2.6. Determination of the presence

2.6. Determination of the presence of dioxin-like compounds using H4IIE-luc bioassay
Briefly, 10 g of each sediment sample was extracted using pressurized liquid extraction (PLE), using n-hexane as extraction solvent, at a temperature of 150 °C and three static cycles of 15 min. An aliquot of the extract was cleaned up on a column, filled with 10 g of 10 percent deactivated silica and 1 cm of Na2SO4 on the top. Another aliquot of the extract was purified on a multilayer column, designed to eliminate all the labile compounds, prepared as follows: 30 percent KOH silica, 5 percent neutral silica, 30 percent H2SO4 (40 percent) silica, 15 percent H2SO4 (20 percent) silica, 10 percent neutral silica and 10 percent Na2SO4. Eluates were evaporated into 50 µl in DMSO. All samples were analysed following the guidelines developed by Olsman (2005). Dose–response curves were performed for the extracts and TCDD using a sigmoidal dose–response (variable slope) curve fitting equation (GraphPad Prism® 4.0). Bio-TEQs were calculated from the dose–response curves by relating the luciferase induction potency of the samples to that of the positive reference TCDD.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.6 การกำหนดสถานะสาร dioxin เช่นใช้ bioassay ลุค H4IIE
สั้น ๆ g 10 ของแต่ละตัวอย่างตะกอนที่แยกการใช้ทางหนีของเหลวสกัด (เปิ้ล), การใช้เอ็นเฮกเซนเป็นตัวทำละลายสกัด ที่อุณหภูมิ 150 องศาเซลเซียสและวงจรคงสาม 15 นาที เป็นส่วนลงตัวของสารสกัดจากการถูกล้างคอลัมน์ เต็มไป ด้วย 10 กรัมปิด 10 เปอร์เซ็นต์ซิลิก้า และ Na2SO4 ซม. 1 ด้านบน อีกส่วนลงตัวของสารสกัดมีบริสุทธิ์บนคอลัมน์หลายชั้น ออกแบบมาเพื่อกำจัดทั้งหมด labile สารประกอบ เตรียมพร้อมดังนี้: 30 เปอร์เซ็นต์เกาะซิลิก้า 5 เปอร์เซ็นต์เป็นกลางซิลิก้า 30 เปอร์เซ็นต์กำมะถันซิลิก้า (ร้อยละ 40) 15 เปอร์เซ็นต์กำมะถัน (ร้อยละ 20) ซิลิก้า ซิลิก้ากลางร้อยละ 10 และ 10 เปอร์เซ็นต์ Na2SO4 Eluates ได้หายไปเป็น 50 µl ใน DMSO ตัวอย่างทั้งหมดมี analysed ต่อแนวทางการพัฒนา โดย Olsman (2005) ยา – ตอบเส้นโค้งได้ทำสารสกัดและ TCDD ใช้เส้นโค้ง (ความชันตัวแปร) sigmoidal ยา – ตอบเหมาะสมสมการ (ปริซึม GraphPad ® 4.0) ไบโอ TEQs ได้คำนวณจากเส้นโค้งยา – ตอบ โดยเกี่ยวกับศักยภาพการเหนี่ยวนำ luciferase ของตัวอย่างของการอ้างอิงบวก TCDD

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.6 การตรวจสอบการปรากฏตัวของสารไดออกซินเหมือนการใช้ชีวภาพ H4IIE-ลัค
สั้น ๆ 10 กรัมของตัวอย่างตะกอนแต่ละคนถูกสกัดโดยใช้การสกัดของเหลวแรงดันสูง (PLE) โดยใช้-n เฮกเซนเป็นตัวทำละลายในการสกัดที่อุณหภูมิ 150 ° C และสามคงที่ รอบ 15 นาที หารของสารสกัดได้รับการทำความสะอาดขึ้นในคอลัมน์เต็มไปด้วย 10 กรัม 10 เปอร์เซ็นต์ซิลิกาปิดการใช้งานและ 1 ซม. ของ Na2SO4 ด้านบน หารของสารสกัดบริสุทธิ์อีกในคอลัมน์หลายออกแบบมาเพื่อกำจัดสารที่ไม่คงที่เตรียมดังนี้ 30 เปอร์เซ็นต์ซิลิกา KOH, 5 เปอร์เซ็นต์ซิลิกาเป็นกลางร้อยละ 30 H2SO4 (ร้อยละ 40) ซิลิกา H2SO4 15 เปอร์เซ็นต์ (ร้อยละ 20) ซิลิการ้อยละ 10 ซิลิกาที่เป็นกลางและร้อยละ 10 Na2SO4 Eluates ถูกระเหยเป็น 50 ไมโครลิตรใน DMSO ตัวอย่างทั้งหมดถูกนำมาวิเคราะห์ต่อไปนี้แนวทางการพัฒนาโดย Olsman (2005) เส้นโค้งปริมาณการตอบสนองได้ดำเนินการในการสกัดและใช้ TCDD ปริมาณการตอบสนอง sigmoidal (ลาดตัวแปร) สมการเส้นโค้งที่เหมาะสม (GraphPad ปริซึม® 4.0) Bio-TEQs จะถูกคำนวณจากเส้นโค้งปริมาณการตอบสนองโดยการที่เกี่ยวข้องกับความแรงเหนี่ยวนำ luciferase ตัวอย่างเพื่อที่ของ TCDD อ้างอิงบวก

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.6 การกำหนดสถานะของสารประกอบไดออกซิน เช่นใช้วิธี h4iie ลุค
สั้น 10 กรัมในแต่ละตะกอนตัวอย่างที่สกัดโดยใช้ของเหลวที่มีแรงดันการสกัด ( เปิ้ล ) , ใช้บีบเป็นตัวทำละลายการสกัดที่อุณหภูมิ 150 องศา C และสามรอบคงที่ 15 นาทีเป็นส่วนลงตัวของแยกสะอาดขึ้นในคอลัมน์เต็มไปด้วย 10 กรัม ใช้ซิลิการ้อยละ 10 และ 1 ซม. na2so4 ด้านบน อีกส่วนที่หารลงตัวสารสกัดบริสุทธิ์ในคอลัมน์หลายชั้น ที่ออกแบบมาเพื่อกำจัดสารประกอบทั้งหมดที่เตรียมไว้ ดังนี้ ร้อยละ 30 เกาะซิลิการ้อยละ 5 ที่เป็นกลาง , ซิลิกา , 30 เปอร์เซ็นต์ กรดซัลฟิวริก ( ร้อยละ 40 ) ซิลิกา 15 เปอร์เซ็นต์ กรดซัลฟิวริก ( ร้อยละ 20 ) 10 เปอร์เซ็นต์ ซิลิกาซิลิกา เป็นกลาง และ 10 เปอร์เซ็นต์ na2so4 .eluates ถูกระเหยไป 50 µ L ใน DMSO . ตัวอย่างวิเคราะห์ตามแนวทางพัฒนาโดย olsman ( 2005 ) ยา–เส้นโค้งการตอบสนองสำหรับสารสกัด และ tcdd ใช้ sigmoidal dose ) การตอบสนอง ( ความชันตัวแปร ) สมการเส้นโค้ง ( graphpad ปริซึม® 4.0 )ไบโอ teqs คำนวณจากปริมาณและการตอบสนองเส้นโค้งโดยสัมพันธ์กับลูซิเฟอเรสและศักยภาพของตัวอย่างของ tcdd
การอ้างอิงในเชิงบวก