DISCUSSIONThese investigations show

DISCUSSION


These investigations showed that the ELISA detection of the B. subtilis L-form was selective, rather than specific. This is not unusual for L-form bacteria, which have often been shown to have common antigenic determinants with


the parental bacteria (Lynn 1986). In the sandwich ELISA developed, adapted from Stead (1992), alkaline phosphatase
bound to streptavidin (Amersham) increased the detection of the specific antigen±antibody reaction. In pure culture,
the detection limit of B. subtilis L-forms was approximately 103 cells ml ÿ1 compared with 107 cells ml ÿ1 for cell-walled
bacteria (Fig. 1). Non-specific detection was confirmed by western blotting (data not included) where similar banding
patterns were obtained for both cell-walled forms and Lforms. The proteins detected in B. subtilis cell-walled forms and L-forms were between 155 and 40 kDa. The three main bands, corresponding to proteins with a molecular mass of 90, 65 and 40 kDa, were characteristic of both cell types.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

อภิปรายตรวจสอบเหล่านี้แสดงให้เห็นว่า การตรวจสอบ ELISA ของ B. subtilis L แบบฟอร์มเลือก มากกว่าเฉพาะ ไม่ผิดปกติสำหรับ L แบบฟอร์มแบคทีเรีย ซึ่งมักจะแสดงให้เห็นมีดีเทอร์มิแนนต์แอนติเจนทั่วไปด้วยแบคทีเรียโดยผู้ปกครอง (ลินน์ 1986) ใน sandwich ELISA พัฒนา ดัดแปลงมาจากผล (1992), อัลคาไลน์ฟอสฟาผูกไว้กับ streptavidin (Amersham) เพิ่มการตรวจพบปฏิกิริยาเฉพาะ antigen±antibody ในวัฒนธรรมบริสุทธิ์ขีดจำกัดการตรวจจับของ B. subtilis L แบบฟอร์มแก้ไขประมาณ 103 เซลล์ ml ÿ1 เปรียบเทียบกับเซลล์ 107 ml ÿ1 สำหรับผนังเซลล์แบคทีเรีย (รูปที่ 1) ไม่ใช่เฉพาะการตรวจสอบยืนยันการ blotting วิธีตะวันตก (ไม่รวมข้อมูล) ที่แถบคล้ายรูปแบบได้รับทั้งรูปแบบผนังเซลล์และ Lforms โปรตีนที่พบในผนังเซลล์ B. subtilis ฟอร์มและฟอร์ม L ได้ระหว่าง kDa 155 และ 40 สายหลักสาม ที่สอดคล้องกับโปรตีนที่มีมวลโมเลกุล 90 และ 40, 65 kDa ลักษณะของเซลล์ทั้งสองชนิดได้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การอภิปราย


ตรวจสอบเหล่านี้แสดงให้เห็นว่าการตรวจสอบวิธี ELISA ของ B. subtilis L-รูปแบบคือเลือกมากกว่าที่เฉพาะเจาะจง นี้ไม่ได้เป็นเรื่องผิดปกติสำหรับแบคทีเรีย L-รูปแบบซึ่งได้รับมักจะแสดงให้เห็นว่ามีปัจจัยแอนติเจนร่วมกับ


แบคทีเรียที่ผู้ปกครอง (ลินน์ 1986) ในแซนวิช ELISA พัฒนาดัดแปลงมาจากตัวแทน (1992), อัลคาไลน์ฟอสฟา
ผูกไว้กับสเต (Amersham) เพิ่มการตรวจสอบของแอนติเจนที่เฉพาะเจาะจง±ปฏิกิริยาแอนติบอดี ในวัฒนธรรมบริสุทธิ์
ขีด จำกัด ของการตรวจสอบของ B. subtilis L-รูปแบบอยู่ที่ประมาณ 103 มิลลิลิตรเซลล์ Y1 เมื่อเทียบกับ 107 เซลล์ Y1 มล. สำหรับเซลล์ผนัง
แบคทีเรีย (รูปที่ 1). การตรวจสอบที่ไม่เฉพาะเจาะจงได้รับการยืนยันจากทางทิศตะวันตก blotting (ข้อมูลไม่รวม) ที่แถบคล้าย
รูปแบบที่ได้รับสำหรับทั้งสองรูปแบบเซลล์ผนังและ Lforms โปรตีนที่ตรวจพบในรูปแบบบีเซลล์ผนัง subtilis และ L-รูปแบบอยู่ระหว่าง 155 และ 40 กิโลดาลตัน ทั้งสามกลุ่มหลักที่สอดคล้องกับโปรตีนที่มีมวลโมเลกุลของ 90, 65 และ 40 กิโลดาลตันเป็นลักษณะของเซลล์ทั้งสองชนิด