3.2. Thermal resistance of M. circi

3.2. Thermal resistance of M. circinelloides yogurt spoilage isolate
3.2.1. Hyphal phase thermal resistance
The thermal resistance of theM. circinelloides yogurt spoilage isolate
was assessed in both the hyphal and yeast-like growth phases. Hyphal
phase growth was confirmed by colony and cell morphology (Fig. 2A)
and was characterized by aerial mycelial development on plates incubated
under aerobic conditions. Microscopic examination of these cultures
revealed the typical branched, aseptate, apically growing hyphae
(Schipper, 1976; Pitt and Hocking, 2009). Hypha and sporangiospores
were observed by microscopy before thermal destruction. In skim
milk as a medium, destruction of the hyphal phase cells was readily
achieved at 58 °C. At 58 °C, about a log of hyphal phase M. circinelloides
was eliminated every two minutes. The D- and z-values for hyphal
phase cells (Table 2) indicate that cells would be readily eliminated
under typical milk pasteurization regimens (e.g. 72 °C for 15 s)
(Codex, 2014).
3.2.2. Yeast-like phase thermal resistance
The M. circinelloides yogurt spoilage isolate in the yeast-like phase
was determined to be less resistant to thermal treatment than hyphal
phase cells. Yeast-like growth was confirmed by colony and cell morphology
(Fig. 2B). Plates incubated under anaerobic conditions yielded
smooth, round colonies similar to yeast colonies.Microscopic examination
revealed small, round cells indicative of isotropic growth. In the
yeast-like phase, cells were rapidly destroyed by treatment at 55 °C
using skim milk as a medium. Relative to hyphal phase cells, inactivation
of yeast-like phase cells required less exposure to thermal processing
(Table 2).
3.3. Challenge study
The impact on yogurt spoilage of the antifungal additive natamycin
at varying concentrations was evaluated by assessing fungal growth at
4 °C, 15 °C, 25 °C in the hyphal phase, yeast-like phase, and by measurement
of CO2 production in the yeast-like phase. The effect of temperature
abuse on spoilage is an indication of the storage conditions which
lead to the large-scale recall.
3.3.1. Hyphal phase
Hyphal phase growth under various incubation conditions is shown
in Fig. 3. The maximum population increase achieved under each storage
conditionwas ~3.5 log CFU/g yogurt. Spoiled yogurt had visible mycelial
growth and syneresis. However, the time at which maximum
counts were achieved decreased as storage temperature increased. Additionally,
the relative effectiveness of natamycin addition was affected
by storage temperature. At storage temperatures of 4 °C and 15 °C,
10 ppm was sufficient to significantly inhibit hyphal phase growth
throughout the 30 day incubation period. When storage temperature
was increased to 25 °C, outgrowth of fungi was observed by day 14
with 10 ppm natamycin. At 25 °C, natamycin concentrations of
15 ppm or greater were necessary to inhibit hyphal growth. Natamycin
in yogurt at a concentration of 10 ppm significantly reduced fungal proliferation
compared to yogurt samples treated with 0 ppm or 5 ppm
natamycin. However, response to natamycin concentrations of
15 ppm and 20 ppm was significantly different compared to 10 ppm
natamycin concentrations by day 30 of the challenge study. Fungicidal
activity was observed at natamycin concentrations in excess of 5 ppm.
Die off of M. circinelloides was more rapid at 15 °C and 25 °C, although
the counts were eventually reduced to below detection limits under
all incubation conditions. Natamycin concentrations of 10 ppm allowed
hyphal phase populations incubated at 15 °C and 25 °C to recover before
the end of the 30 day incubation period.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3.2. ความร้อนความต้านทานของเน่าเสียโยเกิร์ต circinelloides เมตรแยก3.2.1. hyphal ระยะต้านทานความร้อนต้านทานความร้อนของพวกเขา แยก circinelloides โยเกิร์ตเน่าเสียรับการประเมินในระยะเติบโต hyphal และยีสต์เหมือน Hyphalระยะเจริญเติบโตได้รับการยืนยัน โดยอาณานิคมและเซลล์สัณฐาน (รูป 2A)และมีลักษณะพิเศษ โดยทางอากาศ mycelial พัฒนาบนแผ่นรับการกกภายใต้สภาพแอโรบิก วัฒนธรรมเหล่านี้การตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์เปิดเผย aseptate กิ่ง ปกติ apically เติบโต hyphae(Schipper, 1976 พิตต์และ Hocking, 2009) Hypha และ sporangiosporesถูกตั้งข้อสังเกต ด้วยกล้องจุลทรรศน์ก่อนความร้อนทำลาย ในพร่องมันเนยนมเป็นสื่อกลาง ทำลายเซลล์ระยะ hyphal แก้ไขได้อย่างง่ายดายความสำเร็จที่ 58 องศาเซลเซียส ที่ 58 ° C เกี่ยวกับล็อก hyphal ระยะ circinelloides เมตรถูกตัดทุก ๆ สองนาที D-z-ค่า และสำหรับ hyphalระยะเซลล์ (ตารางที่ 2) ระบุว่า เซลล์จะถูกตัดออกได้อย่างง่ายดายภายใต้สูตรการพาสเจอร์ไรซ์นมทั่วไป (เช่น 72 ° C เป็นเวลา 15 วินาที)(Codex, 2014)3.2.2 ต้านทานความร้อนระยะเหมือนยีสต์การเน่าเสียโยเกิร์ต circinelloides เมตรแยกในเฟสเหมือนยีสต์ลงน้อยทนต่อการรักษาความร้อนกว่า hyphalระยะที่มีเซลล์ ยืนยันเหมือนยีสต์เจริญเติบโตสัณฐานวิทยาอาณานิคมและเซลล์(รูปที่ 2B) แผ่นรับการกกภายใต้สภาพที่ปลอดออกซิเจนผลเรียบ กลมคล้ายกับยีสต์อาณานิคมอาณานิคม ตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์เปิดเผยขนาดเล็ก กลมบ่งบอกถึง isotropic เจริญเติบโตของเซลล์ ในขั้นตอนเหมือนยีสต์ เซลล์ถูกทำลายอย่างรวดเร็ว โดยการรักษาที่ 55 ° Cใช้นมพร่องมันเนยเป็นสื่อกลาง เซลล์ระยะสัมพันธ์กับ hyphal เลิกยีสต์เช่นระยะของ เซลล์ต้องการประมวลผลความร้อนสัมผัสน้อย(ตารางที่ 2)3.3 การศึกษาท้าทายผลกระทบต่อการเน่าเสียโยเกิร์ตของ natamycin สารเติมแต่งต้านเชื้อราที่ความเข้มข้นแตกต่างกันซึ่งประกอบ ด้วยการประเมินการเจริญเติบโตของเชื้อราที่4 ° C, 15 ° C, 25 ° C ใน ระยะ hyphal ยีสต์เหมือนระยะ และ โดยการวัดการผลิต CO2 ในเฟสเหมือนยีสต์ ผลของอุณหภูมิในเน่าเสียเป็นการบ่งชี้การจัดเก็บข้อมูลที่กำหนดนำไปสู่การเรียกคืนขนาดใหญ่3.3.1. hyphal เฟสแสดง hyphal ระยะเจริญเติบโตภายใต้เงื่อนไขต่าง ๆ กกไข่ในรูป 3 การเพิ่มประชากรสูงสุดได้ภายใต้เก็บข้อมูลแต่ละconditionwas ~3.5 ล็อกโยเกิร์ต CFU/g โยเกิร์ตบูดได้เห็น mycelialเจริญเติบโตและ syneresis อย่างไรก็ตาม เวลาที่สูงสุดนับได้รับลดลงตามอุณหภูมิที่เพิ่มขึ้น นอกจากนี้ประสิทธิภาพสัมพัทธ์ของ natamycin แห่งนี้ได้รับผลกระทบโดยอุณหภูมิในการเก็บ ที่เก็บที่อุณหภูมิ 4 ° C และ 15 ° C10 ppm ก็เพียงพอที่จะยับยั้ง hyphal ระยะเจริญเติบโตอย่างมีนัยสำคัญตลอดระยะเวลากกไข่ 30 วัน เมื่ออุณหภูมิในการเก็บเพิ่มขึ้นถึง 25 ° C เติบโตของเชื้อราพบว่า วันที่ 14กับ natamycin 10 ppm ที่ 25 ° C ความเข้มข้น natamycin15 ppm หรือมากกว่ามีความจำเป็นในการยับยั้งการเจริญเติบโต hyphal Natamycinในโยเกิร์ตที่ความเข้มข้น 10 ppm ลดการแพร่กระจายเชื้อราเมื่อเทียบกับตัวอย่างโยเกิร์ตด้วย 0 ppm หรือ 5 ppmnatamycin อย่างไรก็ตาม ตอบสนองต่อความเข้มข้น natamycin15 ppm และ 20 ppm ก็แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับ 10 ppmศึกษาความเข้มข้น natamycin ตามวันที่ 30 ของการท้าทาย เชื้อรากิจกรรมพบว่า ที่ความเข้มข้น natamycin เกิน 5 ppmตายจาก M. circinelloides ได้เร็วกว่าที่ 15 ° C และ 25 ° C แม้ว่าการตรวจนับถูกลดไปต่ำกว่าขีดจำกัดการตรวจจับภายใต้ในที่สุดเงื่อนไขกกไข่ทั้งหมด Natamycin ความเข้มข้นของ 10 ppm ได้ประชากร hyphal เฟสได้รับการกกที่ 15 ° C และ 25 ° C การกู้คืนก่อนสิ้นสุดของรอบระยะเวลากกไข่ 30 วัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3.2 ความต้านทานความร้อนของเอ็ม circinelloides การเน่าเสียของโยเกิร์ตแยก
3.2.1 เฟสเส้นใยต้านทานความร้อน
ความต้านทานความร้อนของพวกเขา โยเกิร์ต circinelloides เน่าเสียแยก
ได้รับการประเมินทั้งในเส้นใยและยีสต์เช่นระยะการเจริญเติบโต เส้นใย
เจริญเติบโตขั้นตอนการได้รับการยืนยันโดยอาณานิคมและสัณฐานวิทยาของเซลล์ (รูป. 2A)
และก็มีลักษณะการพัฒนาเส้นใยอากาศบนจานบ่ม
ภายใต้เงื่อนไขแอโรบิก ตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์วัฒนธรรมเหล่านี้
เผยให้เห็นทั่วไปกิ่ง aseptate, ปลายเป็นเส้นใยเจริญเติบโต
(Schipper 1976; พิตต์และสาบ 2009) Hypha และปอร์
ถูกตั้งข้อสังเกตโดยใช้กล้องจุลทรรศน์ก่อนที่จะทำลายความร้อน ในหาง
นมเป็นสื่อกลางในการทำลายของเซลล์เฟสเส้นใยก็พร้อมที่
ประสบความสำเร็จที่ 58 ° C ที่ 58 ° C, เกี่ยวกับการล็อกเฟสเส้นใย circinelloides เมตร
ถูกกำจัดทุกสองนาที D- และ Z-ค่าสำหรับเส้นใย
เซลล์เฟส (ตารางที่ 2) แสดงให้เห็นว่าเซลล์จะถูกกำจัดได้อย่างง่ายดาย
ภายใต้สูตรพาสเจอร์ไรซ์นมทั่วไป (เช่น 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 15 วินาที)
(Codex 2014).
3.2.2 ยีสต์เหมือนขั้นตอนการต้านทานความร้อน
circinelloides เอ็มโยเกิร์ตเน่าเสียแยกในระยะยีสต์เช่น
มุ่งมั่นจะเป็นน้อยดื้อต่อการรักษาความร้อนกว่าเส้นใย
เซลล์เฟส การเจริญเติบโตของยีสต์เหมือนได้รับการยืนยันโดยอาณานิคมและสัณฐานวิทยาของเซลล์
(รูป. 2B) แผ่นบ่มภายใต้สภาวะไร้ออกซิเจนให้ผล
เรียบอาณานิคมรอบคล้ายกับการตรวจสอบยีสต์ colonies.Microscopic
เปิดเผยขนาดเล็กเซลล์รอบตัวบ่งชี้ของการเจริญเติบโตแบบรอบทิศ ใน
เฟสยีสต์เช่นเซลล์ถูกทำลายได้อย่างรวดเร็วโดยการรักษาที่ 55 องศาเซลเซียส
โดยใช้นมพร่องมันเนยเป็นสื่อกลาง เมื่อเทียบกับเซลล์เฟสเส้นใยยับยั้ง
ของเซลล์ยีสต์เฟสเหมือนต้องเปิดรับแสงน้อยที่จะประมวลผลความร้อน
(ตารางที่ 2).
3.3 การศึกษาความท้าทาย
ผลกระทบต่อการเน่าเสียของโยเกิร์ตของ natamycin สารเติมแต่งเชื้อรา
ที่ระดับความเข้มข้นที่แตกต่างกันได้รับการประเมินโดยการประเมินการเจริญเติบโตของเชื้อราที่
4 ° C, 15 ° C, 25 ° C ในขั้นตอนเส้นใยเฟสยีสต์เหมือนและโดยการวัด
ของการผลิตก๊าซ CO2 ใน ระยะยีสต์เช่น ผลของอุณหภูมิ
การละเมิดในการเน่าเสียเป็นข้อบ่งชี้ของเงื่อนไขการจัดเก็บข้อมูลที่
นำไปสู่การเรียกคืนขนาดใหญ่.
3.3.1 เฟสเส้นใย
เส้นใยเจริญเติบโตขั้นตอนภายใต้เงื่อนไขการบ่มต่างๆจะปรากฏ
ในรูป 3. การเพิ่มขึ้นของประชากรสูงสุดประสบความสำเร็จภายใต้การจัดเก็บข้อมูลในแต่ละ
conditionwas ~ 3.5 log CFU / g โยเกิร์ต โยเกิร์ตมีนิสัยเสียของเส้นใยที่มองเห็น
การเจริญเติบโตและ syneresis แต่เวลาที่สูงสุด
นับกำลังประสบความสำเร็จลดลงเมื่ออุณหภูมิการเก็บรักษาเพิ่มขึ้น นอกจากนี้
ประสิทธิภาพของญาตินอกจาก natamycin ได้รับผลกระทบ
จากอุณหภูมิการเก็บรักษา ที่อุณหภูมิการเก็บรักษา 4 องศาเซลเซียสและ 15 องศาเซลเซียส
10 ppm ก็เพียงพอที่จะยับยั้งการเจริญเติบโตอย่างมีนัยสำคัญเฟสเส้นใย
ตลอดระยะเวลาการบ่ม 30 วัน เมื่ออุณหภูมิการเก็บรักษา
เพิ่มขึ้นเป็น 25 ° C, ผลพลอยได้จากเชื้อราได้รับการตรวจสอบโดยวันที่ 14
มี natamycin 10 ppm ที่ 25 ° C เข้มข้น natamycin ของ
15 ppm หรือมากกว่ามีความจำเป็นในการยับยั้งการเจริญเติบโตเส้นใย natamycin
ในโยเกิร์ตที่มีความเข้มข้น 10 ppm อย่างมีนัยสำคัญลดการแพร่กระจายของเชื้อรา
เมื่อเทียบกับตัวอย่างโยเกิร์ตได้รับการรักษาด้วย 0 ppm หรือ 5 ppm
natamycin แต่การตอบสนองต่อความเข้มข้นของ natamycin
15 ppm และ 20 ppm ถูกที่แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับ 10 ppm
ความเข้มข้น natamycin โดยวันที่ 30 ของการศึกษาความท้าทาย เชื้อรา
กิจกรรมพบว่าที่ความเข้มข้น natamycin ในส่วนที่เกิน 5 ppm.
ตายออกจาก circinelloides เมตรเป็นมากขึ้นอย่างรวดเร็วที่ 15 ° C และ 25 ° C ถึงแม้ว่า
นับในที่สุดก็ลดลงไปต่ำกว่าเกณฑ์การตรวจสอบภายใต้
เงื่อนไขการบ่มทั้งหมด ความเข้มข้น natamycin 10 ppm อนุญาตให้
ประชากรเฟสเส้นใยบ่มที่อุณหภูมิ 15 องศาเซลเซียสและ 25 องศาเซลเซียสในการกู้คืนก่อนที่จะ
สิ้นสุดระยะเวลาการบ่ม 30 วัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3.2 . ความต้านทานความร้อนของ circinelloides โยเกิร์ตการแยกดำเนินงาน . ต้านทานความร้อนลดลง เฟสความต้านทานความร้อนของพวกเขา การแยก circinelloides โยเกิร์ตประเมินทั้งในเส้นใยและยีสต์ เช่น ระยะการเจริญเติบโต เส้นใยการเจริญเติบโตระยะที่ได้รับการยืนยันโดยอาณานิคมและรูปร่างของเซลล์ ( รูปที่ 2A )และลักษณะของอากาศบนแผ่นโดยการพัฒนาภายใต้สภาวะแอโรบิก . ตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์ของเชื้อเหล่านี้พบโดยทั่วไป aseptate กิ่ง , เติบโต , apically )( ชิปเปอร์ , 1976 ; Pitt และขาย , 2009 ) ไฮฟา และ sporangiosporesตรวจสอบด้วยกล้องจุลทรรศน์ก่อนที่จะทำลายความร้อน ในหางนมเป็นสื่อ ทำลายเซลล์เส้นใยพร้อมเฟสความที่ 58 องศา ที่ 58 องศา C , เกี่ยวกับบันทึกของเส้นใย circinelloides เฟส เอ็มถูกตัดทุกสองนาที D - และ z-values สำหรับเส้นใยเซลล์ระยะ ( ตารางที่ 2 ) พบว่าเซลล์จะพร้อมตัดนมพาสเจอร์ไรส์ภายใต้ทั่วไปยา ( เช่น 72 ° C เป็นเวลา 15 วินาที )( Codex 2014 )3.2.2 . ยีสต์ชอบระยะต้านทานความร้อนเมตร circinelloides โยเกิร์ตการแยกยีสต์เหมือนในเฟสคือตั้งใจจะทนต่อความร้อนการรักษากว่าเส้นใยน้อยเซลล์ระยะ ยีสต์ เช่น การยืนยันจากอาณานิคมและรูปร่างของเซลล์( รูปที่ 2B ) แผ่น ) ภายใต้เงื่อนไขและแอโรบิกอาณานิคมอาณานิคมเกลี้ยงกลมคล้ายกับกล้องจุลทรรศน์ยีสต์ .พบขนาดเล็กเซลล์แสดงให้เห็นถึงการเจริญเติบโตแบบกลม ในยีสต์ชอบเฟสเซลล์ได้อย่างรวดเร็วทำลายโดยการรักษาที่ 55 องศา Cใช้หางนมผงเป็นสื่อกลาง สัมพัทธ์ลดลงเมื่อระยะที่เซลล์ยีสต์เช่นเดียวกับเซลล์ระยะที่ต้องการการประมวลผลความร้อนน้อยลง( ตารางที่ 2 )3.3 . การศึกษาความท้าทายผลกระทบในโยเกิร์ตเสริมฤทธิ์การเน่าเสียของนาตาไมซินที่ความเข้มข้นแตกต่างกันคือการประเมินโดยประเมินการเจริญเติบโตที่4 ° C , 15 ° C 25 ° C ในระยะที่เส้นใย ยีสต์ เช่น ระยะ และการวัดการผลิตคาร์บอนไดออกไซด์ในยีสต์ เช่น ระยะ ผลของอุณหภูมิการละเมิดในการเป็นข้อบ่งชี้สภาพกระเป๋าที่นำไปสู่การขนาดใหญ่3.3.1 . เส้นใยระยะที่เส้นใยระยะการเจริญเติบโตภายใต้เงื่อนไขการบ่มต่างๆที่แสดงในรูปที่ 3 การเพิ่มจำนวนประชากรสูงสุดที่ได้รับในแต่ละที่เก็บconditionwas ~ 3.5 log CFU / g / ไอศกรีม โยเกิร์ตบูดได้มองเห็นเส้นใยการเจริญเติบโตและการแยกตัวของน้ำ . อย่างไรก็ตาม เวลาที่ สูงสุดนับได้สำเร็จ เมื่ออุณหภูมิเพิ่มขึ้น นอกจากนี้ประสิทธิภาพสัมพัทธ์ของการเพิ่มนาตาไมซินโดยอุณหภูมิการเก็บรักษา ที่ระดับอุณหภูมิ 4 ° C และ 15 ° C10 ppm ก็เพียงพอที่จะมีการเจริญระยะที่เส้นใยตลอด 30 วันระยะเวลาการบ่มดิน เมื่ออุณหภูมิเพิ่มขึ้นถึง 25 ° C , ผลพลอยได้ของเชื้อรา สังเกตได้จากวันที่ 14กับ 10 ppm นาตาไมซิน . ที่อุณหภูมิ 25 ° C , นาตาไมซิน ความเข้มข้นของ15 ppm หรือมากกว่าความจำเป็นเพื่อขัดขวางการเจริญเติบโตของเส้นใย . นาตาไมซินในโยเกิร์ตที่ความเข้มข้น 10 ppm สามารถลดการราเมื่อเปรียบเทียบกับตัวอย่างที่ได้รับการรักษาด้วยโยเกิร์ต 0 ส่วนในล้านส่วน หรือ 5 มิลลิกรัมนาตาไมซิน . อย่างไรก็ตาม การตอบสนองต่อความเข้มข้นของนาตาไมซิน15 ppm และ 20 ppm มีความแตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติเมื่อเปรียบเทียบกับ 10 ส่วนในล้านส่วนนาตาไมซินความเข้มข้น 30 วันของความท้าทายการศึกษา fungicidalกิจกรรมที่พบในนาตาไมซินความเข้มข้นเกิน 5 ppmตายจากม. circinelloides อย่างรวดเร็วคือเพิ่มเติมที่ 15 ° C และ 25 ° C , ถึงแม้ว่านับในที่สุดลดการ จำกัด ภายใต้ด้านล่างเงื่อนไขการบ่มทั้งหมด นาตาไมซินที่ความเข้มข้น 10 ppm อนุญาตระยะบ่มเส้นใย ประชากรที่ 15 ° C และ 25 ° C กู้ก่อนสิ้นวันที่ 30 ระยะเวลาการบ่มดิน