Bacterial cells harvested from GYC

Bacterial cells harvested from GYC and MYP agar were washed in 1 ml TE buffer (50 mM Tris–HCl, pH 8.0, 1 mM EDTA) and resuspended in a 300 μl lysis buffer (100 mM Tris–HCl, pH 8.0, 10 mM EDTA, 2% SDS, 1% PVP, 0.15% NaCl). After homogenization, the bacterial DNA was extracted with the method described by Gullo et al. (2006). The total DNA, which was extracted directly from each vinegar and mother of vinegar sample ,was used for PCR-DGGE analysis. The mother of vinegar samples were powdered under liquid nitrogen and vinegar samples were pelleted by centrifugation at 10 000 ×g for 10 min before performing DNA extraction as described by De Vero et al., 2006. The quantity and purity of the extracted DNA from the pure cultures and the samples were measured by using a microvolume UV/Vis spectrophotometer (UVS-99, ACTGene, USA) at 260 nm and standardized at the final concentration of 100 ng/μl.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เซลล์แบคทีเรียที่เก็บเกี่ยวจาก agar GYC และ MYP ล้างในบัฟเฟอร์ TE 1 มล. (50 mM ตรี – HCl, pH 8.0, EDTA 1 mM) และ resuspended ใน 300 μl lysis บัฟเฟอร์ (ตรี – HCl, pH 8.0, EDTA, SDS 2%, 1% 10 mM 100 mM PVP, 0.15% NaCl) หลังจาก homogenization ดีเอ็นเอจากแบคทีเรียถูกสกัด ด้วยวิธีการอธิบายโดย Gullo et al. (2006) การรวมดีเอ็นเอ ซึ่งถูกสกัดโดยตรงจากน้ำส้มสายชูและแม่ของน้ำส้มสายชูอย่างละ ถูกใช้สำหรับวิเคราะห์ PCR DGGE แม่ตัวอย่างน้ำส้มสายชูได้ผงภายใต้ไนโตรเจนเหลว และตัวอย่างน้ำส้มสายชูได้ pelleted โดย centrifugation ที่ 10 000 × g สำหรับ 10 นาทีก่อนทำการสกัดดีเอ็นเอตามที่อธิบายไว้โดยเด Vero และ al., 2006 ปริมาณและความบริสุทธิ์ของดีเอ็นเอแยกจากวัฒนธรรมบริสุทธิ์และตัวอย่างถูกวัด โดยใช้การ microvolume UV/Vis เครื่องทดสอบกรดด่าง (อุฟส์-99, ACTGene สหรัฐอเมริกา) ที่ 260 nm และมาตรฐานที่ความเข้มข้นสุดท้ายของ 100 ng/μl

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เซลล์แบคทีเรียจากการเก็บเกี่ยว GYC และ MYP วุ้นถูกล้างใน 1 มิลลิลิตรบัฟเฟอร์ TE (50 มิลลิ Tris-HCl, pH 8.0, 1 มิลลิ EDTA) และ resuspended ในบัฟเฟอร์สลายไมโครลิตร 300 (100 มิลลิ Tris-HCl, pH 8.0 10 มิลลิ EDTA , 2% SDS, PVP 1%, 0.15% NaCl) หลังจากที่เป็นเนื้อเดียวกัน, ดีเอ็นเอของแบคทีเรียถูกสกัดด้วยวิธีการที่อธิบายโดย Gullo et al, (2006) ดีเอ็นเอทั้งหมดซึ่งถูกสกัดโดยตรงจากแต่ละน้ำส้มสายชูและแม่ของกลุ่มตัวอย่างน้ำส้มสายชูถูกนำมาใช้สำหรับการวิเคราะห์ PCR-DGGE แม่ของกลุ่มตัวอย่างถูกน้ำส้มสายชูผงภายใต้ไนโตรเจนเหลวและตัวอย่างน้ำส้มสายชูถูกเม็ดโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 10 000 ×กรัมเป็นเวลา 10 นาทีก่อนที่จะดำเนินการสกัดดีเอ็นเอตามที่อธิบายไว้โดยเดอเวโร et al., 2006 ปริมาณและความบริสุทธิ์ของดีเอ็นเอที่สกัดจาก วัฒนธรรมที่บริสุทธิ์และกลุ่มตัวอย่างถูกวัดโดยใช้รังสียูวี microvolume / Vis spectrophotometer (UVS-99, ACTGene สหรัฐอเมริกา) ที่ 260 นาโนเมตรและมาตรฐานที่เข้มข้นสุดท้าย 100 ng / ไมโครลิตร

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เซลล์แบคทีเรียและเก็บเกี่ยวจาก gyc myp วุ้นถูกล้างในบัฟเฟอร์ TE 1 มิลลิลิตร ( 50 มม. โดย– HCl , pH 8.0 , 1 mM EDTA ) และ resuspended ใน 300 μ l การสลายบัฟเฟอร์ ( 100 มม. นอกจากนี้ – HCl , pH 8.0 , 10 mM EDTA , 2% 1% SDS , PVP , 0.15 % NaCl ) . หลังจากการดีเอ็นเอแบคทีเรียถูกสกัดด้วยวิธีที่อธิบายโดยกูโล et al . ( 2006 ) ดีเอ็นเอทั้งหมดซึ่งถูกสกัดโดยตรงจากแต่ละน้ำส้มสายชูและแม่ตัวอย่างน้ำส้ม วิเคราะห์ดีเอ็นเอ 9 แถบบ่งชี้ . แม่ของส้มคือตัวอย่างผงภายใต้ไนโตรเจนเหลวและน้ำส้มสายชูจำนวน 3 เม็ด โดย 10 000 × G สำหรับ 10 นาทีก่อนแสดงการสกัดดีเอ็นเอตามที่อธิบายไว้โดยเดอเวโร et al . , 2006ปริมาณและความบริสุทธิ์ของการสกัดดีเอ็นเอจากเชื้อบริสุทธิ์และตัวอย่างถูกวัดโดยใช้ microvolume UV / VIS Spectrophotometer ( uvs-99 actgene , USA ) ที่ 260 นาโนเมตร และมาตรฐานที่ความเข้มข้นสุดท้าย 100 ng / μ L