The endophytic filamentous fungus H

The endophytic filamentous fungus Harpophora oryzae is a beneficial endosymbiont isolated from the wild rice. H. oryzae could not only effectively improve growth rate and biomass yield of rice crops, but also induce systemic resistance against the rice blast fungus, Magnaporthe oryzae. In this study, Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation (ATMT) was employed and optimized to modify the H. oryzae genes by either random DNA fragment integration or targeted gene replacement. Our results showed that co-cultivation of H. oryzae conidia with A. tumefaciens in the presence of acetosyringone for 48 h at 22◦C could lead to a relatively highest frequency of transformation, and 200 M acetosyringone (AS) pre-cultivation of A. tumefaciens is also suggested. ATMT-mediated knockout mutagenesis was accomplished with the gene-deletion cassettes using a yeast homologous recombination method with a yeast–Escherichia–Agrobacterium shuttle vector pKOHo. Using the ATMT-mediated knockout mutagenesis, we successfully deleted three genes of H. oryzae (HoATG5, HoATG7, and HoATG8), and then got the null mutants Hoatg5, Hoatg7, and Hoatg8. These results suggest that ATMT is an efficient tool for gene modification including randomly insertional mutagenesis and gene deletion mutagenesis in H. oryzae.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Endosymbiont ประโยชน์ที่แยกต่างหากจากข้าวป่าเห็ดรา filamentous endophytic Harpophora แห้งระดับต่าง ๆ ได้ H. แห้งระดับต่าง ๆ สามารถไม่เพียงแต่พัฒนาเจริญเติบโตของชีวมวลและอัตราผลผลิตของข้าวได้อย่างมีประสิทธิภาพ แต่ยัง ก่อให้เกิดระบบการต้านทานต่อเชื้อราข้าวระเบิด Magnaporthe แห้งระดับต่าง ๆ ในการศึกษานี้ การแปลง tumefaciens mediated อโกรแบคทีเรียม (ATMT) ถูกจ้าง และเพิ่มประสิทธิภาพในการปรับเปลี่ยนยีน H. แห้งระดับต่าง ๆ โดยการสุ่มดีเอ็นเอส่วนรวม หรือเป้าหมายแทนยีน ผลของเราแสดงให้เห็นว่าการเพาะปลูกร่วมของ conidia กับ A. tumefaciens ในต่อหน้าของ acetosyringone สำหรับ h 48 ที่ 22◦C อาจทำให้ความถี่ค่อนข้างสูงสุดของการเปลี่ยนแปลง และ 200 M acetosyringone (เป็น) นอกจากนี้ยังมีการแนะนำก่อนการเพาะปลูกของ A. tumefaciens แห้งระดับต่าง ๆ H. ชนะน็อกโดยเทคนิค ATMT mediated mutagenesis ได้สำเร็จกับฝ้าลบยีนด้วยวิธี homologous recombination ยีสต์เป็นยีสต์ – Escherichia – อโกรแบคทีเรียมรถเวกเตอร์ pKOHo ใช้ mutagenesis ATMT mediated ชนะน็อกโดยเทคนิค เราสำเร็จลบสามยีนของ H. แห้งระดับต่าง ๆ (HoATG5, HoATG7 และ HoATG8), และก็ มีสายพันธุ์เป็น null Hoatg5, Hoatg7 และ Hoatg8 ผลลัพธ์เหล่านี้แนะนำว่า ATMT เป็นเครื่องมือที่มีประสิทธิภาพสำหรับการปรับเปลี่ยนยีนรวมถึงสุ่ม insertional mutagenesis และยีนการลบ mutagenesis H. แห้งระดับต่าง ๆ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เชื้อราเอนโดไฟท์ใย Harpophora oryzae เป็น endosymbiont ประโยชน์ที่แยกได้จากข้าวป่า เอช oryzae อาจไม่เพียง แต่มีประสิทธิภาพเพิ่มอัตราการเจริญเติบโตและผลผลิตมวลชีวภาพของข้าว แต่ยังก่อให้เกิดระบบต้านทานต่อเชื้อราระเบิดข้าว Magnaporthe oryzae ในการศึกษานี้การเปลี่ยนแปลง Agrobacterium tumefaciens พึ่ง (ATMT) ถูกจ้างและเพิ่มประสิทธิภาพในการปรับเปลี่ยนเอช oryzae ยีนโดยทั้งบูรณาการสุ่มชิ้นดีเอ็นเอของยีนหรือเปลี่ยนการกำหนดเป้​​าหมาย ผลของเราแสดงให้เห็นว่าผู้ร่วมการเพาะปลูกของเอช oryzae conidia กับ A. tumefaciens ในการปรากฏตัวของ acetosyringone 48 ชั่วโมงที่22◦Cอาจนำไปสู่​​ความถี่ค่อนข้างสูงที่สุดของการเปลี่ยนแปลงและ 200 M acetosyringone (AS) ก่อนการเพาะปลูกของ tumefaciens. นอกจากนี้ยังเป็นข้อเสนอแนะ ฉับที่น่าพิศวง ATMT หนูก็ประสบความสำเร็จกับเทปยีนลบโดยใช้ยีสต์วิธีการรวมตัวกันอีกคล้ายคลึงกันมีรถรับส่งยีสต์ Escherichia-Agrobacterium เวกเตอร์ pKOHo ใช้ฉับที่น่าพิศวง ATMT พึ่งเราลบเรียบร้อยสามของยีนเอช oryzae (HoATG5, HoATG7 และ HoATG8) แล้วมีการกลายพันธุ์ null Hoatg5, Hoatg7 และ Hoatg8 ผลการศึกษานี้แสดงให้เห็นว่า ATMT เป็นเครื่องมือที่มีประสิทธิภาพสำหรับการปรับเปลี่ยนยีนกลายพันธุ์รวมทั้งสุ่มแทรกและลบยีนกลายพันธุ์ในเอช oryzae

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ส่วนราเส้นใยเชื้อรา harpophora oryzae เป็นประโยชน์ endosymbiont แยกจากข้าวป่า H . oryzae สามารถไม่เพียงมีประสิทธิภาพเพิ่มอัตราการเจริญเติบโตและมวลชีวภาพและผลผลิตของข้าวไร่ แต่ยังก่อให้เกิดความต้านทานระบบต่อข้าวระเบิดเห็ดรา magnaporthe oryzae . ในการศึกษานี้โดย Agrobacterium tumefaciens แปลง ( atmt ) มาใช้ และปรับให้เหมาะสมเพื่อปรับเปลี่ยน . oryzae ยีน โดยการบูรณาการเป้าหมายเปลี่ยนดีเอ็นเอหรือยีน ผลของเราแสดงให้เห็นว่า Co การเพาะปลูก . oryzae โคนิกับซี เอ ในการแสดงตนของ acetosyringone 48 H ที่ 22 ◦ C อาจจะค่อนข้างสูง ความถี่ของการเปลี่ยนแปลงและ 200 ม. acetosyringone ( เป็น ) ก่อนการเพาะปลูกของ A . tumefaciens ด้วยแล้ว โดยการ atmt น็อกได้ด้วยการใช้ยีนเทปยีสต์การเปรียบเทียบวิธีกับยีสต์– Escherichia – Agrobacterium รับส่งเวกเตอร์ pkoho . โดยการใช้ atmt โดยเราสามารถลบ 3 ยีน . oryzae ( hoatg5 hoatg7 , ,และ hoatg8 ) จากนั้นได้ hoatg5 กลายพันธุ์ null , hoatg7 และ hoatg8 . ผลลัพธ์เหล่านี้ชี้ให้เห็นว่า atmt เป็นเครื่องมือที่มีประสิทธิภาพสำหรับการแก้ไขรวมถึงการสุ่ม insertional ยีนและยีนในการลบของ H . oryzae .