2+, Pb2+ and Zn2+) were then added to the paper devices.
Paper-based microfluidic devices (PADs) were also prepared for Cu2+ detection. The test zone of
PADs was spotted with 0.2 L of homocysteine-dithiothreitol-AgNP solution (Fig. 5A and 5B) and let it dry. For
detection, 12 L of 15.7 M Cu2+ solution was dropped into the loading zone. An alternative pattern of PADs
is shown in Fig. 5C. 0.2 L of Cu2+ solution at 7.8 nM, 780 nM, 7.8, 15.7, 31.4, 62.8 M, and buffer solution
was dropped into test zone number 2, 3, 4, 5, 6, 7, and 8, respectively. For detection, 12 L of the modified
AgNP solution was dropped into the loading zone

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. ทดลอง2.1 สารเคมีและวัสดุทั้งหมดเคมีภัณฑ์ที่ใช้ในการทดลองได้เกรดน้ำยาวิเคราะห์ (AR) และโซลูชั่นถูกจัดทำขึ้นโดยน้ำบริสุทธิ์สูง มีความต้านทาน 18 M ซม.-1. Homocysteine (Hcy), dithiothreitol (DTT), cysteine (Cys),กลูตาไธโอน (Glu) และไอออนโลหะ (As2 +, Ca2 + Cd2 + Co2 + Cu2 +, Fe3 +, Hg2 +, K+, Mg2 + Mn2 + Na +, Ni2 + Pb2 + และ Zn2 +)ได้ซื้อจาก Sigma Aldrich (เซนต์หลุยส์ มิซซูรี) AgNPs มาจากเซนเซอร์การวิจัยที่ภาควิชาเคมี จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย ประเทศไทย กระดาษกรอง Whatman No.1 ถูกซื้อมาจากParmer โคล (เวอร์นอนฮิลส์ IL) เครื่องแก้วที่ทั้งหมดถูกทำความสะอาดด้วยสด ๆ HCl/HNO3 1:1 และล้าง ด้วยมิลล์-Q M 18 ซม.-1ความต้านทานน้ำก่อนใช้2.2 เครื่องมือวัดสเปกตรัมการดูดซึมรังสียูวี – มองเห็นถูกบันทึก โดยสเปกโตรมิเตอร์มอง UV (แลมบ์ดา 35 เพอร์เอลเมอเครื่องมือ USA) โดยใช้เส้นทาง 1 ซม.ความยาวควอตซ์คิวเวต บันทึกภาพโดยใช้ดิจิตอลกล้อง (กล้อง PowerShot S95 แคนนอน)2.3 การสังเคราะห์ของ AgNPs แก้ไขจัดทำจากการเจือจางของสต็อก AgNPs 0.1 mM AgNP โซลูชัน (เส้นผ่านศูนย์กลาง 10 nm) สีเหลืองแก้ปัญหา ด้วย MΩ ซม.-1น้ำ แล้ว ละลาย Hcy และ DTT ถูกเพิ่มเข้าไป AgNP วิธีการแก้ 9สร้างความเข้มข้นสุดท้ายของ 3.5 ไมครอน Hcy และ 3.0 µM DTT เพื่อให้การสาร aminothiol ประกอบด้วยตัวเองบนพื้นผิวของ AgNPs ส่วนผสมเหลือสำหรับ 2 h ที่อุณหภูมิห้อง หลังจากขั้นตอนนี้ AgNPรวมลักษณะพิเศษใช้ spectrometry UV สามารถมองเห็น แก้ไข AgNP โซลูชัน 1.00 mL ถูกผสมกับ 1.00 mL ของไอออนโลหะใน 50 มม.ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ที่ pH 8 (Na2HPO4 และ NaH2PO4). ก่อนที่จะใช้วิเคราะห์สเปกโตรมิเตอร์ การแก้ปัญหาผสม incubated 30 นาทีที่อุณหภูมิห้อง2.4 Preparationof อุปกรณ์กระดาษวิธีการตัดใช้กระดาษกรอง Whatman 1 ตามรูปแบบรายงานวิธี [35] รูปแบบการใช้ CorelDraw และการ โอนย้ายแฟ้มสตูดิโอเงาโปรแกรม พิมพ์ตัด (เงาอเมริกา Inc.) ประกอบด้วยมีดแทนปากกาหมึก การมีดหมุนได้อย่างอิสระบนป้อมปืน เปิดใช้งานคุณสมบัติต่าง ๆ รวมทั้งมุมรัศมีขนาดเล็ก ขนาดเล็กตัดได้อย่างแม่นยำช่องหรือรูที่ มีความละเอียด m 100 การตั้งค่าเครื่องมือและตัดจริงต้อง 60 และ 20 ต่ออุปกรณ์ ตามลำดับ2.5 การตรวจจับ copperon อุปกรณ์กระดาษอุปกรณ์ทดสอบบนกระดาษ (แผ่น รูปร่างหลุม มีเส้นผ่าศูนย์กลาง 4 มิลลิเมตร) ถูกปรับเปลี่ยน ด้วย L 0.5 ของhomocysteine-dithiothreitol-AgNP โซลูชันในโซนทดสอบ และอนุญาตให้แห้งก่อนใช้งาน แผ่นแตกต่างจาก PADs จากการขาดของช่องทางไหลในแผ่น L 0.5 ของไอออนโลหะโซลูชั่น (As2 +, Ca2 +, Cd2 + Co2 + Cu2 +,Fe3 +, Hg2 +, K+, Mg2 + Mn2 + Na +, Ni2 + Pb2 + และ Zn2 +) แล้วเพิ่มอุปกรณ์กระดาษอุปกรณ์กระดาษ microfluidic (PADs) ยังจัดทำสำหรับ Cu2 + ตรวจจับขึ้น โซนทดสอบของPADs ถูกด่างกับ L 0.2 ของ homocysteine-dithiothreitol-AgNP (รูป 5A และ 5B) และปล่อยให้แห้ง สำหรับตรวจจับ L 12 ของ M 15.7 Cu2 + แก้ปัญหาถูกลดลงในโซนโหลด รูปแบบทางเลือกของ PADsแสดงในรูป 5C. L 0.2 ของ Cu2 + ที่ 7.8 nM, 780 nM, 7.8, 15.7, 31.4, 62.8 M และละลายบัฟเฟอร์ถูกลดลงไปทดสอบจำนวนโซน 2, 3, 4, 5, 6, 7 และ 8 ตามลำดับ สำหรับการตรวจจับ L 12 ที่ปรับAgNP โซลูชั่นถูกตัดทิ้งในโซนโหลด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. การทดลอง
2.1 เคมีภัณฑ์และวัตถุดิบ
สารเคมีทั้งหมดที่ใช้ในการทดลองเป็นน้ำยาวิเคราะห์ (AR) เกรดและการแก้ปัญหาที่ถูกจัดทำขึ้นโดยใช้
น้ำบริสุทธิ์ที่มีความต้านทานสูงกว่า 18 ซม. M -1

homocysteine (HCY) dithiothreitol (DTT) cysteine (Cys)
กลูตาไธโอน (Glu) และโลหะไอออน (AS2 +
, Ca2 + Cd2 + Co2 + Cu2 +
, Fe3 +
, Hg2 +
, K
+
, Mg2 + MN2 + + นา
, นิเกิล 2 + Pb2 + และ Zn2 + )
ถูกซื้อจาก Sigma-Aldrich (เซนต์หลุยส์) AgNPs ที่ได้รับจากเซนเซอร์หน่วยวิจัยที่
ภาควิชาเคมีจุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย กระดาษกรอง Whatman No.1 ถูกซื้อมาจาก
โคล Parmer (Vernon Hills, IL) เครื่องแก้วทั้งหมดได้รับการทำความสะอาดอย่างละเอียดด้วยการปรุงสดใหม่ 1: 1 HCl / HNO3 และ
ล้างด้วย Mill-Q 18 Mซม.
-1
ต้านทานน้ำก่อนที่จะใช้
2.2 การวัด
การดูดกลืนรังสียูวีที่สามารถมองเห็นได้ถูกบันทึกไว้โดยสเปกโตรมิเตอร์รังสียูวีที่มองเห็น (แลมบ์ดา 35, Perkin Elmer
เครื่องดนตรี, สหรัฐอเมริกา) ใช้ 1 ซม. ความยาวเส้นทาง cuvettes ควอทซ์ ผลการถ่ายภาพที่ถูกบันทึกไว้โดยใช้ดิจิตอล
กล้อง (PowerShot S95, Canon)
2.3 การสังเคราะห์ AgNPs ปรับเปลี่ยน
สีเหลืองแก้ปัญหา 0.1 มิลลิ AgNP (10นาโนเมตรเส้นผ่าศูนย์กลาง) ถูกจัดทำขึ้นจากการลดสัดส่วนของ AgNPs หุ้น
วิธีการแก้ปัญหากับ 18 MΩซม.
-1
น้ำ จากนั้นการแก้ปัญหาสต็อกของ HCY และ DTT ถูกเพิ่มเพื่อแก้ปัญหา AgNP ไป
9
สร้างความเข้มข้นสุดท้ายของ 3.5 ไมครอน HCY และ 3.0 ไมครอน DTT เพื่อที่จะให้ตัวเองประกอบของสาร aminothiol
ลงบนพื้นผิวของ AgNPs ที่ส่วนผสมที่ถูกทิ้งไว้ให้2ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง หลังจากขั้นตอนนี้ AgNP
รวมก็มีลักษณะการใช้มวลสาร UV-ที่มองเห็นได้ 1.00 มลของการแก้ปัญหาการแก้ไข AgNP ผสม
กับ 1.00 มลโลหะไอออนในขนาด 50 มมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ที่ pH 8 (Na2HPO4 และ NaH2PO4
) ก่อนที่จะวิเคราะห์โดยใช้
สเปกโตรมิเตอร์, การแก้ปัญหาส่วนผสมที่ถูกบ่มเป็นเวลา 30 นาทีที่อุณหภูมิห้อง
2.4 Preparationof อุปกรณ์กระดาษ
วิธีการตัดได้ถูกใช้ในรูปแบบกระดาษกรอง Whatman 1 ตามรายงานก่อนหน้านี้
วิธีการ [35] รูปแบบที่ถูกสร้างโดยใช้ CorelDraw แล้วย้ายไฟล์ไปยังเงาสตูดิโอ
โปรแกรม ตัดเครื่องพิมพ์ (Silhouette America, Inc) ประกอบด้วยมีดในสถานที่ของปากกาหมึกแบบดั้งเดิม
มีดหมุนได้อย่างอิสระบนป้อมปืนที่ช่วยให้การตัดที่แม่นยำของคุณสมบัติต่างๆรวมถึงมุมเล็กรัศมีขนาดเล็ก
ช่องหรือหลุมที่มีความละเอียด 100 m การติดตั้งเครื่องมือและตัดจริงจำเป็นต้อง60และ20 s ต่อ
อุปกรณ์ตามลำดับ
2.5 การตรวจหา copperon อุปกรณ์กระดาษ
กระดาษที่ใช้อุปกรณ์ทดสอบ (แผ่นหลุมรูปร่างที่มีเส้นผ่านศูนย์กลาง 4) ได้รับการแก้ไขด้วย 0.5 Lของ
การแก้ปัญหา homocysteine-dithiothreitol-AgNP ในเขตการทดสอบและได้รับอนุญาตให้แห้งก่อนการใช้งาน PADs มีความแตกต่าง
จากPADsจากการขาดของช่องทางการไหลในแผ่น 0.5 Lของการแก้ปัญหาของไอออนโลหะ (AS2 +
, Ca2 +
, Cd2 + Co2 + Cu2 +
,
Fe3 +
, Hg2 +
, K
+
, Mg2 + MN2 + + นา
, นิเกิล 2 + Pb2 + และ Zn2 +) ถูกเพิ่มแล้วไปยังอุปกรณ์กระดาษ
กระดาษที่ใช้อุปกรณ์ไมโคร (PADs) นอกจากนี้ยังได้จัดเตรียมไว้สำหรับ Cu2 + การตรวจสอบ โซนการทดสอบของ
PADsเป็นด่าง 0.2 Lของการแก้ปัญหา homocysteine-dithiothreitol-AgNP (รูป. 5A และ 5B) และปล่อยให้แห้ง สำหรับ
การตรวจสอบ 12 L 15.7 แก้ปัญหาM Cu2 + ถูกทิ้งลงในเขตการโหลด รูปแบบทางเลือกของการPADs
แสดงในรูป 5C 0.2 Lของ Cu2 + โซลูชันที่ 7.8 นาโนเมตร 780 นาโนเมตร 7.8, 15.7, 31.4, 62.8 Mและสารละลายบัฟเฟอร์
ได้รับการลดลงในจำนวนโซนทดสอบ 2, 3, 4, 5, 6, 7, และ 8 ตามลำดับ สำหรับการตรวจสอบ 12 Lของการปรับเปลี่ยน
วิธีการแก้ปัญหา AgNP ถูกทิ้งลงในเขตการโหลด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . ทดลอง2.1 สารเคมีและวัสดุทั้งหมดเคมีภัณฑ์ที่ใช้ในการทดลองวิเคราะห์สารเคมี ( AR ) เกรดและโซลูชั่นเตรียมใช้น้ำบริสุทธิ์ที่มีความต้านทานสูง 18 เมตร ซม.- 1. ปี ( hcy ) บัตรแข็ง ( DTT ) ซีสเตอีน ( ภาวะ )กลูต้าไธโอน ( GLU ) และไอออนโลหะ ( AS2 +แคลเซียม + , CD2 + CO2 + CU2 +fe3 + ,hg2 + ,, เค+mg2 + , , + + mn2 นาni2 + , , + + ) zn2 แบบเคลื่อนที่และซื้อจากซิกม่า Aldrich ( เซนต์หลุยส์ ) agnps ได้จากหน่วยปฏิบัติการวิจัยอุปกรณ์รับรู้ ณภาควิชาเคมี คณะวิทยาศาสตร์ จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย ประเทศไทย whatman 1 กระดาษกรอง ซื้อมาจากโคล พาร์เมอร์ ( เวอร์นอนฮิลส์ , อิลลินอยส์ ) เครื่องทําความสะอาดกระจกทั้งหมดเป็นการเตรียมสด 1 : 1 กับ HCl / กรดดินประสิวและล้างด้วย mill-q 18 M ซม.- 1ต้านทานน้ำก่อนที่จะใช้2.2 เครื่องมือวัดและสเปกตรัมการดูดกลืน UV ได้ถูกบันทึกไว้โดยมองเห็น UV Spectrometer ( แลมบ์ดา 35 , เพอร์กินเอลเมอร์เครื่องมือ , USA ) ใช้ 1-cm ความยาวเส้นทางควอทซ์คิวเวทท . ผลภาพถ่ายที่ถูกบันทึกไว้โดยใช้ดิจิตอลกล้อง Canon PowerShot S95 , )2.3 การ agnps การสังเคราะห์สีเหลือง 0.1 มิลลิเมตร agnp โซลูชั่น (  10 nm ในเส้นผ่าศูนย์กลาง ) เตรียมได้จากการกระจายหุ้น agnpsโซลูชั่น 18 M Ωซม.- 1น้ำ แล้วหุ้นโซลูชั่นของ hcy ส่วนเพิ่มให้ agnp โซลูชั่น9สร้างความเข้มข้นสุดท้าย 3.5 µ M hcy และ 3.0 µ M 20 . เพื่อให้ตัวเอง aminothiol ของสารประกอบลงบนพื้นผิวของ agnps ส่วนผสมที่เหลือสำหรับ 2 H ที่อุณหภูมิห้อง . หลังจากขั้นตอนนี้ agnpเป็นลักษณะการใช้ spectrophotometer มองเห็นแสงยูวี แก้ไข agnp 1.00 มิลลิลิตร สารละลายผสมกับ 1.00 มิลลิลิตรของไอออนโลหะในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 8 ( 50 มม. และ na2hpo4 nah2po4) ก่อน การ ใช้สเปกโตรมิเตอร์ ผสมสารละลาย บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 30 นาที .2.4 การจัดเตรียมอุปกรณ์กระดาษวิธี การใช้รูปแบบตัวกรอง whatman กระดาษ 1 ตามรายงานก่อนหน้านี้วิธี [ 35 ] รูปแบบที่ถูกสร้างขึ้นโดยใช้เพลงและโอนไฟล์ไปยังเงา สตูดิโอโปรแกรม ตัดเครื่องพิมพ์ ( เงาของอเมริกาอิงค์ ) ประกอบด้วยมีดในสถานที่ของปากกาหมึกแบบดั้งเดิม ที่มีดหมุนได้อย่างอิสระบนป้อมปืนให้แม่นยำตัดลูกเล่นต่างๆ รวมถึงมุมรัศมีเล็กๆ เล็ก ๆช่องหรือรู 100  M ความละเอียด เครื่องมือติดตั้งและตัดจริงต้อง 60 และ 20 วินาทีต่ออุปกรณ์ ตามลำดับ2.5 ตรวจสอบกระดาษอุปกรณ์ copperonทดสอบอุปกรณ์ ( แผ่นกระดาษตามรูป หลุม 4 มม. ) ดัดแปลง 0.5 ล.โฮโมบัตรแข็ง agnp โซลูชั่นในบริเวณทดสอบ และได้รับอนุญาตให้แห้งก่อนที่จะใช้ แผ่นต่างกันจากแผ่นโดยขาดช่องทางการไหลในแผ่น  0.5 ลิตร โซลูชั่น ( AS2 + ไอออนโลหะแคลเซียม + ,CD2 , + CO2 + CU2 +,fe3 +hg2 + ,, เค+mg2 + , , + + mn2 นาni2 , + + + แบบเคลื่อนที่ และ zn2 ) แล้วเพิ่มกระดาษอุปกรณ์กระดาษตามอุปกรณ์ไมโครฟลูอิดิก (  pads ) ก็เตรียม CU2 + ตรวจสอบ ทดสอบโซน pads เป็นด่างกับ 0.2 ล. โฮโมบัตรแข็ง ( รูปและโซลูชั่น agnp 5A 5B ) และปล่อยให้แห้ง สำหรับการตรวจสอบ , 12 ลิตร 4  M CU2 + ในสารละลายลดลงในโซนโหลด รูปแบบทางเลือกของ แผ่นจะแสดงในรูปที่ 5 .  0.2 ลิตร CU2 + โซลูชั่นที่ 7.8 nm , 780 nm , 7.8 , 63.6 , 31.4 , 62.8  M และสารละลายบัฟเฟอร์ถูกทิ้งในบริเวณทดสอบ หมายเลข 2 , 3 , 4 , 5 , 6 , 7 และ 8 ตามลำดับ การตรวจหา 12 ลิตรดัดแปลงagnp สารละลายที่ลดลงในโซนโหลด