NSCLC cells (105 cells/well) were c

NSCLC cells (105 cells/well) were cultured with increasing concentrations of fresh oilenriched
medium for up to 48 h, or were transfected with control or AP-2α siRNA for 30 h
before exposure of the cells to fresh oil-enriched medium for an additional 48 h in 96-well
plates. In a separate experiment, cells were transfected with inactive (ILK-S343A) or
superactive ILK (ILKS-343D) cDNA, or with control or AP-2 expression reporter construct
SP (RSV)AP-2 (#12100) (purchased from Addgene, Inc.; Cambridge, MA) (17) using the
oligofectamine reagent (Invitrogen) according to the manufacturer’s instructions. After 24 h
of incubation, cells were treated with or without fresh oil-enriched medium for 48 h.
Afterwards, the number of viable cells in culture was determined using the CellTiter-Glo
Luminescent Cell Viability Assay kit, which is based on quantitation of the ATP present
according to the manufacturer’s instructions (Promega).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เซลล์ NSCLC (105 เซลล์/ดี) ถูกอ่าง ด้วยเพิ่มความเข้มข้นของ oilenriched สดขนาดกลางสำหรับถึง 48 h หรือมี transfected ควบคุมหรือ siRNA AP 2α สำหรับ 30 hก่อนที่จะเปิดรับแสงของเซลล์สดอุดมไปน้ำมันปานกลางมี h 48 เพิ่มเติมใน 96-ดีแผ่น ในการทดลองแยก เซลล์ถูก transfected กับงาน (บริการ-S343A) หรือsuperactive cDNA บริการ (ILKS-343D) หรือควบคุมหรือสร้างโปรแกรมรายงานนิพจน์ AP 2SP (RSV) AP-2 (#12100) (ซื้อจาก Addgene, Inc. เคมบริดจ์ MA) โดยใช้ (17) การรีเอเจนต์ oligofectamine (Invitrogen) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต หลังจาก 24 ชมของคณะทันตแพทยศาสตร์ เซลล์ก็ถือว่ามี หรือไม่ มีสดอุดมไปน้ำมันปานกลาง 48 hภายหลัง จำนวนของเซลล์ทำงานได้ในวัฒนธรรมกำหนดใช้ว่า CellTiterLuminescent วิเคราะห์ชีวิตเซลล์ชุด ซึ่งขึ้นอยู่กับการวิเคราะห์หาปริมาณของ ATP มีตามคำสั่งของผู้ผลิต (Promega)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เซลล์ NSCLC (105 เซลล์ / ดี) มีการเพาะเลี้ยงที่มีความเข้มข้นที่เพิ่มขึ้นของ oilenriched สด
ขนาดกลางได้ถึง 48 ชั่วโมงหรือถูก transfected ที่มีการควบคุมหรือ AP-2α siRNA 30 ชั่วโมง
ก่อนที่จะเปิดรับของเซลล์กลางน้ำมันที่อุดมด้วยความสดใหม่เพิ่มเติม 48 ชั่วโมงใน 96 หลุม
จาน ในการทดลองแยกเซลล์ถูก transfected กับการใช้งาน (ILK-S343A) หรือ
superactive ILK (ILKS-343D) ยีนหรือที่มีการควบคุมหรือ AP-2 expression นักข่าวสร้าง
เครื่องหมาย SP (RSV) AP-2 (# 12100) (ซื้อจาก Addgene , Inc .; เคมบริดจ์) (17) โดยใช้
น้ำยา oligofectamine (Invitrogen) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต หลังจาก 24 ชั่วโมง
ของการบ่มเซลล์ได้รับการรักษาที่มีหรือไม่มีสื่อที่อุดมด้วยน้ำมันสด 48 ชม.
หลังจากนั้นจำนวนของเซลล์ที่ทำงานในวัฒนธรรมที่ถูกกำหนดโดยใช้ CellTiter-Glo
เซลล์มีชีวิตเรืองแสงชุดทดสอบซึ่งจะขึ้นอยู่กับปริมาณ เอทีพีในปัจจุบัน
ตามคำแนะนำของผู้ผลิต (Promega)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การใช้เซลล์ ( 105 เซลล์ / ) โดยเลี้ยงด้วยการเพิ่มความเข้มข้นของตัวกลาง oilenriched
สดได้ถึง 48 ชั่วโมง หรือ transfected ที่มีการควบคุมหรือ ap-2 αบริษัท 30 H
ก่อนที่แสงของเซลล์น้ำมันสดอุดมขนาดกลางอีก 48 ชั่วโมงดี
96 แผ่น ในการทดลองแยกเซลล์มี transfected กับไม่ใช้ ( ilk-s343a ) หรือ
superactive ก่อน ( ilks-343d ) cDNA ,หรือการควบคุมการแสดงออกหรือนักข่าว ap-2 สร้าง
SP ( RSV ) ap-2 ( #วีดีโอ ) ( ซื้อจาก addgene , Inc ; Cambridge , MA ) ( 17 ) ใช้
oligofectamine Reagent ( Invitrogen ) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต หลังจาก 24 H
บ่มเซลล์รักษาด้วยหรือปราศจากน้ำมันสดอุดมกลาง 48 H .
หลังจากนั้นจํานวนที่มีเซลล์ในวัฒนธรรมถูกกำหนดโดยใช้ celltiter Glo
เรืองแสงเซลล์ 3 ชุด ซึ่งจะขึ้นอยู่กับเซลล์ของเอทีพีปัจจุบัน
ตามคําแนะนําของผู้ผลิต ( promega )