Catalase negative Gram-positive rod

Catalase negative Gram-positive rods that produced acid were
tested for their ability to grow in skim milk at 10
C and 45
C, in
MRS broth at pH 4.4 and 9.6, and in the presence of 6.5% (m/v) of
NaCl (Harrigan, 1998). These bacteria were screened for bacteriocin
production by agar-spot-test method (Todorov, 2008) against
members of the genera Enterococcus, Lactobacillus, Lactococcus,
Listeria, and Pediococcus.
The bacteriocin-producing isolates were identified by API50CHL
system (BioMerieux, Marcy-l’Etoile, France). The DNA of the microorganisms
was extracted with the ZR Fungal/Bacterial DNA Kit
(Zymo Research, Irvine, CA, USA) and further evaluated by using the
random amplification of polymorphic DNA (RAPD) PCR technique
with primers OPL-14 (50-GTG ACA GGC T-30) and OPL-20 (50-TGG
TGG ACC A-30) (Todorov et al., 2010a). The amplified products were
separated by electrophoresis in 1.4% (m/v) agarose gels and band
patterns were analyzed using Gel Compare, Version 4.1 (Applied
Maths, Kortrijk, Belgium).
Based on results of RAPD-PCR and size of the inhibition zone,
isolate ST71KS was selected for future studies. The microorganism
was identified using PCR species-specific primers (Torriani et al.,
2001) and further confirmed by amplification of 16S rDNA with
primers F8 and R1512 (Felske et al., 1997). The amplified fragments
were purified (QIAquick PCR Purification Kit e Qiagen, Hilden,
Germany), sequenced, and compared to sequences available at
GenBank using BLAST (Basic Local Alignment Search Tool).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

มีคาเป็นลบแกรมบวกแท่งที่ผลิตกรดผ่านทดสอบความสามารถในการเติบโตในนมพร่องมันเนยที่ 10 C และ 45 C ในนางซุป ที่ pH 4.4 และ 9.6 และสถานะ ของ 6.5% (m/v)NaCl (Harrigan, 1998) แบคทีเรียเหล่านี้ได้ผ่านตรวจแบการผลิต โดยวิธีวุ้นจุดทดสอบ (Todorov, 2008) กับสมาชิกของสกุล Enterococcus แลคโตบาซิลลัส Lactococcusเช่น และ Pediococcusการแยกแบคผลิตถูกระบุ โดย API50CHLระบบ (BioMerieux มาร์ซี่-l'Etoile ฝรั่งเศส) ดีเอ็นเอของจุลินทรีย์ถูกสกัด ด้วยชุดดีเอ็นเอของ แบคทีเรีย/Fungal ZR(วิจัย Zymo เออร์ไวน์ CA, USA) และการ ประเมินผล โดยใช้การแปรสุ่ม polymorphic เทคนิค PCR ดีเอ็นเอ (อาร์เอพีดี)ด้วยไพรเมอร์ OPL-14 (GGC ACA 50 GTG T-30) และ OPL-20 (50 TGGTGG ACC A-30) (Todorov et al. 2010a) ผลิตภัณฑ์ขยายคั่น ด้วยอิเจ agarose 1.4% (m/v) และวงดนตรีรูปแบบมาวิเคราะห์โดยใช้การเปรียบเทียบเจ รุ่น 4.1 (ใช้คณิตศาสตร์ คอร์ตริจก์ เบลเยียม)ตามผลของ RAPD PCR และขนาดของโซนการยับยั้งisolate ST71KS ถูกเลือกสำหรับการศึกษาในอนาคต จุลินทรีย์พบใช้ไพรเมอร์สาย PCR (เริ่ม et al.,2001) และได้รับการยืนยันเพิ่มเติม โดยการขยายของ 16S rDNA ด้วยไพรเมอร์ F8 และ R1512 (Felske et al. 1997) ส่วนขยายได้บริสุทธิ์ (QIAquick PCR บริสุทธิ์ชุด e Qiagen, Hildenเยอรมนี), เรียงลำดับ และเมื่อเปรียบเทียบกับลำดับที่GenBank ใช้ระเบิด (พื้นฐานท้องถิ่นค้นหาเครื่องมือการจัด)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

catalase เชิงลบแท่งแกรมบวกที่ผลิตกรดถูก
ทดสอบความสามารถของพวกเขาที่จะเติบโตในนมพร่องมันเนยที่ 10 องศาเซลเซียสและ 45 องศาเซลเซียสใน
MRS น้ำซุปที่ pH 4.4 และ 9.6 และในการปรากฏตัวของ 6.5% (m / v)
โซเดียมคลอไรด์ (Harrigan, 1998) แบคทีเรียเหล่านี้ได้รับการคัดกรอง bacteriocin
ผลิตโดยวิธี agar จุดทดสอบ (Todorov 2008) กับ
สมาชิกของจำพวก Enterococcus, แลคโตบาซิลลัส, Lactococcus,
Listeria และ Pediococcus.
ไอโซเลท bacteriocin ผลิตโดยระบุ API50CHL
ระบบ (Biomerieux, Marcy- l'Etoile, ฝรั่งเศส) ดีเอ็นเอของเชื้อจุลินทรีย์
ถูกสกัดด้วย ZR เชื้อรา / แบคทีเรียชุดดีเอ็นเอ
(Zymo วิจัย Irvine, CA, USA) และต่อไปการประเมินโดยใช้
เครื่องขยายเสียงแบบสุ่มของดีเอ็นเอ polymorphic (RAPD) วิธี PCR
กับไพรเมอร์ OPL-14 (50 GTG ACA GGC T-30) และ OPL-20 (50 TGG
TGG แม็ก A-30) (Todorov et al., 2010A) ผลิตภัณฑ์ขยายถูก
แยกจากกันโดย electrophoresis 1.4% (M / V) เจล agarose และวงดนตรี
รูปแบบถูกนำมาวิเคราะห์โดยใช้เจลเปรียบเทียบรุ่น 4.1 (ประยุกต์
คณิตศาสตร์คอร์ทริก, เบลเยียม).
ขึ้นอยู่กับผลของ RAPD-PCR และขนาดของเขตการยับยั้ง ,
แยก ST71KS ได้รับเลือกสำหรับการศึกษาในอนาคต จุลินทรีย์
ที่ถูกระบุโดยใช้วิธี PCR สายพันธุ์เฉพาะไพรเมอร์ (Torriani et al.,
2001) และต่อไปรับการยืนยันจากการขยายของ 16S rDNA กับ
ไพรเมอร์และ F8 R1512 (Felske et al., 1997) ชิ้นส่วนที่ขยาย
บริสุทธิ์ (PCR QIAquick บริสุทธิ์ Kit E Qiagen, ฮิลเดน,
เยอรมนี), ลำดับและเมื่อเทียบกับลำดับที่มีอยู่ใน
GenBank ใช้ระเบิด (Basic ท้องถิ่นจัดเครื่องมือค้นหา)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สามารถลบที่ผลิตกรด 2 แท่งกรัมบวกทดสอบความสามารถของพวกเขาที่จะเติบโตในหางนมที่ 10 องศาเซลเซียส และ 45 องศาเซลเซียส ในอาหารเหลว MRS pH 4.4 และ 9.6 และในการแสดงตนของ 6.5 % ( M / V ) ของโซเดียมคลอไรด์ ( ฮาร์ริแกน , 1998 ) แบคทีเรียเหล่านี้จากแบคทีริโอซินผลิตโดยวิธีทดสอบจุด ( Todorov , 2008 ) กับสมาชิกของสกุลเอ็นเทโรค็อกคัส , Lactobacillus แลคโตค คัส , ,ลิสเตอเรีย และ 3 .การระบุ api50chl ต่อการผลิตไอโซเลทระบบ ( biomerieux marcy-l"etoile , ฝรั่งเศส ) ดีเอ็นเอของเชื้อจุลินทรีย์ถูกสกัดด้วยเชื้อรา / แบคทีเรีย ZR ชุดดีเอ็นเอ( zymo การวิจัย Irvine , CA , USA ) และเพิ่มเติม ประเมินโดยใช้แบบสุ่มของ polymorphic DNA ( RAPD ) เทคนิค PCRด้วยไพรเมอร์ opl-14 ( 50-gtg ACA ggc ลบ 30 ) และ opl-20 ( 50-tgga-30 tgg บัญชี ) ( Todorov et al . , 2010a ) การขยายผลิตภัณฑ์คือแยกโดยวิธีอิเล็กโทรโฟรีซีสใน 1.4% ( M / V ) เจล , วงดนตรีวิเคราะห์เปรียบเทียบรูปแบบการใช้เจล เวอร์ชั่น 4.1 ( ใช้คณิตศาสตร์ , Kortrijk เบลเยียม )ตามผลลัพธ์ของชื่อเรื่องและขนาดของการยับยั้งโซนแยก st71ks ถูกเลือกสำหรับการศึกษาในอนาคต จุลินทรีย์ถูกระบุโดยเฉพาะ - ขยายพันธุ์โดยใช้ไพรเมอร์ ( torriani et al . ,2544 ) และยืนยันเพิ่มเติม โดยขยายของ 16S rDNA กับไพรเมอร์ และ r1512 F8 ( Felske et al . , 1997 ) มีชิ้นส่วนของมีความบริสุทธิ์ ( qiaquick PCR การเพิ่มชุด E Hilden , ,เยอรมนี ) นี้ และเมื่อเปรียบเทียบกับลำดับของที่ขนาดการใช้ระเบิด ( เครื่องมือค้นหาการปรับพื้นฐานท้องถิ่น )