with adaptations.
Briefly, a standardized population of yeast cells grown to midexponential
phase (OD640 nm= 0.50 ± 0.05) in liquid YPD growth
medium (glucose 20 g L−1, bacto-peptone 10 g L−1, yeast extract 5 g L−1; pH 6.2) was collected by centrifugation (10,000 rpm, 25 ◦C,
5 min) and ressuspended in 2 ml of each test-sample (WWfeed,
WWanaer and WWfinal) and of the control sample (WWcontrol), all
previously filter-sterilized (0.2-m Supor- membrane filters, PALL
Life Sciences). The obtained cell suspensions were mixed with
thirty times-strength YPD medium in a proportion of 145:5, to
attain an OD640 nm approximately equal to 0.05. The obtained mixtures
were immediately added to wells (0.15 mL/well; in triplicate)
in polystyrene 96-well microplates (Greiner bio-one). Microplates
were immediately covered with a breathseal and a lid (Greiner bioone)
and incubated at 30 ◦C with constant agitation during 14 h.
Yeast growth was assessed by counting colony-forming-units (cfu)
in0.1 mL of culture serial dilutions spread-plated ontoYPD agarized
medium (72 h incubation at 30 ◦C), and the potential toxicity of
the samples was estimated using the ratio of cfuX /cfu0, where cfuX
or cfu0 represent the concentration of culturable cells (in cfu/mL)
attained in the yeast cell population upon 14 h incubation in the
presence ofthe test-samples or the control sample (WWcontrol, feed
solution without dye), respectively.
พร้อมดัดแปลงสั้น ๆ มาตรฐานประชากรเซลล์ยีสต์เติบโต midexponentialเฟส (OD640 nm = 0.50 ± 0.05) ของเหลว YPD โตปานกลาง (กลูโคส 20 กรัม L−1, bacto-peptone 10 g L−1 สารสกัดจากยีสต์ 5 กรัม L−1; pH 6.2) รวบรวม โดยการหมุนเหวี่ยง (10,000 rpm, 25 ◦C5 นาที) และใน 2 ml ของแต่ละการทดสอบตัวอย่าง (WWfeed, ressuspendedWWanaer และ WWfinal) และตัวอย่างควบคุม (WWcontrol), ทั้งหมดก่อนหน้านี้กรองฆ่าเชื้อ (0.2 m Supor-แผ่นกรองเมมเบรน แถบวายวิทยาศาสตร์ชีวภาพ) สารแขวนลอยเซลล์ที่ได้รับการถูกผสมกับสามสิบครั้งมีความแข็งแรงปานกลาง YPD ในสัดส่วนของ 145:5 การบรรลุการ nm OD640 ประมาณเท่ากับ 0.05 ส่วนผสมที่ได้รับทันทีเพิ่มหลุม (0.15 mL/ใน ลข้อดี )ในสไต microplates 96 หลุม (Greiner ชีวภาพหนึ่ง) Microplatesถูกปกคลุมไป ด้วย breathseal การและฝาปิด (Greiner bioone) ทันทีและรับการกกที่ 30 ◦C กับความปั่นป่วนอย่างต่อเนื่องในระหว่างชม. 14ยีสต์เจริญเติบโตได้รับการประเมิน โดยการตรวจนับโคโลนี--หน่วยการขึ้นรูป (cfu)mL in0.1 ของวัฒนธรรมเจือจาง serial ชุบโครเมี่ยมแพร่ ontoYPD agarizedปานกลาง (72 h กกไข่ที่ 30 ◦C), และความเป็นพิษอาจเกิดขึ้นของตัวอย่างการประมาณโดยใช้อัตราส่วนของ cfuX /cfu0 ที่ cfuXหรือ cfu0 เป็นตัวแทนความเข้มข้นของ culturable เซลล์ (cfu/mL)บรรลุในประชากรเซลล์ยีสต์เมื่อบ่ม 14 h ในการของตัวอย่างทดสอบหรือตัวอย่างควบคุม (WWcontrol ฟีดแก้ปัญหาได้โดยไม่ต้องย้อม), ตามลำดับ
การแปล กรุณารอสักครู่..

กับปรับสั้น ๆ , ประชากรมาตรฐานของยีสต์เซลล์โต midexponential( ( od640 nm = 0.50 ± 0.05 ) ในการ ypd ของเหลวปานกลาง ( กลูโคส 20 กรัมต่อลิตร Bacto − 1 , − 1 กรัมต่อลิตร ตามลำดับ สารสกัดจากยีสต์ 5 g L − 1 ; พีเอช 6.2 ) เก็บข้อมูลโดยการเหวี่ยงแยก ( 10 , 000 รอบต่อนาที , 25 ◦ C5 นาที ) และ ressuspended 2 มิลลิลิตร ( wwfeed ในตัวอย่างทดสอบ ,และ wwanaer wwfinal ) และของตัวอย่างควบคุม ( wwcontrol ) ทั้งหมดก่อนหน้านี้กรองฆ่าเชื้อ ( 0.2-m ซูพอร์ - เมมเบรนกรอง , พอลชีวิตวิทยาศาสตร์ ) นำเซลล์แขวนลอยอยู่ ผสมกับสามสิบครั้งแรง ypd ปานกลางในสัดส่วนของ 145:5 ,บรรลุ od640 nm ประมาณเท่ากับ 0.05 นำส่วนผสมได้ทันทีเพิ่มเวล ( 0.15 มิลลิลิตรต่อได้ดี ทั้งสามใบ )สไตรีน 96 ดี microplates ( ไกรเนอร์ไบโอ ) microplatesถูกปกคลุมด้วย breathseal ทันที และฝา ( ไกรเนอร์ bioone )บ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียส และ◦คงปั่นป่วนในช่วง 14 ชั่วโมงการเจริญเติบโตของยีสต์ที่ได้รับโดยนับสร้างอาณานิคม ( CFU ) หน่วยin0.1 มิลลิลิตรของวัฒนธรรมวิธีการชุบ ontoypd agarized กระจายอนุกรมปานกลาง ( 72 ชั่วโมงบ่มที่ 30 ◦ C ) และศักยภาพของความเป็นพิษตัวอย่างที่ถูกประเมินโดยใช้อัตราส่วนของ cfux / cfu0 ที่ cfuxหรือ cfu0 แสดงความเข้มข้นของ culturable เซลล์ ( CFU / ml )บรรลุในเซลล์ยีสต์จำนวน 14 ชั่วโมงเมื่อบ่มในสถานะของการทดสอบตัวอย่าง หรือตัวอย่างควบคุม ( wwcontrol อาหารสัตว์โซลูชั่นโดยไม่ต้องย้อม ) ตามลำดับ
การแปล กรุณารอสักครู่..
