2.4. Assay of protease activityThe

2.4. Assay of protease activity
The proteolytic activity was determined at pH 6.0 by the casein
digestion method described previously [37]. In brief, 5ml of 1.2%
of casein solution in 0.05M phosphate buffer (pH 6.0) was added
1ml of enzyme solution, and the mixture was incubated at 35 ◦C
for 10min. After incubation, 5ml (0.44M) of tri-chloroacetic acid
(TCA) was added to quench the reaction, which was followed by
filtration. 2ml of the above filtrate was added 5 ml NaOH (0.28 N)
solution and 1.5ml phenol reagent (Folin-Ciocalteu phenol solution:
water = 1:2). After the mixture was kept at 35 ◦C for 15 min,
optical density (OD) at 660 nm was measured with a Hitachi spectrophotometer.
Ratio of the milk-clotting activity to proteolytic
activity is expressed as milk-clotting units (SU) per the OD660’s
obtained in the proteolytic measurements. Protein determination
was according to the method of Lowry et al. [38

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.4 การวิเคราะห์กิจกรรมรติเอสกิจกรรม proteolytic กำหนดที่ pH 6.0 โดยเคซีนย่อยอาหารวิธีอธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [37] ในมล 5 ย่อ 1.2%ของเคซีนใน 0.05M ฟอสเฟต บัฟเฟอร์ (pH 6.0) ถูกเพิ่ม1ml ของเอนไซม์ และส่วนผสมที่ incubated ที่ 35 ◦Cสำหรับ 10 นาที หลังจากบ่ม 5ml (0.44M) ของกรด chloroacetic ตรี(TCA) ถูกเพิ่มเข้ามาเพื่อแก้ปฏิกิริยา ซึ่งด้วยกรอง 2ml ของสารกรองข้างเพิ่ม 5 ml NaOH (0.28 N)รีเอเจนต์วางโซลูชันและ 1.5ml (Folin-Ciocalteu วางโซลูชัน:น้ำ = 1:2) หลังจากผสมถูกเก็บไว้ที่ 35 ◦C สำหรับ 15 นาที(OD) ความหนาแน่นออปติคัลที่ 660 nm ได้วัด ด้วยเครื่องทดสอบกรดด่างเป็นฮิตาชิอัตราส่วนของการแข็งตัวนมกิจกรรม proteolyticกิจกรรมจะแสดงเป็นหน่วยนมแข็งตัว (SU) ต่อของ OD660ได้รับในการวัด proteolytic เรื่องโปรตีนถูกตามวิธีการของ Lowry et al. [38

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4 Assay
ของกิจกรรมน้ำย่อยกิจกรรมโปรตีนก็ตัดสินใจที่pH 6.0
โดยเคซีนวิธีการย่อยอาหารที่อธิบายไว้ก่อนหน้า[37] ในช่วงสั้น ๆ 5ml 1.2%
ของการแก้ปัญหาเคซีนใน 0.05M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 6.0) ถูกบันทึก
1ml ของการแก้ปัญหาการทำงานของเอนไซม์และส่วนผสมที่ถูกบ่มที่ 35
◦Cสำหรับ10 นาที หลังจากบ่ม 5ml (0.44M) ของกรดไตร chloroacetic
(TCA)
ถูกบันทึกอยู่ในดับปฏิกิริยาซึ่งตามมาด้วยการกรอง 2ml ของกรองดังกล่าวข้างต้นได้ถูกเพิ่ม NaOH 5 มล. (0.28 N)
วิธีการแก้ปัญหาและสารฟีนอล 1.5ml (Folin-Ciocalteu แก้ปัญหาฟีนอล:
น้ำ = 1: 2) หลังจากที่ส่วนผสมที่ถูกเก็บไว้ที่ 35 ◦Cเป็นเวลา 15 นาที,
ความหนาแน่นของแสง (OD) ที่ 660 นาโนเมตรวัดกับ บริษัท ฮิตาชิ spectrophotometer.
อัตราส่วนของกิจกรรมการแข็งตัวของนมโปรตีนเพื่อกิจกรรมที่จะแสดงเป็นหน่วยนมจับตัวเป็นลิ่ม (SU) ต่อ OD660 ที่ได้รับในการวัดโปรตีน ความมุ่งมั่นของโปรตีนได้ตามวิธีการของคอรีเอตอัล [38

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4 . วิเคราะห์กิจกรรมของโปรติเอส
กิจกรรมวิเคราะห์โปรตีนที่ pH 6.0 โดยเคซีน
การย่อยอาหารวิธีที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [ 37 ] สังเขป ก 1.2 %
ของเคซีนใน 0.05m สารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ( pH 6.0 ) เพิ่ม
1ml ของสารละลายเอนไซม์ และส่วนผสมที่ถูกบ่มที่อุณหภูมิ 35 ◦ C
สำหรับวัน หลังจากระยะเวลา 5 ( 0.44m ) ตรีสินทรัพย์ต้นทุนต่ำ
( TCA ) ถูกเพิ่มเข้ามาเพื่อดับเกิดปฏิกิริยาซึ่งตาม
การกรอง 2ml ของกรองข้างต้นเพิ่ม NaOH 5 ml ( 0.28 )
1.5ml ฟีนอลโซลูชั่น และสารเคมี ( folin ciocalteu ฟีนอล โซลูชั่น :
น้ำ = 1 : 2 ) หลังจากที่ผสมไว้ที่ 35 ◦เป็นเวลา 15 นาที
ซิกแซ็ก ( OD ) ที่ 660 nm เป็นวัดที่มีฮิตเตอร์
สัดส่วนของนมโปรตีน
clotting กิจกรรมกิจกรรมแสดงเป็นนมแข็งตัว ( ซู ) ต่อหน่วยของ od660
ได้ในการวัดระ . โปรตีนปริมาณ
เป็นตามวิธีการของโลว์รีย์ et al . [ 38