Fumigation and ExtractionImportant

Fumigation and Extraction
Important if measuring microbial biomass carbon: before doing CFDE, remove the
ethanol from the chloroform by running 500 ml over 25 g of basic grade 1 alumina in a
syringe or column. (or purchase ethanol-free chloroform).
1. For each sample, you will require 3 subsamples:
-one subsample for determining gravimetric soil moisture (48 hours @ 100°C)
-one non-fumigated sample (10 g oven-dry equivalent) for immediate extraction with 0.5
M K2SO4.
-one fumigated sample (10 g oven-dry equivalent).
2. Place non-fumigated subsample in a specimen cup (e.g., Fisher 14-375-148) with 50
ml 0.5 M K2SO4. Place on shaker for 1 hour. After shaking, filter through pre-leached
(with 0.5 M K2SO4) Whatman No. 1 filter paper. Freeze extract to store.
3. Place samples to be fumigated in 50 ml glass beakers. Mark beakers with pencil, as
sharpee will run in chloroform. Put the beakers with soil into a vacuum dessicator.
Beakers can be stacked in the dessicator by layering with a vented plate.
4. Place a 50-ml beaker or scintillation vial containing boiling chips and 20 ml of
chloroform in the dessicator.
5. Evacuate until chloroform boils. Vent.
6. Repeat (5) three more times, not venting the last time. (you may have to replace the
boiling chips each time to get the chloroform to boil).
Allison Lab Protocol: Microbial Biomass by Fumigation, 1/2008, Steve Allison
7. Let sit in the dark for 3 days (darkness prevents the chloroform from breaking down;
you can cover the dessicator with a garbage bag).
8. Release the vacuum and remove the chloroform.
9. Draw a vacuum and release to remove excess chloroform. Repeat 5-10 times. To
ensure that you've vented all the chloroform, you may want to do the famous "sniff test"
invented by Eldor Paul (it's probably not that good for your health).
10. Extract the sample in 50 ml K2SO4. Shake for 1 hour. Filter through pre-leached
(with 0.5 M K2SO4) Whatman No. 1 filter paper. Freeze extract to store.
For Microbial Biomass Carbon:
1. Determine total dissolved carbon on a TIC/TOC analyzer. The difference between C in
the fumigated and non-fumigated samples is the chloroform-labile C pool (EC), and is
proportional to microbial biomass C (C):
C=EC/kEC
where kEC is soil-specific, but is often estimated as 0.45 (Beck et al. 1997).
For Microbial Biomass Nitrogen:
1. Digest 20 ml of extract using Kjeldahl digestion. Run digest on autoanlyzer for total N.
The difference between N in the fumigated and non-fumigated samples is the chloroformlabile
N pool, and is proportional to microbial biomass N (N):
N=EN/kEN
where kEN is soil-specific, but is often estimated as 0.54 (Brookes et al. 1985).
Allison Lab Protocol: Microbial Biomass by Fumigation, 1/2008, Steve Allison
Kjeldahl Digests: Vitousek Lab method for acid digests by Doug Turner
Digest solution for a rack of 40;
190ml Sulfuric Acid
100g Potassium Sulfate
20g Cupric Sulfate (5H2O)
Note: Digest solution formulated specifically to run on the Vitousek Lab Alpkem.
Please wear a lab coat, gloves and eye protection.
Start the technicon block heating up (manual button and set on 410°C), it takes 2 hours. If
you are digesting solutions, start the block at 210°C.
Place 500ml Erlenmeyer flask on hot plate with a stir magnet.
Using the 250ml graduated cylinder (usually found on the drying rack) measure and pour
sulfuric acid into the Erlenmeyer flask. Turn the heat knob to about 4 and mix at slow to
medium speed. Rinse the graduated cylinder several times with DI water and replace on
the drying rack.
Using a weigh boat, measure out the potassium sulfate. With a powder funnel, slowly
add it to the flask. Likewise, measure out and add the cupric sulfate. Let the digest
solution stir while you weigh out your samples. It will have a pale blue and milky
appearance.
Take off gloves at this point (static interferes with weighing the samples).
Put digest tubes on cardboard next to the balance. Be careful with digest tubes- they are
fragile! Tubes can crack or chip very easily. Sample material should be oven dried and
held in a dessicator or redried prior to digestion. For leaf tissue use 50 mg. ground to 20
mesh or finer (you can use less if you know your samples have a high N or P content).
For soil use 150 mg [if organic use less]. When digesting solutions, you can use up to
20ml. Each rack of 40 samples should have at least 2 tubes for standards (see pine
recoveries).
Put gloves on.
Next, add 1 or 2 boiling chips (Hengar Granules) to each tube.
Under the fume hood, dispense 5 ml of digest solution (still stirring) into each tube. Once
they are all filled they go on the block for 30 seconds. After 30 seconds lift rack off the
block and let the tubes cool down (about 5 minutes).
While the tubes are cooling, get the 5ml pipet out and get the Hydrogen peroxide out of
the refrigerator.
Allison Lab Protocol: Microbial Biomass by Fumigation, 1/2008, Steve Allison
Add 1 ml H2O2 to each tube and mix (you can mix by hand or with the vortex mixer on
lo

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ควัญและสกัดสิ่งสำคัญถ้าวัดคาร์บอนชีวมวลจุลินทรีย์: ก่อนทำ CFDE เอาการเอทานอลจากคลอโรฟอร์มโดยใช้ 500 มล.พื้นฐานกว่า 25 กรัมเกรด 1 อะลูมินาในการเข็มหรือคอลัมน์ (หรือซื้อฟรีเอทานอลคลอโรฟอร์ม)1. สำหรับตัวอย่างแต่ละ คุณจะต้อง 3 subsamples:-subsample หนึ่งสำหรับกำหนดความชื้นดินแบบกราวิเมตริก (48 ชั่วโมงแอท 100° C)-หนึ่งรับรองไม่ใช่ตัวอย่าง (เทียบเท่าเตาอบแห้ง 10 กรัม) ดูดทันที 0.5M K2SO4-อย่างปรู๊ฟหนึ่ง (เทียบเท่าเตาอบแห้ง 10 กรัม)2. ไม่ใช่ผลเพล subsample ถ้วยตัวอย่าง (เช่น Fisher 14-375-148) กับ 50ml 0.5 M K2SO4 วางบนปั่น 1 ชั่วโมง หลังจากเขย่า กรองผ่านก่อน leached(ด้วย 0.5 M K2SO4) กระดาษกรอง Whatman เลข 1 หยุดแยกเก็บ3. ทำตัวอย่างที่มีผลในบีกเกอร์แก้วขนาด 50 มล. บีกเกอร์ทำเครื่องหมาย ด้วยดินสอ เป็นsharpee จะทำงานในคลอโรฟอร์ม ใส่บีกเกอร์ ด้วยดิน dessicator สูญญากาศบีกเกอร์สามารถกองซ้อนใน dessicator ที่ตามอันมีเพลทกรดกลาย4. วางบีกเกอร์ 50 ml หรือขวด scintillation เดือดชิและ 20 มล.คลอโรฟอร์มในการ dessicator5. อพยพจนเดือดคลอโรฟอร์ม ระบาย6. ซ้ำ (5) สามครั้ง ไม่ระบายครั้ง (คุณอาจต้องการแทนเดือดชิแต่ละครั้งจะได้รับคลอโรฟอร์มต้ม) โพรโทคอลแล็บแอลลิสัน: ชีวมวลจุลินทรีย์ โดยควัญ 1 2008 แอลลิสัน Steve7. ให้นั่งในมืด 3 วัน (มืดป้องกันคลอโรฟอร์มลงคุณสามารถครอบคลุม dessicator ถุงขยะ)8. ปล่อยเครื่องดูดฝุ่น และเอาในคลอโรฟอร์ม9. ดึงดูดและปล่อยเมื่อต้องการเอาส่วนเกินคลอโรฟอร์ม ทำซ้ำ 5 - 10 ครั้ง ถึงให้แน่ใจว่า คุณได้ระบายอากาศทั้งหมดคลอโรฟอร์ม คุณอาจต้องการทำที่มีชื่อเสียง "สูดอากาศทดสอบ"คิดค้น โดย Paul Eldor (ไม่คงที่ดีต่อสุขภาพ)10. แยกตัวอย่างในขนาด 50 มล. K2SO4 สั่น 1 ชั่วโมง กรองผ่านก่อน leached(ด้วย 0.5 M K2SO4) กระดาษกรอง Whatman เลข 1 หยุดแยกเก็บสำหรับคาร์บอนชีวมวลจุลินทรีย์:1. กำหนดคาร์บอนละลายน้ำทั้งหมดบนวิเคราะห์ TIC/TOC ความแตกต่างระหว่าง C ในตัว อย่างที่ไม่ใช่ผลการปรู๊ฟสระ C labile คลอโรฟอร์ม (EC), และสัดส่วนกับชีวมวลจุลินทรีย์ C (C):C = EC/kECที่ kEC ดินเฉพาะ แต่มักจะประเมินเป็น 0.45 (เบ็ค et al. 1997)สำหรับชีวมวลจุลินทรีย์ไนโตรเจน:1. แยกย่อย 20 ml ของสารสกัดที่ใช้ย่อยอาหารเจลดาห์ลเมื่อต้อง เรียกใช้ย่อย autoanlyzer สำหรับ N. รวมความแตกต่างระหว่าง N ในตัวอย่างปรู๊ฟ และ ผลไม่ใช่เป็นการ chloroformlabileสระว่ายน้ำ N และเป็นสัดส่วนกับชีวมวลจุลินทรีย์ N (N):N = EN/เคนที่เคนมีเฉพาะดิน แต่มักจะประเมินเป็น 0.54 (Brookes et al. 1985)โพรโทคอลแล็บแอลลิสัน: ชีวมวลจุลินทรีย์ โดยควัญ 1 2008 แอลลิสัน Steveเจลดาห์ลเมื่อต้อง Digests: วิธี Vitousek Lab สำหรับกรดที่ย่อยสลาย โดย Doug Turnerแก้ปัญหาย่อยสำหรับชั้น 40กรดซัลฟูริก 190ml100 กรัมโพแทสเซียมซัลเฟต20 กรัม Cupric ซัลเฟต (5H2O) หมายเหตุ: แก้ปัญหาย่อยโดยเฉพาะเพื่อเรียกใช้บน Vitousek Lab Alpkemกรุณาสวมเสื้อนอกห้องปฏิบัติการ ถุงมือ และถนอมสายตาเริ่มบล็อก technicon ร้อนขึ้น (ปุ่มแมนนวลและตั้งค่า 410° C), ใช้เวลา 2 ชั่วโมง ถ้าคุณกำลังฝึกแก้ปัญหา เริ่มต้นบล็อกที่ 210 องศาเซลเซียสวาง 500 มล.ขวด Erlenmeyer บนจานร้อนด้วยแม่เหล็กกวนใช้ขนาด 250 มล.จบวัดทรงกระบอก (มักจะอยู่ที่ราวตากผ้า) และเทกรดซัลฟูริกลงในกระติก Erlenmeyer หมุนปุ่มความร้อนประมาณ 4 และผสมที่ช้าไปความเร็วปานกลาง ล้างกระบอกตวงหลายครั้งกับน้ำ DI และแทนที่บนราวตากผ้าใช้เรือที่ชั่งน้ำหนัก วัดออกซัลเฟตโพแทสเซียม มีปล่องผง ช้าเพิ่มความหนาว ทำนองเดียวกัน วัดออก และเพิ่มซัลเฟต cupric ให้การแยกย่อยแก้ปัญหาคนในขณะที่คุณมีน้ำหนักออกจากตัวอย่างของคุณ จะมีซีดสีน้ำเงิน และขาวลักษณะที่ปรากฏถอดถุงมือที่จุดนี้ (คงรบกวนการชั่งน้ำหนักตัวอย่าง)ใส่หลอดย่อยบนกระดาษแข็งถัดจากยอดดุล ระมัดระวังกับแยกย่อยหลอด-มีเปราะบาง หลอดสามารถแตก หรือชิได้อย่างง่ายดาย ตัวอย่างวัสดุจะเตาอบแห้ง และจัดใน dessicator หรือ redried ก่อนการย่อยอาหาร สำหรับเนื้อเยื่อใบใช้ 50 mg. ดิน 20ตาข่าย หรือละเอียดขึ้น (คุณสามารถใช้น้อยถ้าคุณทราบว่า ตัวอย่างมีปริมาณ N หรือ P สูง)สำหรับดินที่ใช้ 150 มิลลิกรัม [ถ้าอินทรีย์ ใช้น้อย] เมื่อฝึกแก้ไขปัญหา คุณสามารถใช้การ20ml ชั้นละ 40 ตัวอย่างควรมีหลอดน้อย 2 มาตรฐาน (ดูสนฟื้นตัว)สวมถุงมือถัดไป เพิ่ม 1 หรือ 2 เดือดชิ (Hengar เม็ด) แต่ละหลอดใต้ควัน แจกจ่ายโซลูชันย่อย (ยังคงกวน) 5 มล.ลงในหลอด ครั้งพวกเขาจะป้อนทั้งหมดพวกเขาไปในช่วง 30 วินาที หลังจาก 30 วินาทียกชั้นปิดบล็อกและให้หลอดเย็นลง (ประมาณ 5 นาที)ในขณะที่หลอดความเย็น รับว่า 5 มล.ออก และไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ที่ได้รับในตู้เย็น โพรโทคอลแล็บแอลลิสัน: ชีวมวลจุลินทรีย์ โดยควัญ 1 2008 แอลลิสัน Steveเพิ่ม 1 มล. H2O2 หลอดและผสม (คุณสามารถผสมด้วยมือ หรือผสมวนในแต่ละหล่อ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

รมควันและการสกัด
สำคัญหากวัดคาร์บอนชีวมวลจุลินทรีย์: ก่อนที่จะทำ CFDE เอา
เอทานอลจากคลอโรฟอร์มโดยใช้ 500 มลกว่า 25 กรัมขั้นพื้นฐานชั้นประถมศึกษาปีที่ 1 อลูมินาใน
เข็มฉีดยาหรือคอลัมน์ (หรือซื้อเอทานอลคลอโรฟอร์ม-Free).
1 สำหรับแต่ละตัวอย่างคุณจะต้อง 3 subsamples:
subsample -One สำหรับการกำหนดความชื้น gravimetric ดิน (48 ชั่วโมง @ 100 ° C)
-One ไม่ใช่รมตัวอย่าง (เตาอบแห้ง 10 กรัมเทียบเท่า) สำหรับการสกัดทันทีที่มี 0.5
M K2SO4.
-One ตัวอย่างรมยา (เตาอบแห้ง 10 กรัมเทียบเท่า).
2 สถานที่ที่ไม่ใช่รม subsample ในถ้วยตัวอย่าง (เช่นฟิชเชอร์ 14-375-148) 50
มล. 0.5 M K2SO4 วางบนเครื่องเขย่าเป็นเวลา 1 ชั่วโมง หลังจากเขย่ากรองผ่านก่อนชะล้าง-
(0.5 M K2SO4) Whatman ฉบับที่ 1 กระดาษกรอง ตรึงสารสกัดในการจัดเก็บ.
3 ตัวอย่างสถานที่ที่จะได้รับการรมยาใน 50 มล. บีกเกอร์แก้ว มาร์คบีกเกอร์ด้วยดินสอเป็น
sharpee จะทำงานในคลอโรฟอร์ม ใส่บีกเกอร์ที่มีดินเป็นสูญญากาศ dessicator.
Beakers สามารถซ้อนกันใน dessicator โดย layering กับแผ่นระบาย.
4 วางบีกเกอร์ขนาด 50 มล. หรือประกายขวดที่มีชิปเดือดและ 20 มล. ของ
คลอโรฟอร์มใน dessicator ได้.
5 อพยพจนเดือดคลอโรฟอร์ม Vent.
6 ซ้ำ (5) อีกสามครั้งไม่ได้ระบายออกครั้งสุดท้าย (คุณอาจต้องเปลี่ยน
ชิปเดือดในแต่ละครั้งจะได้รับคลอโรฟอร์มให้เดือด).
แอลลิสัน Lab โปรโตคอล: ชีวมวลจุลินทรีย์โดยการรมควัน, 1/2008, สตีฟแอลลิสัน
7 ให้นั่งอยู่ในที่มืดเป็นเวลา 3 วัน (มืดป้องกันไม่ให้คลอโรฟอร์มจากการทำลายลง;
คุณสามารถครอบคลุม dessicator ด้วยถุงขยะ).
8 ปล่อยสูญญากาศและลบคลอโรฟอร์ม.
9 วาดสูญญากาศและปล่อยเพื่อลบส่วนเกินคลอโรฟอร์ม ทำซ้ำ 5-10 ครั้ง เพื่อ
ให้แน่ใจว่าคุณได้ระบายทั้งหมดคลอโรฟอร์มคุณอาจต้องการที่จะทำที่มีชื่อเสียง "ทดสอบสูดอากาศ"
คิดค้นโดย Eldor พอล (มันอาจจะไม่ดีต่อสุขภาพของคุณ).
10 สารสกัดจากตัวอย่างใน 50 มล K2SO4 เขย่าเป็นเวลา 1 ชั่วโมง กรองผ่านก่อนชะล้าง-
(0.5 M K2SO4) Whatman ฉบับที่ 1 กระดาษกรอง ตรึงสารสกัดในการจัดเก็บ.
สำหรับจุลินทรีย์ชีวมวลคาร์บอน:
1 ตรวจสอบคาร์บอนไดออกไซด์ที่ละลายทั้งหมดบน TIC วิเคราะห์ / TOC ความแตกต่างระหว่างซีใน
ตัวอย่างรมยาและไม่ใช่รมยาเป็นสระว่ายน้ำ C คลอโรฟอร์ม labile (EC) และเป็น
สัดส่วนกับจุลินทรีย์ชีวมวล C (C):
c = EC / KEC
ที่ KEC เป็นดินที่เฉพาะเจาะจง แต่มักจะอยู่ที่ประมาณ . เป็น 0.45 (. เบ็ค et al, 1997)
สำหรับชีวมวลจุลินทรีย์ไนโตรเจน:
1 Digest 20 มล. ของสารสกัดโดยใช้ Kjeldahl การย่อยอาหาร เรียกใช้ย่อยใน autoanlyzer สำหรับ N. รวม
ความแตกต่างระหว่าง N ในตัวอย่างรมยาและไม่ใช่รมยาเป็น chloroformlabile
สระว่ายน้ำ N, และเป็นสัดส่วนกับจุลินทรีย์ชีวมวล N (N):
N = th / เคน
ที่เคนเป็นดินเฉพาะ แต่ มักจะเป็นประมาณ 0.54 (บรูกส์ et al, 1985)..
แอลลิสัน Lab โปรโตคอล: จุลินทรีย์ชีวมวลโดยการรมควัน, 1/2008, สตีฟแอลลิสัน
Kjeldahl สำคัญ: วิธี Vitousek แล็บสำหรับย่อยสลายกรดโดยดั๊กเทอร์เนอ
แก้ปัญหา Digest สำหรับชั้น 40;
190ml ซัลฟูริก กรด
100 กรัมโพแทสเซียมซัลเฟต
20g Cupric ซัลเฟต (5H2O)
. หมายเหตุ: การแก้ปัญหา Digest สูตรเฉพาะที่จะทำงานบน Vitousek Lab Alpkem
โปรดสวมเสื้อห้องแล็บ, ถุงมือและอุปกรณ์ป้องกันดวงตา.
เริ่มบล็อก Technicon ร้อนขึ้น (ปุ่มคู่มือและตั้งอยู่บน 410 ° C ) ก็จะใช้เวลา 2 ชั่วโมง หาก
คุณกำลังย่อยโซลูชั่นเริ่มต้นบล็อกที่ 210 องศาเซลเซียส.
วางขวด Erlenmeyer 500ml บนจานร้อนกับแม่เหล็กปั่นป่วน.
ใช้ 250ml จบกระบอก (โดยปกติจะพบในชั้นอบแห้ง) วัดและเท
กรดกำมะถันลงไปในขวด Erlenmeyer หมุนปุ่มความร้อนที่ประมาณ 4 และผสมที่ช้า
ความเร็วปานกลาง ล้างถังจบการศึกษาหลายครั้งด้วยน้ำ DI และแทนที่บน
ชั้นอบแห้ง.
ใช้เรือชั่งน้ำหนักวัดออกโพแทสเซียมซัลเฟต พร้อมช่องทางผงช้า
เพิ่มเข้าไปในขวด ในทำนองเดียวกันวัดออกและเพิ่มซัลเฟต Cupric ให้ Digest
วิธีการแก้ปัญหาความปั่นป่วนในขณะที่คุณชั่งตัวอย่างของคุณ ก็จะมีสีฟ้าและสีขาวขุ่นซีด
ลักษณะ.
ถอดถุงมือที่จุดนี้ (รบกวนคงที่ที่มีการชั่งน้ำหนักตัวอย่าง).
ใส่ท่อย่อยลงบนกระดาษแข็งติดกับความสมดุล ระมัดระวังกับการย่อย tubes- พวกเขามีความ
เปราะบาง! ท่อสามารถร้าวหรือชิปได้อย่างง่ายดายมาก วัสดุตัวอย่างควรจะแห้งเตาอบและ
จัดขึ้นใน dessicator หรือ redried ก่อนที่จะมีการย่อยอาหาร สำหรับเนื้อเยื่อใบใช้ 50 มก พื้นดินถึง 20
ตาข่ายหรือปลีกย่อย (คุณสามารถใช้น้อยถ้าคุณรู้ว่าตัวอย่างของคุณมี N หรือ P เนื้อหาสูง).
ดินใช้ 150 มิลลิกรัม [ถ้าใช้อินทรีย์น้อย] เมื่อย่อยโซลูชันคุณสามารถใช้งานได้ถึง
20ml ชั้น 40 ตัวอย่างแต่ละคนควรมีอย่างน้อย 2 หลอดสำหรับมาตรฐาน (ดูสน
กลับคืน).
ใส่ถุงมือ.
ถัดไปเพิ่ม 1 หรือ 2 ชิปเดือด (Hengar เม็ด) แต่ละหลอด.
ภายใต้ตู้ดูดควันที่จ่าย 5 มล. ของการแก้ปัญหาย่อย (ยังคงกวน) ในแต่ละหลอด เมื่อ
พวกเขาทั้งหมดที่เต็มไปด้วยพวกเขาไปในบล็อกเป็นเวลา 30 วินาที หลังจาก 30 วินาทียกชั้นปิด
บล็อกและปล่อยให้ท่อเย็นลง (ประมาณ 5 นาที).
ในขณะที่ท่อที่มีการระบายความร้อนได้รับการปิเปต 5ml ออกและได้รับไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ออกจาก
ตู้เย็น.
แอลลิสัน Lab โปรโตคอล: จุลินทรีย์ชีวมวลโดยการรมควัน, 1/2008 สตีฟแอลลิสัน
เพิ่ม 1 มิลลิลิตร H2O2 แต่ละหลอดและผสม (คุณสามารถผสมด้วยมือหรือเครื่องผสมน้ำวนบน
ทองหล่อ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

รมและการสกัดที่สำคัญ ถ้าวัดคาร์บอนจุลินทรีย์ : ก่อนทำ cfde เอาเอทานอลจากคลอโรฟอร์ม โดยการใช้น้ำ 500 มล. กว่า 25 กรัม พื้นฐาน ป. 1 อะลูมินาในเสา เข็ม หรือ ( หรือซื้อเอทานอล ( ฟรี )1 . สำหรับแต่ละตัวอย่าง คุณจะต้องมี 3 subsamples :- subsample ตรวจหาความชื้นในดินด้วย ( 48 ชั่วโมง @ 100 ° C )- ไม่พ่นยาตัวอย่าง ( 10 กรัม แห้งเทียบเท่า ) สำหรับการสกัดทันที 0.5M k2so4 .- ไม่ว่า ตัวอย่าง ( 10 กรัม แห้งเทียบเท่า )2 . ที่ไม่พ่นยา subsample ในถ้วยตัวอย่าง ( เช่น ฟิชเชอร์ 14-375-148 ) 50มล 0.5 m k2so4 . สถานที่ในเครื่องปั่นสำหรับ 1 ชั่วโมง หลังจากที่เขย่ากรองผ่านชะก่อน( 0.5 M k2so4 ) whatman 1 ไส้กรองกระดาษ แช่แข็งจากร้าน3 . ตัวอย่างสถานที่ถูกรมยาใน 50 มล แก้วถ้วย . มาร์คบีกเกอร์ด้วยดินสอเป็นsharpee จะวิ่งในคลอโรฟอร์ม ใส่บีกเกอร์กับดินเข้าไปในสูญญากาศเดสิ กเคเตอร์ .บีกเกอร์สามารถเรียงซ้อนในเดสิ กเคเตอร์โดย layering ด้วยระบายจาน4 . สถานที่ 50 ml ขวดบีกเกอร์หรือข้อมูลที่มีการต้มชิปและ 20 มิลลิลิตรคลอโรฟอร์มในเดสิ กเคเตอร์ .5 . อพยพจนเดือดคลอโรฟอร์ม ระบาย6 . ( 5 ) ซ้ำอีกสามครั้ง ไม่ระบายครั้งสุดท้าย ( คุณอาจจะต้องแทนที่ต้มชิปแต่ละครั้งจะได้รับคลอโรฟอร์มเดือด )อัลลิสัน Lab โพรโทคอล : มวลชีวภาพจุลินทรีย์ โดยการรมควัน 1 / 2008 สตีฟ อัลลิสัน7 . ให้นั่งในที่มืดเป็นเวลา 3 วัน ( ความมืดป้องกันคลอโรฟอร์มแตกสลายลงคุณสามารถครอบคลุมเดสิ กเคเตอร์กับถุงขยะ )8 . ปล่อยสุญญากาศ และเอาคลอโรฟอร์ม9 . วาดสุญญากาศและปล่อยเพื่อเอายาสลบส่วนเกิน ทำซ้ำ 5-10 ครั้ง เพื่อให้แน่ใจว่าคุณได้ระบายทั้งหมดคลอโรฟอร์ม , คุณอาจต้องการที่จะทำแบบทดสอบ " ดม " ที่มีชื่อเสียงคิดค้นโดย Eldor พอล ( มันอาจจะไม่ดีสำหรับสุขภาพของคุณ )10 . สารสกัดจากตัวอย่างใน k2so4 50 ml . เขย่าเป็นเวลา 1 ชั่วโมง กรองผ่านชะก่อน( 0.5 M k2so4 ) whatman 1 ไส้กรองกระดาษ แช่แข็งจากร้านจุลินทรีย์ : คาร์บอน1 . ตรวจสอบทั้งหมดละลายคาร์บอนใน Tic TOC / วิเคราะห์ ความแตกต่างระหว่าง C ในการรมยาและไม่พ่นยาตัวอย่างคือคลอโรฟอร์มที่ C พูล ( EC ) , และสัดส่วนของมวลชีวภาพ ซี ( C )C = EC / KECที่ KEC เป็นดินที่เฉพาะเจาะจง แต่มักถูกประเมินเป็น 0.45 ( Beck et al . 1997 )สำหรับไนโตรเจนจุลินทรีย์ :1 . ย่อย 20 ml สารสกัดที่ใช้ย่อยอาหาร 0 . วิ่งบน autoanlyzer ย่อยทั้งหมด )ความแตกต่างระหว่าง N ในรมยาและไม่ chloroformlabile รมยาตัวอย่างคือ- สระว่ายน้ำ และสัดส่วนของจุลินทรีย์ไนโตรเจน ( N ) :N = en / เคนที่เคนเป็นดินที่เฉพาะเจาะจง แต่มักถูกประเมินเป็น 0.54 ( บรูกส์ et al . 1985 )อัลลิสัน Lab โพรโทคอล : มวลชีวภาพจุลินทรีย์ โดยการรมควัน 1 / 2008 สตีฟ อัลลิสัน0 ย่อย : vitousek Lab วิธีการย่อยสลายด้วยกรดดั๊ก เทอร์เนอร์โซลูชั่นสำหรับชั้นย่อย 40 ;190ml กรดซัลฟูริก100 กรัมโพแทสเซียมซัลเฟต20 กรัมของทองแดงซัลเฟต ( อิเล็ก )หมายเหตุ : โซลูชั่นโดยเฉพาะยุทธศาสตร์ย่อยวิ่งบน vitousek Lab alpkem .กรุณาสวมเสื้อ Lab , ถุงมือ และอุปกรณ์ป้องกันตา .เริ่ม technicon ปิดกั้นความร้อนขึ้น ( คู่มือ และปุ่มตั้ง 410 ° C ) , มันใช้เวลา 2 ชั่วโมง ถ้าคุณย่อย โซลูชั่น เริ่มบล็อกที่ 210 ° Cวางขวด 500ml เออร์เลนเมเยอร์บนจานร้อนกับกวนแม่เหล็กการใช้กระบอกตวง 250ml ( มักจะพบบนชั้นวางที่แห้ง ) วัดและเทกรดซัลฟูริกในเออร์เลนเมเยอร์ขวด เปิดความร้อนลูกบิดกับ 4 ที่ช้า และผสมความเร็วปานกลาง ล้างกระบอกตวงหลายครั้งด้วยน้ำ DI และแทนที่ในชั้นตากแห้งโดยใช้น้ำหนักเรือ วัดออกโพแทสเซียมซัลเฟต กับผงกรวย ค่อยๆเพิ่มลงในขวด อนึ่ง วัดออก และเพิ่มของทองแดงซัลเฟต . ให้ย่อยโซลูชั่นกวนในขณะที่คุณชั่งน้ำหนักตัวอย่างของคุณ มันจะมีสีฟ้าอ่อน มิลค์กี้ลักษณะที่ปรากฏถอดถุงมือที่จุดนี้ ( คงรบกวนชั่งตัวอย่าง )วางท่อย่อยบนกระดาษแข็งข้างสมดุล ระวังย่อยหลอด - พวกเขาเปราะบาง ! หลอดสามารถถอด หรือชิปได้อย่างง่ายดายมาก วัสดุที่ใช้ควรเป็นเตาอบแห้งและที่จัดขึ้นในเดสิ กเคเตอร์หรือ redried ก่อนการย่อยอาหาร ใบใช้สำหรับเนื้อเยื่อ 50 mg พื้นดิน 20ตาข่ายหรือปลีกย่อย ( คุณสามารถใช้น้อยกว่าถ้าคุณทราบตัวอย่างของคุณมีไนโตรเจนสูง P หรือเนื้อหา )สำหรับดินใช้ 150 มก. [ ถ้าใช้น้อย ] อินทรีย์ เมื่อย่อย โซลูชั่น คุณสามารถใช้ขึ้นหลอด แต่ละชั้น 40 ตัวอย่าง ควรมีอย่างน้อย 2 หลอดมาตรฐาน ( ดู สนตลาด )ใส่ถุงมือถัดไปเพิ่ม 1 หรือ 2 ต้มชิป ( hengar เม็ด ) แต่ละหลอดใต้ตู้ดูดควันให้ 5 มิลลิลิตรย่อย โซลูชั่น ( ยังกวน ) ลงในแต่ละหลอด เมื่อพวกเขาทั้งหมดที่เต็มไปพวกเขาไปในบล็อกเป็นเวลา 30 วินาที หลังจาก 30 วินาที ลิฟท์ ชั้นออกบล็อกและให้ท่อเย็นลง ( ประมาณ 5 นาที )ในขณะที่ท่อความเย็น ได้รับ 5 ปิเปตออกไปและไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ ออกของตู้เย็นอัลลิสัน Lab โพรโทคอล : มวลชีวภาพจุลินทรีย์ โดยการรมควัน 1 / 2008 สตีฟ อัลลิสันเพิ่ม 1 ml H2O2 แต่ละหลอดผสม ( คุณสามารถผสมด้วยมือหรือด้วยเครื่องผสมใน .ดูเถิด