FISH performance is carried out eas

FISH performance is carried out easily within few steps. First the water sample
has to be fixed. According to Amann [5], for most gram-negative bacteria paraformal-
dehyde is good to be used whereas ethanol is better for gram-positive bacteria. The fixation step is very important, otherwise degradation of ribosomes is risked. This
could lead to underestimation of the fluorescence signal. For some water samples, it is
necessary to perform enzymatic digestion after fixation. Especially this is required for
samples with very dense biofilm formations that impede direct diffusion of the probe
into the target cell. Enzymes like lysozyme or trypsin break down most polysaccha-
rides and proteins, respectively, and therefore can enhance the transport of the probe
through the biofilm into the cell. The hybridization step is then directly carried out on
the sample itself. Therefore the sample is spotted on teflon coated microscope slides
and air-dried. In a next step, the sample is dewatered through stepwise incubation in
ethanol from low to high percentage, i.e. from 50% to 98%, respectively. After de-
watering, the hybridization step is carried out through adding a mixture of salts,
formamide and detergents, and including the probe directly into the sample, which
will be then incubated in the dark for at least two hours. Subsequently, the sample has
to be washed of residual probes and can be analyzed under the fluorescence micro-
scope.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ประสิทธิภาพการทำงานที่ปลาจะดำเนินการได้อย่างง่ายดายภายในไม่กี่ขั้นตอน
ครั้งแรกตัวอย่างน้ำได้รับการแก้ไข ตามที่ Amann [5] สำหรับเชื้อแบคทีเรียส่วนใหญ่แกรมลบ paraformal-
dehyde เป็นสิ่งที่ดีที่จะนำมาใช้ในขณะที่เอทานอลจะดีกว่าสำหรับแบคทีเรียแกรมบวก ขั้นตอนการตรึงเป็นสิ่งที่สำคัญมากการย่อยสลายอย่างอื่นของไรโบโซมเป็นเสี่ยง
ซึ่งอาจนำไปสู่เบาของสัญญาณเรืองแสง
สำหรับตัวอย่างน้ำบางอย่างก็เป็นสิ่งที่จำเป็นในการดำเนินการย่อยของเอนไซม์หลังจากตรึง โดยเฉพาะอย่างยิ่งนี้เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับตัวอย่างที่มีการก่อตัวของไบโอฟิล์มหนาแน่นมากที่เป็นอุปสรรคต่อการแพร่กระจายโดยตรงจากการสอบสวนเข้าสู่เซลล์เป้าหมาย เช่นเอนไซม์ไลโซไซม์หรือ trypsin ทำลายลงมากที่สุด polysaccha- ขี่และโปรตีนตามลำดับและดังนั้นจึงสามารถเพิ่มประสิทธิภาพการขนส่งของการสอบสวนที่ผ่านฟิล์มเข้าสู่เซลล์ ขั้นตอนการผสมพันธุ์ก็จะดำเนินการโดยตรงออกในตัวอย่างของตัวเอง ดังนั้นตัวอย่างเป็นด่างในสไลด์กล้องจุลทรรศน์เคลือบเทฟลอนและอากาศแห้ง ในขั้นตอนต่อไปตัวอย่างจะถูก dewatered ผ่านขั้นตอนการบ่มในเอทานอลจากต่ำไปสูงถึงร้อยละเช่นจาก50% เป็น 98% ตามลำดับ หลังจาก de- รดน้ำขั้นตอนการผสมพันธุ์จะดำเนินการผ่านการเพิ่มส่วนผสมของเกลือที่formamide และผงซักฟอกและรวมถึงการสอบสวนโดยตรงในตัวอย่างซึ่งจะได้รับการบ่มแล้วในที่มืดเป็นเวลาอย่างน้อยสองชั่วโมง ต่อจากนั้นกลุ่มตัวอย่างที่ได้มีการล้างของยานสำรวจคงเหลือและสามารถวิเคราะห์ภายใต้ไมโครเรืองแสงขอบเขต

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

งานปลาจะดําเนินการได้อย่างง่ายดายภายในไม่กี่ขั้นตอน . ก่อนตัวอย่างน้ำ
ต้องได้รับการแก้ไข ตามแอเมิน [ 5 ] ส่วนใหญ่ แบคทีเรียแกรมลบ paraformal -
dehyde เป็นสิ่งที่ดีที่จะใช้ในขณะที่เอทานอลจะดีกว่าสำหรับแบคทีเรียแกรมบวกแบคทีเรีย การตรึงขั้นตอนที่สำคัญมาก มิฉะนั้น การย่อยสลายของไรโบโซมจะเสี่ยง นี้อาจนำไปสู่การการประเมินค่าต่ำไป
สัญญาณเรืองแสงด้วยสำหรับตัวอย่างบางน้ำก็ต้องทำการย่อยอาหารเอนไซม์
หลังจากการดอง . โดยเฉพาะ นี้เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับ
ตัวอย่างหนาแน่นกล่าวคือการก่อตัวที่ขัดขวางการแพร่กระจายโดยตรงของโพรบ
เข้าสู่เซลล์เป้าหมาย เอนไซม์ เช่น ไลโซไซม์ หรือเอนไซม์แบ่งมากที่สุด polysaccha -
ขี่และโปรตีนตามลำดับ และดังนั้นจึง สามารถเพิ่มประสิทธิภาพการขนส่งของโพรบ
ผ่านฟิล์มเข้าไปในเซลล์ การทำขั้นตอนแล้วตรงออกเป็น
ตัวอย่างนั่นเอง ดังนั้นตัวอย่างเป็นด่างดวงบนเคลือบเทฟล่อนกล้องจุลทรรศน์ภาพนิ่ง
และอากาศแห้ง ในขั้นตอนต่อไป กลุ่มตัวอย่าง คือนักเรียน dewatered ผ่านการบ่มใน
เอทานอลจากต่ำไปสูงร้อยละเช่นจาก 50% ถึง 98 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ หลังจาก de -
รดน้ํา