4.3. Engineering the yeast membrane

4.3. Engineering the yeast membrane for membrane protein production

The yeast membrane differs in composition from that of mammalian membranes. This is likely to be highly relevant to subsequent structural and functional studies of recombinant membrane proteins produced in yeast because lipids have a particularly important role in the normal function of membrane proteins; they contribute to membrane fluidity and may directly interact with membrane proteins.

In an attempt to “humanize” the yeast membrane, yeast strains have been developed that synthesize cholesterol rather than the native yeast sterol, ergosterol. This was achieved by replacing the ERG5 and ERG6 genes of the ergosterol biosynthetic pathway with the mammalian genes DHRC24 and DHRC7 [59], [60] and [61], respectively. The gene products of DHRC7 and DHRC24 were identified as key enzymes that saturate sterol intermediates at positions C7 and C24 in cholesterol (but not ergosterol) synthesis ( Fig. 4). Erg5p introduces a double bond at position C22 and Erg6p adds a methyl group at position C24 in the ergosterol biosynthetic pathway and therefore competes with the gene product of DHRC24 for its substrate.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

4.3. วิศวกรรมเมมเบรนสำหรับการผลิตเมมเบรนโปรตีนยีสต์เมมเบรนยีสต์ที่แตกต่างในองค์ประกอบจากที่เลี้ยงลูกด้วยนมเยื่อ นี่คือแนวโน้มที่จะสอดคล้องกับการศึกษาโครงสร้าง และการทำงานที่ตามมาของเมมเบรน recombinant โปรตีนผลิตในยีสต์เนื่องจากไขมันมีบทบาทสำคัญอย่างยิ่งในการทำงานปกติของเมมเบรนโปรตีน พวกเขานำไปสู่การไหลเยื่อหุ้ม และอาจโต้ตอบโดยตรงกับเยื่อหุ้มในความพยายาม "humanize" เมมเบรนยีสต์ ยีสต์สายพันธุ์ได้รับการพัฒนาที่สังเคราะห์คอเลสเตอรมากกว่าเจ้ายีสต์สเตอรอล ergosterol นี้สำเร็จ โดยการแทนที่ยีน ERG5 และ ERG6 ของทางเดินชีวสังเคราะห์ ergosterol ด้วยเลี้ยงลูกด้วยนมยีน DHRC24 และ DHRC7 [59], [60] [61], และตามลำดับ มีระบุผลิตภัณฑ์ยีน DHRC7 และ DHRC24 เป็นเอนไซม์สำคัญที่เปียกโชก intermediates สเตอรอลที่ตำแหน่ง C7 และ C24 ในไขมัน (แต่ไม่ ergosterol) การสังเคราะห์ (4 รูป) Erg5p แนะนำพันธะคู่ที่ตำแหน่ง C22 และ Erg6p เพิ่มกลุ่มเมธิลที่ตำแหน่ง C24 ในทางชีวสังเคราะห์ของ ergosterol และแข่งขันกับผลิตภัณฑ์ยีนของ DHRC24 สำหรับพื้นผิวของมันดังนั้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

4.3 วิศวกรรมเมมเบรนยีสต์สำหรับการผลิตโปรตีนเยื่อ

เมมเบรนยีสต์ที่แตกต่างในองค์ประกอบจากที่ของเยื่อเลี้ยงลูกด้วยนม นี่คือแนวโน้มที่จะสูงที่เกี่ยวข้องกับการศึกษาโครงสร้างและการทำงานที่ตามมาของโปรตีน recombinant ผลิตในยีสต์เพราะไขมันมีบทบาทสำคัญอย่างยิ่งในการทำงานปกติของโปรตีน; พวกเขามีส่วนร่วมในสถานะของเหลวภายในเซลล์โดยตรงและอาจมีปฏิกิริยากับโปรตีน.

ในความพยายามที่จะ "เมตตากรุณา" เมมเบรนยีสต์สายพันธุ์ยีสต์ได้รับการพัฒนาที่สังเคราะห์คอเลสเตอรอลมากกว่า sterol ยีสต์พื้นเมือง ergosterol นี่คือความสำเร็จโดยการเปลี่ยน ERG5 และ ERG6 ยีนของทางเดิน ergosterol ชีวสังเคราะห์ด้วยยีนที่เลี้ยงลูกด้วยนมและ DHRC24 DHRC7 [59], [60] และ [61] ตามลำดับ ผลิตภัณฑ์ยีน DHRC7 และ DHRC24 ถูกระบุว่าเป็นเอนไซม์สำคัญที่เปียกโชกตัวกลาง sterol ที่ตำแหน่ง C7 และ C24 คอเลสเตอรอล ( แต่ไม่ ergosterol) สังเคราะห์ (รูปที่. 4) Erg5p แนะนำพันธะคู่ที่ตำแหน่ง C22 และ Erg6p เพิ่มกลุ่มเมธิลที่ตำแหน่ง C24 ในทางเดิน ergosterol ชีวสังเคราะห์และดังนั้นจึงแข่งขันกับสินค้าของยีน DHRC24 สำหรับพื้นผิวของมัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

4.3 . วิศวกรรมเนื้อเยื่อยีสต์สำหรับการผลิตโปรตีนเมมเบรนยีสต์เยื่อแตกต่างกันในองค์ประกอบจากของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมเยื่อ นี้มีแนวโน้มที่จะสูงที่เกี่ยวข้องกับโครงสร้างและหน้าที่ของเซลล์ ต่อมาการศึกษาของเมมเบรนโปรตีนที่ผลิตในยีสต์ เพราะไขมันมีบทบาทสำคัญอย่างยิ่งในการทำงานปกติของเมมเบรนโปรตีน พวกเขาสนับสนุนข้อสรุปและเยื่อโดยตรงอาจโต้ตอบกับโปรตีนเมมเบรนในความพยายามที่จะ " มนุษย์ " ยีสต์ชนิดสายพันธุ์ยีสต์ได้รับการพัฒนาที่สังเคราะห์คอเลสเตอรอลมากกว่าเจ้าของภาษายีสต์สเตอรอลโกสเทอรอล , . นี่คือความโดยการแทนที่ และ erg6 erg5 ยีนของโกสเทอรอลร่วมเส้นทางกับสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมและยีน dhrc24 dhrc7 [ 59 ] [ 60 ] และ [ 61 ] ตามลำดับ ยีนและผลิตภัณฑ์ของ dhrc7 dhrc24 ระบุเป็นคีย์เอนไซม์ที่เปียกโชก intermediates สเตอรอลที่ตำแหน่ง C7 C24 และโคเลสเตอรอล ( แต่ไม่ใช่โกสเตอรอล ) การสังเคราะห์ ( รูปที่ 4 ) erg5p แนะนำพันธะคู่ที่ตำแหน่งและเพิ่ม c22 erg6p เมทิลกรุ๊ปที่ตำแหน่ง C24 ในโกสเทอรอลร่วมเส้นทาง และดังนั้นจึง สามารถแข่งขันกับผลิตภัณฑ์ของยีน dhrc24 ของพื้นผิว