3. Results3.1. Effect of TDZ on sho

3. Results
3.1. Effect of TDZ on shoot bud induction
The concentration of TDZ in the medium significantly influenced the response of shoot bud induction irrespective of genotype studied. The percentage of induction of shoot buds and the of induced shoot buds per explant were directly proportional to the concentrat of TDZ. Of the different concentrations of TDZ tested, the highest percentage of shoot bud induction (66.97%) highest number of induced shoot buds (13.76) per explant number and
were observed in the presence of 9.08 M TDZ, among the genotypes studied. However, further proliferation and elongation of shoot buds were inhibited due to com

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สบู่ curcas พืชพลังงานได้รับความสนใจมากในปีที่ผ่านมาเนื่องจากไบโอดีเซลผลิตยา และเป็นค่า นี้ช่วยให้ความจำเป็นเพื่อค้นหาเทคนิคการแพร่กระจายอย่างรวดเร็ว ในปัจจุบัน การ efficient และวิธีจำลองสำหรับพืชฟื้นฟูผ่าน เหนี่ยวนำดอกตูมยิงตรงจาก explants cotyledonary petiole ของอีลิท ศึกษาจีโนไทป์ (CSMCRI JC1, CSMCRI-เจซี-2 และ CSMCRI-เจซี-3) ของ J. curcas ได้รับการพัฒนา ดีที่สุดยิง เหนี่ยวนำอาหาร (51.19%) และจำนวนยิงอาหาร (9.75) ต่อ explant ที่สังเกตเมื่อ petiole ใน explants ถูกวางตามแนวนอนบน MS สื่อเสริม 2.27 เมตร TDZ หลังจาก 6 สัปดาห์ อาหารยิงอาจถูกโอนย้ายไป MS ขนาดกลางที่มี 10 M kinetin (ช็อปปิ้ง), M 6-benzyl (BAP) 4.5 และ 5.5 เมตร - naphthaleneacetic กรด (NAA) สำหรับการงอกยิง สามารถมี elongated ยอด proliferated ใน MS สื่อเสริม มีความเข้มข้นต่าง ๆ และกรดอะซิติก indole3 ชุดใน aminopurine (IAA), NAA และกรดอินโดล-3-butyric (อิบา) พบปานกลาง MS กับ IAA BAP และ 8.5 M M หุ้น 2.25 เป็น ชุดที่ดีที่สุดสำหรับยิง elongation และ elongation 3.01 – 3.61 ซม.สำเร็จหลังจาก 6 สัปดาห์ อย่างไรก็ตาม ความแตกต่างของ significant ในพืชฟื้นฟูและยิง elongation สุภัคระหว่างศึกษาจีโนไทป์ที่ศึกษา การวางแนว (แนวนอน หรือแนวตั้ง) แหล่งที่มา (การเพาะเลี้ยง หรือในสัตว์ทดลอง) และยัง significantly influenced พืชฟื้นฟู ถ่ายภาพอีลองเกตอาจจะรากบนกลาง MS ครึ่งแรงเสริม ด้วยถ่าน 0.25 mg/L และความเข้มข้นแตกต่างกัน และชุด ของอิบา IAA, NAA พบครึ่งแรงของ MS กลางกับอิบา M 5, IAA 5.7 M และ NAA 11 เมตรจะดีที่สุดสำหรับ rooting สามารถสร้างพืช rooted ในดินมากกว่า 90% ของ BAP ของ explants อัตราอยู่รอด1. บทนำOilseeds เชื่อว่าต้นไม้ที่ดีสุด และเป็นทางเลือก เพื่อบรรเทาวิกฤตพลังงานในปัจจุบัน และในอนาคต และแปลงใหญ่เหยียด wasteland เป็นน้ำมันสีเขียว fields Identified แหล่งศักยภาพจนรวม curcas สบู่ Pongamia pinnata, Madhuca latifolia สะเดา กระทิง และ Simarouba glauca ในหมู่เหล่านี้ J. curcas บ่งบอกเป็น oilseed เชื่อว่าต้นไม้ที่ว่าตามหลากหลายช่วงกว้างของเงื่อนไข edapho climatic น้ำมันสูงเนื้อหา มีความเหมาะสมของน้ำมันสบู่ดำเป็นแหล่งของไบโอดีเซล J. curcas พุ่มไม้ใหญ่ที่อเนกประสงค์ของครอบครัวน้ำ พื้นถิ่นของอเมริกาใต้ และกระจายอย่างกว้างขวางในเอเชียใต้ และควบคู่อเมริกากลาง แอฟริกา และเอเชีย ไบโอดีเซลที่เตรียมจาก J. curcas ได้สำเร็จในการทดสอบโทรศัพท์มือถือทั้งสอง และ เครื่องยนต์เครื่องเขียน โดย modification ในชิ้นส่วนเครื่องยนต์ ขณะนี้มีกระแสที่น่าสนใจใน J. curcas เป็นไบโอดีเซล "ต้นไม้มหัศจรรย์" เพื่อช่วยบรรเทาวิกฤตพลังงาน และสร้างรายได้ในชนบทของประเทศกำลังพัฒนา (Francis et al., 2005) ปลูกเชิงพาณิชย์ของพืชที่สำคัญนี้ขึ้นโดยใช้กล้าไม้ และเกิด cuttings เมล็ดนี้และอัตราการงอก ต่ำ และคุณภาพเมล็ดพันธุ์คัดกรองงานลำบากอีกดังนั้น การเผยแพร่ผ่านเมล็ดอาจมีการคุณภาพวัสดุปลูกสำหรับการใช้อย่างยั่งยืน มันยังถูกตรวจสอบว่า ขนาดใหญ่ปริมาณของเมล็ดถูกใช้สำหรับการก่อตัวของวัสดุปลูก ถ้าเทคนิคการเผยแพร่ทางเลือกพัฒนา เมล็ดสามารถได้รับการโอนสำหรับเตรียมสอบไบโอดีเซล เผยแพร่สามารถยังทำ โดยตัดก้านแต่ข้อจำกัดในการสร้างขนาดใหญ่ วัสดุปลูกคือ (ก) ความพร้อมของ sufficient ปริมาณวัสดุ และ (ข) เผยแพร่ได้ตามฤดูกาล ดังนั้น เผยแพร่ทั่วไปผ่านเมล็ดพืชไม่น่าเชื่อถือ และ cuttings ผักเรื้อรังจะไม่เพียงพอเพื่อตอบสนองความต้องการของคุณภาพขนาดใหญ่วัสดุปลูก ดังนั้น J. curcas ปรับปรุงหลักสูตร โดยวิธีการสมัยใหม่ของ agrobiotechnology ที่น่าสนใจทั่วโลก นี้ได้เพิ่มความสำคัญของการพัฒนาวิธีการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อเพื่อช่วยในการผลิตขนาดใหญ่ของวัสดุปลูก และ การปรับปรุงพันธุ์โดยใช้เทคนิคพันธุวิศวกรรม ได้ทำความพยายามฟื้นฟู J. curcas (Sujatha และ Mukta, 1996 Wei et al., 2004 Sujatha และ al., 2005 Rajore และ Batra, 2007 Al. Jha ร้อยเอ็ด 2007 Kumar, 2009 Kumar และเรดดี 2553 Kumar et al., 2010a, b, c, 2011a, b) อย่างใดอย่างหนึ่งให้ถึง mediated morphogenesis ยิงตรงหรือฟื้นฟู ในรายงานทั้งหมดด้านบน ความถี่ของการฟื้นฟูได้ต่ำ และเฉย ๆ แต่ก็ยังมีรายงานว่า ฟื้นฟูใน J. curcas คือ ลักษณะทางพันธุกรรมขึ้นอยู่ (Camara ดามาชาโดและ al., 1997 Al. Kumar et, 2008 Kumar และเรดดี 2553 Kumar et al., 2010a, 2011b) รักษาความสำคัญประหยัดของ J. curcas ในจิตใจและวิเคราะห์ความสำคัญของรายงานก่อนหน้า วัตถุประสงค์ของการศึกษานี้ได้พัฒนาวิธีการเพาะเลี้ยงฟื้นฟูโดยไม่ก่อให้อยู่ระหว่างกลางใน J. curcas โดยรวมเผยแพร่และปรับปรุงพันธุกรรม การศึกษานี้ยังเปรียบเทียบ efficiency ฟื้นฟูของการเพาะเลี้ยง และสัตว์ทดลองใน petiole cotyledonary explants2. วัสดุและวิธีการ2.1 การปลูกวัสดุและแหล่งที่มาของ explantเมล็ดของ elite (CSMCRI-เจซี-1, CSMCRI-เจซี-2 และ CSMCRI-เจซี-3) ของ J. curcas ได้รับมาจากไร่ทดลองกลางเกลือและทางทะเลเคมีวิจัยสถาบัน (CSMCRI) บน wastelands Chorvadla อินเดีย (21◦75N, 72◦14E) สำหรับการศึกษาปัจจุบัน Seedcoats ถูกเอาออก และจากนั้น ผิว sterilized ด้วย 0.1% mercuric คลอไรด์ (HgCl2) สำหรับ 15 นาทีและเวลา rinsed five ในกอซกลั่นน้ำ เมล็ด decoated sterilized ถูกเปลือกงอกบนเร็คกูเลเตอร์ฟรี MS เหลวเชื้อ (Murashige และ Skoog, 1962) ด้วยการสนับสนุนของ filter กระดาษเรือ หลังจาก 2 สัปดาห์ของการงอก explants cotyledonary petiole ถูกรวบรวมไว้จาก cotyledonary ใบของกล้าไม้เปลือกงอก และใช้ใน explants หลอด สำหรับในสัตว์ทดลอง explants ขึ้นกล้าไม้ในเรือนเพาะชำที่ และ explants cotyledonary petiole ถูกเก็บรวบรวมจากใบไม้ cotyledonary กล้าไม้ที่ 2 เก่า - สัปดาห์ และ sterilized 0.1% mercuric คลอไรด์ (HgCl) สำหรับ 3 นาทีและเวลา rinsed five ในน้ำกลั่นที่ฆ่าเชื้อ2.2 การยิงเหนี่ยวนำดอกตูมExplants petiole cotyledonary ในหลอดทดลอง และในสัตว์ทดลองทั้งหมดศึกษาจีโนไทป์สามมีอ่างบน MS สื่อเสริม ด้วยความเข้มข้นแตกต่างกันของ thidiazuron (TDZ) เพื่อ find ที่ความเข้มข้นสูงสุดของ TDZ สำหรับยิงเหนี่ยวนำดอกตูม (Kumar และ Reddy, 2010 Kumar et al., 2010a, b, c) Cotyledonary โดย explants petiole มี inoculated บนพื้นผิวขนาด 200 มม. x 38 มม.วัฒนธรรมหลอด (Borosil อินเดีย) ทั้งในแนวตั้ง และแนวนอนตำแหน่งใน เปอร์เซ็นต์ของการยิงดอกตูมและจำนวนอาหารยิงต่อ explant ถูกบันทึกหลังจาก 6 สัปดาห์ของวัฒนธรรม2.3 การขยายและ elongation จากอาหารอาจยิงยิงอาหารยิงเหนี่ยวนำให้มีการถ่ายโอนบนกลาง MS เสริม M kinetin (ช็อปปิ้ง), 4.5 M BAP และ 5.5 เมตร - naphthaleneacetic กรด (NAA) สำหรับ 4 สัปดาห์สำหรับการงอกยิง (Reddy et al., 2008 Kumar และเรดดี 2553 Kumar et al., 2010a, b, c) กับ 10 หน่อที่แยกแต่ละรายการ และเพิ่มเติม ทดสอบของ elongation บน MS สื่อเสริม ด้วยความเข้มข้นแตกต่างกันและชุดของ BAP กรดอินโดล-3-อะซิติก (IAA), NAA และอิบา ความยาวของยอดอีลองเกตบันทึก 6 สัปดาห์ของวัฒนธรรม หลังจาก2.4. rooting acclimatization และยอดอีลองเกตสีเขียว และมีสุขภาพดี ด้วย 3-4 ใบ excised และอ่างบนกลาง MS แรงครึ่งเสริม ด้วยความเข้มข้นแตกต่างกันและชุดของ auxins เช่นอิบา (5-15 เมตร), IAA (5.7 – 11.4 M) และ NAA (5.5-11 M) rooting (Kumar และ Reddy, 2010 Kumar et al., 2010a, b, c) เปอร์เซ็นต์ของรากต่อยิงถูกบันทึกหลังจาก 4 สัปดาห์ ยอดรากถูกนำออกสื่ออย่างระมัดระวัง และล้างสะอาดน้ำกลั่นใส่เอากลาง MS โรคกับราก พืชมีการถ่ายโอนจะพลาสติกถุงประกอบด้วย sterilized ทรายและดินในอัตราส่วน 1:1 และ wetted กับ carbendazim 0.02% (w/v) และปกคลุม ด้วยถุงพลาสติกใสเพื่อรักษาความชื้น หลังจาก 3-4 สัปดาห์ พืชสร้างขึ้นถูกโอนย้ายไปเรือนกระจกอุณหภูมิ 25 + 3 C และความชื้นสัมพัทธ์ 70-80%) สำหรับการเจริญเติบโตต่อไป และบันทึกหมายเลขของพืชรอดตายหลังจากสัปดาห์ 6 – 8 เพิ่มเติม2.5. วัฒนธรรมเงื่อนไขและข้อมูลวิเคราะห์วัฒนธรรมเป็นรูปแบบเงื่อนไขที่ใช้ในการทดลองทั้งหมด PH ของตัวกลางมีการปรับปรุงการใช้เกาะ N 1 หรือ HCl ก่อน autoclaving ที่ 5.7 1.05 kg/cm2pressure ที่ 121C สำหรับ 20 นาที วัฒนธรรมถูกเก็บรักษาที่ 25 + 2◦C ภายใต้ชั่วโมง 16 h กับความเข้มแสงของ 35 – 40 โมล m−2s−1(เย็นหลอดสีขาว fluorescent) ทดลองทั้งหมดถูกตั้งค่าในแบบแฟกทอเรียล ออกแบบ randomized สมบูรณ์ (FCRD) และสามซ้ำเท่ากับ 25 เหมือนกับต่อการรักษา มี explant หนึ่งต่อหลอดทดสอบ ข้อมูลถูกต้องวิเคราะห์ความต่าง (การวิเคราะห์ความแปรปรวน), วิเคราะห์ปัจจัยสี่วิเคราะห์ FCRD ยิงเหนี่ยวนำดอกตูมและสองปัจจัยการวิเคราะห์ CRD สำหรับยิง elongation และ rooting ใช้แพคเกจซอฟต์แวร์พื้นฐาน (มหาวิทยาลัยเกษตรอานันท์ Gujarat อินเดีย) ในระดับความน่าเป็น 5% ความแตกต่างทางสถิติระหว่างพาหนะที่ถูกวิเคราะห์ โดยของดันแคนหลายช่วงการทดสอบโดยใช้โปรแกรม (เวอร์ชัน 7.5) ผลลัพธ์ถูกแสดงเป็นข้อผิดพลาดมาตรฐานหมายถึงการทดลองอิสระ 33. ผลลัพธ์3.1. ผลของ TDZ ยิงเหนี่ยวนำดอกตูมความเข้มข้นของ TDZ ใน influenced ปานกลาง significantly ศึกษาการตอบสนองของตายิงโดยไม่คำนึงถึงลักษณะทางพันธุกรรม เปอร์เซ็นต์ของการเหนี่ยวนำของอาหารยิงและยิงเหนี่ยวนำให้อาหารต่อ explant มีสัดส่วนโดยตรงกับ concentrat ของ TDZ ของความเข้มข้นแตกต่างกันของ TDZ ทดสอบ เปอร์เซ็นต์สูงสุดของยิงบัดเหนี่ยวนำ (66.97%) สูงสุดจำนวนอาหารอาจยิง (13.76) ต่อจำนวน explant และ สุภัคในต่อหน้าของ M 9.08 TDZ ระหว่างศึกษาจีโนไทป์ที่ศึกษา อย่างไรก็ตาม ต่อการงอกและ elongation ของอาหารยิงถูกห้ามเนื่องจาก com

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สบู่ดำพืชพลังงานที่ได้บรรลุความสนใจอย่างมากในปีที่ผ่านมาเนื่องจากการผลิตไบโอดีเซลที่มีศักยภาพและความคุ้มค่าของยา นี้ทำให้ความจำเป็นในการค้นหาเทคนิคการขยายพันธุ์อย่างรวดเร็ว ในการตรวจสอบนำเสนอเพียงพอ EF fi
และวิธีการเลียนแบบสำหรับการฟื้นฟูโรงงานที่ผ่านการยิงเหนี่ยวนำตาโดยตรงจากcotyledonary
ก้านใบชิ้นส่วนของชนชั้นจีโนไทป์(CSMCRI-JC1, CSMCRI-JC-2 และ CSMCRI-JC-3) ของเจดำได้รับการพัฒนา ยิงเหนี่ยวนำตาที่ดีที่สุด (51.19%) และจำนวนของตายิง (9.75) ต่อชิ้นพบว่าเมื่ออยู่ในชิ้นส่วนก้านใบหลอดทดลองถูกวางไว้ในแนวนอนบน MS เสริมขนาดกลางที่มี TDZ 2.27 M หลังจาก 6 สัปดาห์ เหนี่ยวนำตายิงถูกย้ายไปสูตร MS ที่มี 10 M kinetin (Kn) 4.5 M 6 เบนซิล (BAP) และ 5.5 ล้าน -naphthaleneacetic กรด (NAA) สำหรับการขยายยิง หน่อแพร่กระจายอาจจะยืดออกบนอาหารสูตร MS เสริมที่มีความเข้มข้นแตกต่างกันและการรวม aminopurine indole3-กรดอะซิติก (IAA) NAA และกรดอินโดล-3-butyric (IBA) สูตร MS ที่มี 2.25 M BAP และ 8.5 M IAA พบว่าเป็นชุดที่ดีที่สุดสำหรับการยืดตัวยิงและการยืดตัว 3.01-3.61 ซม. ก็ประสบความสำเร็จหลังจาก 6 สัปดาห์ แต่ความแตกต่างที่มีนัยสำคัญลาดเทไฟในการฟื้นฟูโรงงานและการยืดตัวยิงถูกตั้งข้อสังเกตในกลุ่มยีนที่ศึกษา ปฐมนิเทศ (แนวนอนหรือแนวตั้ง)
และแหล่งที่มา (ในหลอดทดลองหรือในร่างกาย) นอกจากนี้ยังมีนัยสำคัญอย่างมีนัยในชั้นการฟื้นฟูโรงงาน uenced หน่อยาวอาจจะหยั่งรากลึกในครึ่งแรงสูตร MS เสริมด้วย 0.25 มิลลิกรัม / ลิตรผงถ่านและความเข้มข้นแตกต่างกันและการรวมกันของ IBA, IAA และ NAA ความแข็งแรงครึ่งหนึ่งของสูตร MS 5 M IBA 5.7 M IAA และ 11 M NAA พบว่าเป็นสิ่งที่ดีที่สุดสำหรับการขจัด ที่ฝังรากพืชจะได้รับการก่อตั้งขึ้นในดินที่มีมากกว่า 90% ของของ BAP,
ของอัตราการรอดตายชิ้น.
1 บทนำเมล็ดพืชน้ำมันที่เกิดจากต้นไม้เป็นทางเลือกที่ดีที่สุดและมีศักยภาพในการบรรเทาวิกฤตพลังงานในปัจจุบันและอนาคตและยังเปลี่ยนเหยียดใหญ่ของดินแดนเข้ามาใน elds สายน้ำมันสีเขียว
แหล่งที่มาที่มีศักยภาพเอ็ดระบุสายเพื่อให้ห่างไกลรวมถึงสบู่ดำ, Pongamia pinnata, Madhuca latifolia, สะเดา, Calophyllum inophyllum และ Simarouba glauca กลุ่มคนเหล่านี้เจดำโผล่ออกมาเป็นน้ำมันที่เกิดจากต้นไม้ที่มีแนวโน้มมากที่สุดบนพื้นฐานของการปรับตัวเพื่อความหลากหลายของสภาพภูมิอากาศ edapho ปริมาณน้ำมันสูงที่มีความเหมาะสมของน้ำมันสบู่ดำเป็นแหล่งของการผลิตไบโอดีเซลที่ เจดำเป็นไม้พุ่มขนาดใหญ่อเนกประสงค์เป็นของครอบครัว Euphorbiaceae ที่มีถิ่นกำเนิดในอเมริกาใต้และกระจายอย่างกว้างขวางในภาคใต้และควบคู่อเมริกากลางแอฟริกาและเอเชีย ไบโอดีเซลที่ทำจากเจดำได้รับการทดสอบสำเร็จทั้งในมือถือและเครื่องมือนิ่งโดยไม่ต้องไอออนบวก Modi ไฟในใด ๆ ของชิ้นส่วนเครื่องยนต์
ขณะนี้มีการหลั่งไหลของความสนใจในเจดำเป็นไบโอดีเซล "มิราเคิต้นไม้" เพื่อช่วยบรรเทาวิกฤตพลังงานและสร้างรายได้ในพื้นที่ชนบทของประเทศกำลังพัฒนา (ฟรานซิส et al., 2005) พื้นที่เพาะปลูกในเชิงพาณิชย์ของการเพาะปลูกที่สำคัญนี้จะยกผ่านต้นกล้าและการตัดลำต้น
ความมีชีวิตของเมล็ดพันธุ์และอัตราการงอกอยู่ที่ต่ำและการตรวจคัดกรองเมล็ดพันธุ์ที่มีคุณภาพอีกงานที่ลำบากดังนั้นการขยายพันธุ์เมล็ดผ่านไม่อาจให้วัสดุปลูกที่มีคุณภาพสำหรับใช้ประโยชน์อย่างยั่งยืน มันก็ยังตั้งข้อสังเกตว่าปริมาณขนาดใหญ่ของเมล็ดจะถูกใช้สำหรับยกวัสดุปลูกถ้าเทคนิคการขยายพันธุ์ใด ๆ
ที่เป็นทางเลือกที่ได้รับการพัฒนาเมล็ดพันธุ์ที่สามารถหันเหความสนใจในการจัดทำไบโอดีเซล การขยายพันธุ์สามารถดำเนินการยังออกโดยตัดลำต้น แต่มีข้อ จำกัดในการสร้างขนาดใหญ่วัสดุปลูกคือ (ก) ความพร้อมของปริมาณที่พอเพียงเพียงพอไฟของวัสดุและ (ข) การขยายพันธุ์ตามฤดูกาล ดังนั้นการขยายพันธุ์เมล็ดธรรมดาผ่านไม่น่าเชื่อถือและตัดพืชมีไม่เพียงพอที่จะตอบสนองความต้องการของวัสดุปลูกที่มีคุณภาพขนาดใหญ่ ดังนั้นเจ curcas โครงการปรับปรุงโดยวิธีการที่ทันสมัยของagrobiotechnology เป็นที่สนใจของทั่วโลก นี้ได้เพิ่มความสำคัญของการพัฒนาวิธีการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อเพื่ออำนวยความสะดวกการผลิตขนาดใหญ่ของวัสดุปลูกที่มีคุณภาพและการปรับปรุงสายพันธุ์โดยใช้เทคนิคทางพันธุวิศวกรรม พยายามที่จะทำให้การงอกใหม่ดำเจ (Sujatha และ Mukta 1996; Wei et al, 2004;. Sujatha et al, 2005;. Rajore และ Batra, 2007; Jha et al, 2007;. มาร์ 2009; มาร์และเรดดี้ 2010. มาร์, et al, 2010a, B, C, 2011a, b) การฟื้นฟูทั้งผ่านสื่อกลางแคลลัสหรือ morphogenesis ยิงโดยตรง ในรายงานทั้งหมดข้างต้นความถี่ของการฟื้นฟูที่ได้รับต่ำและเป็นที่น่าพอใจ นอกจากนี้ยังมีรายงานว่าในการฟื้นฟูเจดำเป็นอย่างสูงที่ขึ้นอยู่กับจีโนไทป์ (ราดา Machado, et al, 1997;. Kumar et al, 2008;. มาร์และเรดดี้, 2010. มาร์, et al, 2010a, 2011b) การรักษาความสำคัญทางเศรษฐกิจของเจดำในใจและการวิเคราะห์ที่สำคัญของรายงานก่อนหน้านี้มีวัตถุประสงค์เพื่อพัฒนาวิธีการฟื้นฟูในหลอดทดลองโดยไม่แทรกแซงการก่อตัวของแคลลัสในเจดำสำหรับการขยายพันธุ์มวลและการปรับปรุงทางพันธุกรรม การศึกษาครั้งนี้ยังเปรียบเทียบประสิทธิภาพการฟื้นฟูของสายในหลอดทดลองและในร่างกาย cotyledonary ก้านใบชิ้น. 2 วัสดุและวิธีการ2.1 วัสดุปลูกและแหล่งที่มาของชิ้นส่วนเมล็ดของยีนที่ยอดเยี่ยม (CSMCRI-JC-1, CSMCRI-JC-2 และ CSMCRI-JC-3) ของเจดำที่ได้รับจากกลางทะเลเกลือและสารเคมี Research Institute (CSMCRI) ไร่ทดลอง ดินแดนรกร้างที่ Chorvadla, อินเดีย (21◦75N, 72◦ 14E) สำหรับการศึกษาปัจจุบัน Seedcoats ถูกถอดออกแล้วผิวฆ่าเชื้อด้วยคลอไรด์ 0.1% ปรอท (HgCl2) เป็นเวลา 15 นาทีและล้างไฟได้ครั้งในน้ำกลั่นผ่านการฆ่าเชื้อ เมล็ด decoated ฆ่าเชื้อถูกงอกบนควบคุมการเจริญเติบโตฟรีอาหารเหลว MS (Murashige และ Skoog, 1962) ด้วยการสนับสนุนของสายเรือกระดาษกรอง หลังจาก 2 สัปดาห์ของการงอกชิ้นก้านใบ cotyledonary ถูกเก็บรวบรวมจากใบของต้นกล้า cotyledonary งอกและนำมาใช้เป็นชิ้นส่วนในหลอดทดลอง หาชิ้นส่วนร่างกายต้นกล้าถูกยกขึ้นในเรือนเพาะชำและชิ้นส่วนก้านใบ cotyledonary ถูกเก็บรวบรวมจากใบ cotyledonary ของ2 สัปดาห์ต้นกล้าเก่าและผ่านการฆ่าเชื้อ 0.1% ปรอท (HgCl) เป็นเวลา 3 นาทีและล้างไฟได้ครั้งในน้ำกลั่นปลอดเชื้อ. 2.2 ยิงเหนี่ยวนำตาในหลอดทดลองและในร่างกาย cotyledonary ก้านใบชิ้นส่วนของทั้งสามสายพันธุ์มาเลี้ยงบน MS เสริมขนาดกลางที่มีความเข้มข้นแตกต่างกันของ thidiazuron (TDZ) เพื่อ fi ครั้งที่ความเข้มข้นที่เหมาะสมของ TDZ สำหรับการถ่ายเหนี่ยวนำตา (มาร์และเรดดี้ 2010 มาร์ et al., 2010a, B, C) cotyledonary ก้านใบโดยชิ้นถูกเชื้อบนพื้นผิวขนาดกลางใน 200 mm x 38 มมหลอดวัฒนธรรม (Borosil, อินเดีย) ทั้งในตำแหน่งแนวนอนและแนว ร้อยละของการเหนี่ยวนำของตายิงและจำนวนของตายิงต่อชิ้นถูกบันทึกไว้หลังจาก 6 สัปดาห์ของวัฒนธรรม. 2.3 การแพร่กระจายและการยืดตัวยิงจากตายิงเหนี่ยวนำให้เกิดชักนำตายิงถูกย้ายใน MS เสริมกลาง M kinetin (Kn) 4.5 M BAP และ 5.5 ล้านกรด -naphthaleneacetic (NAA) เป็นเวลา 4 สัปดาห์สำหรับการขยายยิง (เรดดี้ et al, 2008. มาร์และเรดดี้, 2010. มาร์, et al, 2010a, B, C) กับข้าวกล้า 10 ถูกแยกออกเป็นรายบุคคลและต่อไปการทดสอบการยืดตัวของพวกเขาในMS เสริมขนาดกลางที่มีความเข้มข้นแตกต่างกันและการรวมกันของ BAP, indole-3-กรดอะซิติก (IAA) NAA และ IBA. ความยาวของหน่อยาวได้รับการบันทึก 6 สัปดาห์ของวัฒนธรรม หลังจากที่2.4 รากและเคยชินกับสภาพใบยาวสีเขียวและมีสุขภาพดีด้วย 3-4 ใบถูกตัดและเพาะเลี้ยงที่กำลังมาแรงในช่วงครึ่งสูตร MS เสริมที่มีความเข้มข้นแตกต่างกันและการรวมกันของ auxins คือ IBA (5-15 M), IAA (5.7-11.4 M) และ NAA ( 5.5-11 M) การขจัด (มาร์และเรดดี้, 2010. มาร์, et al, 2010a, B, C) ร้อยละของการเหนี่ยวนำรากต่อการถ่ายภาพที่ถูกบันทึกไว้หลังจาก 4 สัปดาห์ที่ผ่านมา หน่อรากอย่างรอบคอบถูกนำออกมาจากกลางและล้างให้สะอาดในน้ำกลั่นผ่านการฆ่าเชื้อที่จะเอาสูตร MS ฐานที่แนบมากับราก พืชที่ถูกย้ายไปถุงพลาสติกที่มีหาดทรายที่ผ่านการฆ่าเชื้อและดินในอัตราส่วน 1: 1 และเปียกด้วย 0.02% (w / v) carbendazim และปกคลุมด้วยถุงพลาสติกใสเพื่อรักษาความชื้น หลังจาก 3-4 สัปดาห์, พืชจัดตั้งถูกย้ายไปเรือนกระจก (อุณหภูมิ 25 + 3C และความชื้นสัมพัทธ์ 70-80%) สำหรับการเจริญเติบโตและตัวเลขของพืชที่รอดตายได้ถูกบันทึกไว้หลังจากที่เพิ่มขึ้น 6-8 สัปดาห์. 2.5 เงื่อนไขวัฒนธรรมและการวิเคราะห์ข้อมูลสภาพวัฒนธรรมเครื่องแบบถูกนำไปใช้ในการทดลองทั้งหมด เป็นกรดเป็นด่างของสื่อที่ได้รับการปรับเปลี่ยนให้ใช้ 5.7 1 N HCl เกาะหรือก่อนที่จะนึ่งฆ่าเชื้อที่1.05 กก. / cm2pressure ที่ 121C เป็นเวลา 20 นาที วัฒนธรรมที่ถูกเก็บรักษาไว้ที่ 25 + 2◦Cภายใต้แสง 16 ชั่วโมงที่มีความเข้มของแสง 35-40 โมเลกุลของ m-2s-1 (เย็นหลอด uorescent ชั้นสีขาว) โดยง่ายการทดลองถูกตั้งขึ้นในปัจจัยแบบสุ่มสมบูรณ์(FCRD) และทำซ้ำสามครั้งมี 25 ซ้ำต่อการรักษาด้วยชิ้นต่อหลอดทดลอง ข้อมูลถูกยัดเยียดให้การวิเคราะห์ความแปรปรวน (ANOVA) วิเคราะห์โดยสี่ปัจจัยวิเคราะห์ FCRD สำหรับการถ่ายเหนี่ยวนำตาและสองการวิเคราะห์ CRD ปัจจัยสำหรับการยืดตัวยิงและรากใช้แพคเกจซอฟต์แวร์พื้นฐาน (อานันท์มหาวิทยาลัยเกษตรรัฐคุชราตประเทศอินเดีย) ที่น่าจะเป็น 5% ชั้น ความแตกต่างทางสถิติในหมู่หมายถึงการได้รับการวิเคราะห์โดยช่วงหลายดันแคนทดสอบโดยใช้โปรแกรม SPSS (เวอร์ชั่น 7.5) ผลการวิจัยแสดงเป็นหมายถึงข้อผิดพลาดมาตรฐานสามทดลองที่เป็นอิสระ. 3 ผล3.1 ผลของ TDZ ในการถ่ายเหนี่ยวนำตาความเข้มข้นของTDZ ในมีนัยสำคัญขนาดกลางอย่างมีนัยในชั้น uenced ตอบสนองของการถ่ายเหนี่ยวนำตาโดยไม่คำนึงถึงจีโนไทป์ศึกษา ร้อยละของการเหนี่ยวนำของตายิงและของตายิงเหนี่ยวนำต่อชิ้นมีสัดส่วนโดยตรงกับ concentrat ของ TDZ ความเข้มข้นแตกต่างกันของ TDZ ทดสอบเปอร์เซ็นต์สูงสุดของการถ่ายเหนี่ยวนำตา (66.97%) จำนวนสูงสุดของตายิงเหนี่ยวนำ (13.76) ต่อจำนวนชิ้นและถูกตั้งข้อสังเกตในที่ที่9.08 M TDZ ในหมู่ยีนศึกษา อย่างไรก็ตามการแพร่กระจายต่อไปและการยืดตัวของตายิงถูกยับยั้งเนื่องจากการดอทคอม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สบู่ดำ พืชพลังงานได้บรรลุความสนใจอย่างมากในปีที่ผ่านมาเนื่องจากการผลิตไบโอดีเซล ศักยภาพและคุณค่าสมุนไพร นี้จะทำให้มันขวางเพื่อค้นหาเทคนิคอย่างรวดเร็วการขยายพันธุ์ . ใน ปัจจุบัน การสอบสวนจึง cient ) EF และวิธีการฟื้นฟูโรงงานผ่านโดยตรงจาก cotyledonary บั๊ดเหนี่ยวยิง

ของก้านใบ เลี้ยงยอดจีโนไทป์ ( csmcri-jc1 csmcri-jc-2 , และ csmcri-jc-3 ) ของ curcas ได้รับการพัฒนา ตายิงที่ดีที่สุดอุปนัย ( 51.19 % ) และจำนวนตายิง ( 9.75 บาท ) ต่อเนื้อเยื่อในหลอดทดลองพบว่าเมื่อก้านใบที่ถูกวางไว้ในแนวนอนบนอาหารสูตร MS ที่มียอด 2.27 เมตร หลังจาก 6 สัปดาห์ การเหนี่ยวนำลิ้มถูกยิง MS ที่ประกอบด้วย 10 ม. 2 ( KN ) 4.5 m 6-benzyl ( BAP ) และ 5 .5 M - ไพร่ฟ้าประชาชน acid ( NAA ) สำหรับการยิง . มี proliferated ยิงอาจจะยืดออกบนอาหารสูตร MS ที่มีความเข้มข้นแตกต่างกัน และมิโนพิวรีนผสม indole3 กรดน้ำส้ม ( IAA ) , NAA และ Increase ( IBA ) สูตร MS ที่มี 2.25 เมตร BAP และ 8.5 M IAA พบว่าเป็นชุดที่ดีที่สุดสำหรับการยิงและ 3.01 – 361 cm ยืดได้สำเร็จ หลังจาก 6 สัปดาห์ อย่างไรก็ตาม signi จึงไม่สามารถความแตกต่างในการฟื้นฟูโรงงานและยิง การพบระหว่างจีโนไทป์ ) ปฐมนิเทศ ( แนวนอนหรือแนวตั้ง )
และแหล่งที่มาในหลอดทดลอง หรือในร่างกาย ) นอกจากนี้ signi จึงลดลงอย่างมีนัยสําคัญเมื่อในfl uenced ฟื้นฟูโรงงาน อีลองเกตยิงอาจจะรากบนอาหารสูตร MS ที่เติมครึ่งแรง 025 มิลลิกรัม / ลิตรผงถ่านและความเข้มข้นที่แตกต่างกันและการรวมกันของ IBA และ NAA , IAA . แรงครึ่งหนึ่งของสูตร MS ที่มี IBA 5 M , M และ 5.7 IAA 11 เมตรยอดพบที่ดีที่สุดสำหรับเชียร์ รากพืชที่สามารถจะจัดตั้งขึ้นในดินมีมากกว่า 90% ของอัตราการรอดการเจริญเติบโตของ BAP
.
1 บทนำ
ต้นไม้พาหะพืชบางชนิดเป็นทางเลือกที่ดีที่สุดและศักยภาพเพื่อลดวิกฤตพลังงานในอนาคตและปัจจุบันและยังแปลงยืดกว้างใหญ่ของความสูญเปล่าใน elds น้ำมันจึงเป็นสีเขียว ศักยภาพแหล่ง identi จึงเอ็ดเพื่อให้ห่างไกลรวมถึงสบู่ดำ pongamia , 2543 madhuca latifolia , สะเดา , ปฏิทิน , และ glauca simarouba . ระหว่างนี้ เจcurcas ปรากฏเป็นต้นไม้ที่มีแนวโน้มมากที่สุดรับ oilseed บนพื้นฐานของการปรับตัวให้เข้ากับช่วงกว้างของ edapho สภาพอากาศ ปริมาณน้ำมันสูงถึงความเหมาะสมของน้ำมันสบู่ดำเป็นแหล่งของไบโอดีเซล เจ curcas , อเนกประสงค์ขนาดใหญ่ไม้พุ่มเป็นของ Euphorbiaceae ครอบครัว เป็นชาวอเมริกาใต้ และกระจายอย่างกว้างขวางในภาคใต้และคู่กลาง อเมริกา แอฟริกา และเอเชียไบโอดีเซลที่เตรียมจากเจ curcas ได้จะทดสอบทั้งในมือถือและเครื่องเขียน โดยไอออนบวก
เครื่องยนต์จึงสมัครงานในใด ๆของชิ้นส่วนเครื่องยนต์ ขณะนี้มีกระแสของความสนใจในเจ curcas เป็นไบโอดีเซล มิราเคิล " ต้นไม้ " เพื่อช่วยบรรเทาวิกฤตพลังงานและสร้างรายได้ในชนบท การพัฒนาประเทศ ( ฟรานซิส et al . , 2005 )สวนป่าเชิงพาณิชย์ของพืชเศรษฐกิจที่สำคัญนี้จะยกผ่านต้น ลำต้นและกิ่ง . ความมีชีวิตและการงอกของเมล็ด ซึ่งมี
ต่ำและคุณภาพเมล็ดพันธุ์คัดอีกลําบากงานจึงแพร่ผ่านเมล็ดไม่อาจให้คุณภาพวัสดุปลูกสำหรับใช้งานอย่างยั่งยืน นอกจากนี้พบว่า ปริมาณขนาดใหญ่ของเมล็ดจะถูกใช้สำหรับการเพิ่มของวัสดุปลูกถ้ามีทางเลือก การพัฒนาเทคนิคการขยายพันธุ์
เมล็ดสามารถโอนสำหรับการเตรียมไบโอดีเซล การขยายพันธุ์สามารถดําเนินการโดยตัดต้น แต่ข้อจำกัดในการผลิตขนาดใหญ่
วัสดุปลูกคือ ( 1 ) ความพร้อมของซุฟจึง cient ปริมาณวัสดุและ
( b ) การขยายพันธุ์เป็นตามฤดูกาล ดังนั้นการขยายพันธุ์ตามปกติผ่านเมล็ดไม่ได้เป็นที่เชื่อถือได้และลักษณะการตัดที่มีไม่เพียงพอที่จะตอบสนองความต้องการของขนาดใหญ่คุณภาพวัสดุปลูก ดังนั้น เจ curcas การปรับปรุงหลักสูตร
โดยวิธีการสมัยใหม่ของ agrobiotechnology เป็นที่สนใจทั่วโลกนี้ได้เพิ่มความสำคัญของการพัฒนาวิธีการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อเพื่อความสะดวกในการผลิตขนาดใหญ่ของที่มีคุณภาพวัสดุปลูกและปรับปรุงพันธุ์โดยใช้เทคนิคพันธุวิศวกรรม ความพยายามได้รับการทำในการสร้าง เจ และ curcas ( sujatha mukta , 1996 ; Wei et al . , 2004 ; sujatha et al . , 2005 ; และ rajore batra , 2007 ; Jha et al . , 2007 ; Kumar , 2009 ; คูมาร์ และสังคม2010 ; Kumar et al . , 2010a , B , C , 2011a , b ) ให้ผ่านแคลลัสโดยการฟื้นฟูหรือการเปลี่ยนแปลงลักษณะยิงตรง ในทั้งหมดข้างต้นรายงานความถี่ของการได้รับต่ำและไม่น่าพอใจ และมีรายงานว่า ในการเจ curcas เป็นอย่างมากขึ้นอยู่กับพันธุกรรม ( ดา กามาร่า มาชาโด et al . , 1997 ; Kumar et al . , 2008 ; คูมาร์กับ Reddy , 2010 ; Kumar et al . , 2010a 2011b , )การรักษาความสำคัญทางเศรษฐกิจของ curcas ในใจและการวิเคราะห์รายงานก่อนหน้านี้ วัตถุประสงค์ของการศึกษานี้เพื่อพัฒนาในหลอดทดลองโดยวิธีปราศจากการแทรกแซงอาหารเจ curcas การขยายพันธุ์มวลและการปรับปรุงพันธุกรรม การศึกษาเปรียบเทียบการถ่ายทอดประสิทธิภาพของ EF ในหลอดทดลองและในสัตว์ทดลอง cotyledonary ก้านใบอาหาร .
2วัสดุและวิธีการ
2.1 . วัสดุปลูกและแหล่งที่มาของชิ้นส่วนพืชเมล็ดพันธุ์
( csmcri-jc-1 Elite , และ csmcri-jc-2 csmcri-jc-3 ) ของ curcas ได้จากเกลือทะเลกลาง&เคมีสถาบันวิจัย ( csmcri ) แปลงทดลองใน wastelands ที่ chorvadla อินเดีย ( 21 ◦ 75n , 72 ◦
14e ) ในการศึกษาปัจจุบัน seedcoats ถูกเอาออก และฆ่าเชื้อที่ผิวด้วย 01% เมอร์คิวริกคลอไรด์ ( hgcl2 ) 15 นาทีและล้างฆ่าเชื้อจึงได้ครั้งในน้ำกลั่น โดย decoated เมล็ดงอกบนสารควบคุมการเจริญเติบโตฟรี MS ของเหลว ( อาหารสูตร Murashige and Skoog , 1962 ) ด้วยการสนับสนุนของจึง lter กระดาษเรือ หลังจาก 2 สัปดาห์ของการงอก ,cotyledonary ก้านใบ เลี้ยงได้จากการเก็บใบ cotyledonary ต้นกล้างอกและใช้เป็นอาหารในหลอดทดลอง . ในสัตว์ทดลองเพาะเลี้ยงต้นกล้า , ถูกเลี้ยงในโรงเรือน cotyledonary ก้านใบ เลี้ยงได้จากการเก็บใบของต้นกล้าอายุ cotyledonary
2 และฆ่าเชื้อ 0.1% เมอร์คิวริกคลอไรด์ ( HgCl ) เป็นเวลา 3 นาที และล้างในน้ำกลั่นปลอดเชื้อจึงได้ครั้ง .
2.2 .ยิงบั๊ดเหนี่ยว
ในหลอดทดลองและในสัตว์ทดลอง cotyledonary ก้านใบ เลี้ยงทั้งพันธุ์เพาะเลี้ยงบนอาหารสูตร MS ที่มีความเข้มข้นแตกต่างกันของ thidiazuron ( TDZ ) และความเข้มข้นที่เหมาะสมจึงดัดแปลงให้ยิงบั๊ดเหนี่ยว ( คูมาร์กับ Reddy , 2010 ; Kumar et al . , 2010a , B , C ) cotyledonary
ก้านใบ โดยชิ้นส่วนพืชปลูกเชื้อบนพื้นผิวขนาด 200 มม. x 38 มม. ท่อ ( borosil วัฒนธรรมอินเดีย ) ทั้งในแนวนอนและแนวตั้ง ร้อยละของการบัดยิงและจำนวนหน่อต่อต่อยิงถูกบันทึกไว้หลังจากวัฒนธรรม 6 สัปดาห์ .
2.3 การยืดตัวจากการยิงและยิงตูม
เกิดลิ้มถูกยิงบนอาหารสูตร MS ที่เติม BA
ม. 2 ( KN ) 4.5 m BAP และ 5.5 M - ไพร่ฟ้าประชาชน acid ( NAA ) เป็นเวลา 4 สัปดาห์ สำหรับการยิง ( เรดดี้ et al . , 2008 ; คูมาร์กับ Reddy , 2010 ; Kumar et al . , 2010a , B , C ) กับยอด 10 แบบแยกและทดสอบการยืดตัวของพวกเขาต่อไป
บนอาหารสูตร MS ที่มีความเข้มข้นที่แตกต่างกันและการรวมกันของ BAP กรดกระเพาะ ( IAA ) , NAA และ IBA .
ความยาวของยาวยิงถูกบันทึกวัฒนธรรมของ 6 สัปดาห์ หลังจาก


2.4 . รากและใซ้
สีเขียวและมีสุขภาพดีทำให้ยิงสามสี่ใบที่ถูกตัดและเพาะเลี้ยงบนอาหารสูตร MS เติมครึ่งความแรงความเข้มข้นต่าง ๆ และชุดของออกซิน เช่น IBA ( 5 - 15 เมตร ) , เอ ( 5.7 – 11.4 เมตร ) และ NAA ( 5.5 – 11 เมตร ) และราก ( Kumar Reddy , 2010 Kumar et al . ,2010a , B , C ) เปอร์เซ็นต์การยิงถูกรากต่อ หลังจาก 4 สัปดาห์ ถอนยอดอย่างออกมาจากกลางและล้างให้สะอาดปลอดเชื้อในน้ำกลั่นเอาพื้นฐาน MS ที่ติดกับราก พืชที่ถูกโอนไปยังถุงพลาสติกที่มีคุณภาพดินและทรายในอัตราส่วน 1 : 1 และเปียกด้วย 002 % ( w / v ) เกิดและปกคลุมด้วยถุงพลาสติกใส เพื่อรักษาความชื้น หลังจาก 3 – 4 สัปดาห์ สร้างพืชที่ถูกโอนไปยังเรือนกระจก ( 3C อุณหภูมิ 25 และความชื้นสัมพัทธ์ 70 – 80 % ) สำหรับการเจริญเติบโตต่อไปและจำนวนต้นรอดตายได้ถูกบันทึกไว้หลังจากอีก 6 - 8 สัปดาห์
2.5 และการวิเคราะห์ข้อมูล
สภาพวัฒนธรรมเงื่อนไขวัฒนธรรมเครื่องแบบที่ใช้ในการทดลอง พีเอชของอาหารปรับ 5.7 โดยใช้ 1 N เกาะหรือ HCl ก่อนอัตราส่วนโฟกัสที่
1.05 กิโลกรัม / cm2pressure ที่ 121c 20 นาที วัฒนธรรมถูกเก็บรักษาไว้ที่ 25 2 ◦ C ภายใต้แสงที่มีความเข้มแสง 16 ชั่วโมง 35 – 40 mol m −− 2s 1
( เย็นflสีขาวหลอด uorescent ) การทดลองทั้งหมดถูกสร้างขึ้นในแบบ
แผนการทดลองแบบสุ่มตลอด ( fcrd ) และทำซ้ำสามครั้งกับ 25 ซ้ำต่อด้วยหนึ่งต่อการต่อหลอดทดสอบ ข้อมูลถูกวิเคราะห์ความแปรปรวน ( ANOVA ) วิเคราะห์ข้อมูลโดยหาค่าร้อยละ fcrd สี่ปัจจัยสองปัจจัย ( บั๊ดเหนี่ยวยิงและการวิเคราะห์สำหรับยิงยืดตัวและขจัดการใช้แพคเกจซอฟต์แวร์พื้นฐาน ( มหาวิทยาลัยเกษตรอานันท์รัฐคุชราตอินเดีย ) ที่ 5% น่าจะเป็นระดับ ความแตกต่างทางสถิติระหว่างวิธีวิเคราะห์โดย Multiple Range test ดันแคนโดยใช้โปรแกรมสำเร็จรูป SPSS ( 7.5 ) ผลลัพธ์ที่ได้แสดงเป็นค่าเฉลี่ยความคลาดเคลื่อนมาตรฐานของสามการทดลองที่เป็นอิสระ
3 ผลลัพธ์
3.1 . ผลของไทเดียซูรอนยิงบั๊ดเหนี่ยว
ความเข้มข้นของยอดในกลาง signi จึงลดลงอย่างมีนัยสําคัญเมื่อในfl uenced การตอบสนองของบั๊ดเหนี่ยวยิงไม่โต ) เปอร์เซ็นต์การยิงการยิงของตาและตาต่อต่อเป็นสัดส่วนโดยตรงกับ concentrat ของยอด . ของระดับความเข้มข้นของไทเดียซูรอนทดสอบเปอร์เซ็นต์สูงสุดของยิงบั๊ดเหนี่ยว ( 6697 ) จำนวนสูงสุดของการรับถ่ายภาพ ( 13.76 ) ต่อต่อจำนวนและ
พบต่อหน้า 9.08 M TDZ ระหว่างพันธุ์ ) อย่างไรก็ตาม การส่งเสริมและการยืดตัวของตา ยิงถูกยับยั้งเนื่องจาก com