Transfer each subsample of seeds in

Transfer each subsample of seeds into a radiation sterile
Stomacher bag (e.g. 105 9 50 mm) and add 3 mL sterile
PBS-T per g seed (Appendix 2). Soak and refrigerate seeds
overnight (minimum 14 h) under refrigeration. Crush the
seeds for 3 min in a Stomacher and allow the sediment to
settle for 30 min at room temperature.
Filter the resulting homogenate through sterile gauze and
centrifuge the filtrate at 10 000–12 000 g for 20 min at
10°C. Remove the supernatant and resuspend the pellet in
1.0–1.5 mL sterile water to obtain the final concentrate.
Prepare 10-fold dilutions for direct isolation.
Aliquots of each seed extract can be frozen as a reference
and used for any further testing.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

โอน subsample แต่ละเมล็ดเป็นรังสีที่ผ่านการฆ่าเชื้อแผงประดับหน้าอกถุง (เช่น 105 9 50 มม.) และเพิ่ม 3 มล.ผ่านการฆ่าเชื้อT PBS ต่อกรัมเมล็ด (ภาคผนวก 2) แช่น้ำ และเก็บเมล็ดพันธุ์ใบ (ขั้นต่ำ 14 ชม.) ภายใต้ความเย็น สนใจเมล็ด 3 นาทีในการแผงประดับหน้าอก และให้ทุนการชำระ 30 นาทีที่อุณหภูมิห้องกรอง homogenate ผลผ่านผ้าพันแผลที่ปลอดเชื้อ และเครื่องหมุนเหวี่ยงการกรอง 10 000 000 – 12 กรัมสำหรับ 20 นาทีที่10 องศาเซลเซียส เอา supernatant และ resuspend เม็ดใน1.0 – 1.5 mL น้ำหมันรับเข้มข้นสุดท้ายเตรียม dilutions 10-fold การแยกโดยตรงAliquots ของสารสกัดแต่ละเมล็ดแช่แข็งเป็นการอ้างอิงและใช้สำหรับการทดสอบใด ๆ เพิ่มเติม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

โอน subsample ของเมล็ดในแต่ละรังสีฆ่าเชื้อ
ถุง Stomacher (เช่น 105 9 50 มิลลิเมตร) และเพิ่ม 3 มลหมัน
พีบีเอส-T ต่อกรัมเมล็ด (ภาคผนวก 2) แช่ในตู้เย็นและเมล็ด
ในชั่วข้ามคืน (ขั้นต่ำ 14 ชั่วโมง) ภายใต้การทำความเย็น บดขยี้
เมล็ดเป็นเวลา 3 นาทีใน Stomacher และอนุญาตให้ตะกอนที่จะ
ชำระเป็นเวลา 30 นาทีที่อุณหภูมิห้อง.
กรอง homogenate ส่งผลให้ผ่านผ้าก๊อสและ
centrifuge กรองที่ 10 000-12 000 กรัมเป็นเวลา 20 นาทีที่
10 ° C นำสารละลายและ resuspend เม็ดใน
1.0-1.5 มลน้ำหมันเพื่อให้ได้สมาธิขั้นสุดท้าย.
เตรียมเจือจาง 10 เท่าสำหรับการแยกโดยตรง.
aliquots ของสารสกัดจากเมล็ดแต่ละสามารถแช่แข็งเป็นข้อมูลอ้างอิง
และใช้สำหรับการทดสอบเพิ่มเติมใด ๆ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

โอนแต่ละ subsample เมล็ดในรังสีเป็นหมันกระเป๋าแผงประดับหน้าอก ( เช่น 105 9 50 มม. ) และเพิ่ม 3 ml ปลอดเชื้อpbs-t / กรัมเมล็ด ( ภาคผนวก 2 ) แช่ในตู้เย็น เมล็ดพันธุ์คืน ( ขั้นต่ำ 14 H ) ภายใต้ความเย็น . บี้เมล็ดนาน 3 นาทีในแผงประดับหน้าอกและอนุญาตให้ตะกอนชำระสำหรับ 30 นาทีที่อุณหภูมิห้องกรองผ่านผ้ากอซฆ่าเชื้อและแยกที่เกิดขึ้นเครื่องหนัก 10 000 – 12 000 G สำหรับ 20 นาทีที่10 องศา และเอานำ resuspend เม็ดใน1.0 – 1.5 ml หมันน้ำเพื่อให้ได้สมาธิขั้นสุดท้ายเตรียม 10 วิธีการพับแยกได้โดยตรงเฉยๆของแต่ละสารสกัดเมล็ดสามารถแช่แข็งเป็นแหล่งอ้างอิงและใช้สำหรับการทดสอบใด ๆ เพิ่มเติม