Materials and MethodsThe study was

Materials and Methods
The study was conducted at plant tissue culture laboratory of Jimma
University College of Agriculture and Veterinary Medicine, Ethiopia.
Two sugarcane varieties, B41-227 and N14, were used in this study.
These varieties were collected from Metahara and Wonji-Shoa sugar
estate seedcane nurseries of the Ethiopian Sugar Corporation. The
stock plants were planted after hot water treatment (52°C for 2 hours)
and grown under greenhouse conditions for two to three months.
Then, preparation of explants was carried out according to the standard
procedure of [12,29] with some modifications. Shoot tops were cut
from actively growing sugarcane plants grown in the greenhouse. The
leaves were removed and the shoot tops were taken to the laboratory. In
the laboratory, surrounding leaf sheaths were removed carefully one by
one until the inner white sheaths were exposed. Then, 10 cm long tops
were collected by cutting off at the two ends, locating the growing point
somewhere in the middle. The shoot tops were washed under running
tap water for one minute with soap solution and treated with 0.3%
Kocide (fungicide solution) for one and half an hour under laminar air
flow cabinet. After decanting Kocide solution, shoot tops were washed
three times with sterile distilled water and further immersed in 70%
ethanol for one minute and rinsed three times each for five minute
with sterile distilled water. Finally, the explants treated with 10% (v/v)
Sodium hypochlorite solution (4% w/v active chlorine) for 20 minutes.
After discarding the sodium hypochlorite solution, the explants were
washed with sterile distilled water three times each for five minutes.
The surface sterilized explants were excised and sized to 1 cm long and
0.5 cm diameter and cultured on initiation media. The initiated aseptic
cultures were used to set up the multiplication experiment. Murashige
and Skoog (1962), (MS) media, in full strength was used with different
concentrations and combinations of 6-benzylaminopurine (BAP) and
Indole-3-acetic acid (IAA). The medium contained 30 g/l sucrose as
a carbon source and the pH was adjusted to 5.8 before gelling with 8
g/l agar and autoclaved at 121°C and 15 psi for 20 minutes. Molten
medium of 40 ml was dispensed per each culture jar.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัสดุและวิธีการศึกษาได้ดำเนินการที่ห้องปฏิบัติการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อพืชของจิมม่ามหาวิทยาลัยวิทยาลัยเกษตรและสัตวแพทยศาสตร์เอธิโอเปีย. สองพันธุ์อ้อย B41-227 N14 และถูกนำมาใช้ในการศึกษานี้. พันธุ์เหล่านี้ถูกเก็บรวบรวมจาก Metahara และ Wonji-Shoa น้ำตาลอสังหาริมทรัพย์เซอรี่seedcane ของบรรษัทเอธิโอเปียน้ำตาล หุ้นถูกนำมาปลูกพืชหลังการรักษาน้ำร้อน (52 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 2 ชั่วโมง) และที่ปลูกภายใต้สภาพเรือนกระจกสำหรับสองถึงสามเดือน. จากนั้นเตรียมความพร้อมของชิ้นส่วนได้รับการดำเนินการตามมาตรฐานขั้นตอนของการ [12,29] มีการปรับเปลี่ยนบางอย่าง . ยิงท็อปส์ซูถูกตัดจากการแข็งขันการปลูกพืชอ้อยที่ปลูกในเรือนกระจก ใบถูกถอดออกและท็อปส์ซูยิงถูกนำไปยังห้องปฏิบัติการ ในห้องปฏิบัติการกาบใบโดยรอบถูกลบออกอย่างระมัดระวังหนึ่งโดยหนึ่งจนกว่าฝักสีขาวด้านในได้สัมผัส จากนั้น 10 ซม. ยาวท็อปส์ซูที่ถูกเก็บรวบรวมโดยการตัดที่ปลายทั้งสองข้างตั้งจุดการเจริญเติบโตบางกลาง ท็อปส์ซูยิงถูกล้างภายใต้การทำงานของน้ำประปาเป็นเวลาหนึ่งนาทีกับการแก้ปัญหาสบู่และรับการรักษาด้วย 0.3% Kocide (สารละลายเชื้อรา) สำหรับหนึ่งและครึ่งชั่วโมงภายใต้อากาศราบเรียบตู้ไหล หลังจาก decanting แก้ปัญหา Kocide, ท็อปส์ซูยิงถูกล้างสามครั้งด้วยน้ำกลั่นผ่านการฆ่าเชื้อและแช่อยู่ต่อไปใน70% เอทานอลเป็นเวลาหนึ่งนาทีและล้างสามครั้งในแต่ละห้านาทีด้วยน้ำกลั่นผ่านการฆ่าเชื้อ ในที่สุดชิ้นส่วนที่ได้รับ 10% (v / v) การแก้ปัญหาโซเดียมไฮโปคลอไรต์ (4% w / v คลอรีนที่ใช้งาน) เป็นเวลา 20 นาที. หลังจากที่ทิ้งการแก้ปัญหาโซเดียมไฮโปคลอไรต์ที่ชิ้นได้รับการล้างด้วยน้ำกลั่นปลอดเชื้อสามครั้งในแต่ละห้านาที. พื้นผิวที่ผ่านการฆ่าเชื้อชิ้นถูกตัดและขนาด 1 ซม. ยาวและมีขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง0.5 ซม. และเพาะเลี้ยงบนสื่อการเริ่มต้น ปลอดเชื้อริเริ่มวัฒนธรรมที่ถูกนำมาใช้ในการตั้งค่าการทดสอบการคูณ อาหารสูตร Murashige และ Skoog (1962), (MS) สื่อในความแข็งแรงเต็มรูปแบบถูกนำมาใช้ที่แตกต่างกันมีความเข้มข้นและการรวมกันของ6-benzylaminopurine (BAP) และกรดIndole-3-อะซิติก (IAA) สื่อที่มีอยู่ 30 กรัม / ลิตรน้ำตาลซูโครสเป็นแหล่งคาร์บอนและค่าpH ปรับ 5.8 ก่อนที่จะก่อเจลที่มี 8 g / l วุ้นและเบาที่ 121 ° C และ 15 ปอนด์ต่อตารางนิ้วเป็นเวลา 20 นาที Molten กลาง 40 มล. ได้รับการจ่ายต่อขวดแต่ละวัฒนธรรม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัสดุและวิธีการ
ศึกษาในการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อพืช ห้องปฏิบัติการของมหาวิทยาลัยจิมมา
วิทยาลัยเกษตรและสัตวแพทย์ , เอธิโอเปีย .
2 อ้อยพันธุ์และ b41-227 N14 ถูกใช้ในการศึกษา .
พันธุ์เหล่านี้รวบรวมจาก metahara shoa
สถานรับเลี้ยงเด็ก seedcane อสังหาริมทรัพย์และน้ำตาลของบริษัทน้ำตาล wonji เอธิโอเปีย
หุ้นพืชปลูกหลังการรักษาน้ำร้อน ( ชั่วโมง 52 ° C 2 )
และเติบโตภายใต้สภาวะเรือนกระจกเป็นเวลาสองถึงสามเดือน .
แล้ว การเตรียมอาหารได้ดำเนินการตามขั้นตอนมาตรฐาน
[ 12,29 ] กับการปรับเปลี่ยน ยิงตัวที่ถูกตัด
จากงานปลูกอ้อยปลูกในเรือนกระจก
ใบออกและยิงตัวถูกนำส่งห้องปฏิบัติการ ใน
ปฏิบัติการ , หุ้มรอบใบออกอย่างระมัดระวังโดย
หนึ่งจนกว่าสีขาวด้านในหุ้มถูกเปิดเผย แล้ว 10 ซม. ตัว
ครั้งนี้ตัดที่ปลายทั้งสอง หาใช่การเติบโตจุด
ที่ใดที่หนึ่งในกลาง ยิงตัวถูกล้างภายใต้การวิ่ง
น้ำประปาเป็นเวลา 1 นาทีด้วยสบู่และโซลูชั่นรักษาด้วย 0.3 %
kocide ( สารเคมีแก้ ) สำหรับหนึ่งและครึ่งชั่วโมงภายใต้ตู้ laminar ไหลอากาศ

หลังจากที่ริน kocide โซลูชันยิงตัวถูกล้างด้วยน้ำกลั่นฆ่าเชื้อ
3 ครั้งและยังแช่ในแอลกอฮอล์ 70 %
เป็นเวลาหนึ่งนาทีและล้างครั้งละห้านาที หมัน
ด้วยน้ำกลั่น ในที่สุดเนื้อเยื่อที่ได้รับ 10 เปอร์เซ็นต์ ( v / v )
สารละลายโซเดียมไฮโปคลอไรต์ ( 4 % W / V คลอรีนที่ใช้งาน 20 นาที
หลังจากทิ้งโซเดียมไฮโซลูชั่น , เนื้อเยื่อที่ถูกล้างด้วยน้ำกลั่นฆ่าเชื้อ
3 ครั้งละห้านาที
ถูกตัดและเติมสารฆ่าเชื้อที่ผิวขนาด 1 ซม.
0.5 ซม. ยาวและเพาะเลี้ยงในการสื่อ การริเริ่ม
.วัฒนธรรมที่เคยตั้ง คูณผล
อาหารสูตร Murashige และ Skoog ( 1962 ) , ( MS ) , สื่อในความแข็งแรงเต็มใช้ที่มีความเข้มข้นแตกต่างกัน
และชุดของ 6-benzylaminopurine ( BAP ) และ
กรดกระเพาะ ( IAA ) บรรจุ 30 g / l ( ซูโครสเป็นแหล่งคาร์บอน
และปรับ pH 5.8 ก่อน gelling 8
กรัม / ลิตรและ 121 ° C ในอาหารสังเคราะห์และ 15 ปอนด์ต่อตารางนิ้ว เป็นเวลา 20 นาที กลางหล่อ
40 ml พบ dispensed ต่อวัฒนธรรมแต่ละขวด