, which will permeabilize some cell

, which will permeabilize some cells--not what you want if you intend to stain for cell-surface antigens. If you are staining for intracellular antigens, how you permeabilize AFTER fixation can also dramatically affect your results. Detergents tend to discriminate against cytoskeletal elements but allow better access of antibodies to the nucleus; post-fixation with -20 methanol (after PFA) allows better retention of cytoskeletal elements but removed lipid-anchored proteins. It's actually pretty complicated-- you can download a detailed protocol and notes from

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ซึ่งจะ permeabilize บางเซลล์ - สิ่งที่คุณต้องหากต้องการย้อมสำหรับแอนติเจนพื้นผิวเซลล์ ถ้าคุณมีย้อมสีสำหรับภายในเซลล์แอนติเจน วิธีคุณ permeabilize หลังจากตรึงสามารถมากยังกระทบผลลัพธ์ของคุณ ผงซักฟอกมักจะ แบ่งแยกองค์ประกอบ cytoskeletal แต่อนุญาตให้เข้าถึงที่ดีกว่าของแอนตี้กับนิวเคลียส หลังตรึงกับเมทานอล-20 (หลัง PFA) ช่วยให้การเก็บรักษาองค์ประกอบ cytoskeletal แต่เอายึดไขมันโปรตีน มันสวยจริงซับซ้อน-คุณสามารถดาวน์โหลดโพรโทคอลรายละเอียดและบันทึกย่อจาก

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ซึ่งจะ permeabilize เซลล์บางส่วน - ไม่ใช่สิ่งที่คุณต้องการถ้าคุณตั้งใจจะเปื้อนสำหรับแอนติเจนบนผิวเซลล์ หากคุณกำลังย้อมสีสำหรับแอนติเจนในเซลล์วิธีการที่คุณ permeabilize หลังจากตรึงอย่างมากนอกจากนี้ยังสามารถส่งผลกระทบต่อผลลัพธ์ของคุณ ผงซักฟอกมีแนวโน้มที่จะแตกต่างกับองค์ประกอบ cytoskeletal แต่อนุญาตให้เข้าถึงที่ดีขึ้นของแอนติบอดีเพื่อนิวเคลียส; โพสต์ตรึงด้วย -20 เมทานอล (หลังจาก PFA) ช่วยให้การเก็บรักษาที่ดีขึ้นขององค์ประกอบ cytoskeletal แต่เอาออกโปรตีนไขมันทอดสมอ มันจริงสวย complicated-- คุณสามารถดาวน์โหลดโปรโตคอลรายละเอียดและบันทึกจาก