3. Experimental3.1. Genernal experi

3. Experimental
3.1. Genernal experimental procedures

Optical rotations were measured on a JASCO P-2000 polarimeter, and UV spectra with a JASCO V-650 spectrophotometer. IR spectra were recorded on a Nicolet 5700 spectrometer by an FT-IR microscope transmission method. NMR measurements were performed on BRUKER AV500-III spectrometers. We are sorry for our incorrected wording. HRESIMS were obtained using a micromass Autospec-Ultima ETOF spectrometer. Analytical HPLC was conducted on an Agilent 1260 infinity system equipped with a DAD-UV detector. Preparative HPLC was performed using a Shimadazu LC-6AD instrument with a SPD-20A detector and a YMC-Pack ODS-A column (250 × 20 mm, 5 μm). Silica gel (200–300 mesh, Qingdao Marine Chemical Factory, Qingdao, People’s Republic of China), Sephadex LH-20 (GE), and ODS (50 μm, YMC, Japan) were used for column chromatography. TLC was carried out with GF254 plates (Qingdao Marine Chemical Factory).

3.2. Plant material

The rhizomes of I. tectorum investigated in this study were purchased in November, 2011 from a herbal medicine market in Chengdu, Sichuan Province, People’s Republic of China. The plant material was authenticated by Professor Lin Ma, Institute of Materia Medica, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College. A voucher specimen (ID-S-2469) is deposited at the Herbarium of the Department of Medicinal Plants, the Institute of Materia Medica, Chinese Academy of Medical Sciences, Beijing.

3.3. Extraction and isolation

The air-dried powdered rhizomes of I. tectorum (20 kg) were extracted three times with 95% EtOH under reflux. The extracts were combined and concentrated under a vacuum to yield a residue (4 kg), which was suspended in water and partitioned sequentially with EtOAc and n-BuOH. The EtOAc extract (2 kg) was chromatographed on a silica gel column and eluted with petroleum ether-acetone (20:1, 3:1, 1:1, and 0:1). The fraction (120 g) that eluted with acetone was subjected to a reversed-phase C18 silica gel column (80 × 6 cm), eluted with 10%, 30%, 50%, 70%, and 100% MeOH in H2O, to afford six fractions (F1–F5). Fraction 2 (124 mg) was submitted to Sephadex LH-20 (CHCl3/MeOH, 1:1) to produce four subfractions (F2a–F2c), F2a was purified by preparative HPLC (22% MeCN/H2O, 5 mL/min) to afford 1 (13 mg, tR 89.9 min). F2c was subjected to preparative HPLC (25% MeCN/H2O, 5 mL/min) to give 2 (32 mg, tR 68.4 min). Recrystallization of fraction 3 and fraction 5 from methanol yielded compound 3 (170 mg) and compound 4 (35 mg), respectively.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3. ทดลอง3.1 Genernal ขั้นตอนการทดลองหมุนเวียนแสงถูกวัด polarimeter JASCO P 2000 และแรมสเป็คตรา UV กับเป็นเครื่องทดสอบกรดด่าง JASCO V 650 IR แรมสเป็คตราถูกบันทึกไว้ในสเปกโตรมิเตอร์ Nicolet 5700 โดยวิธีการส่งกล้องจุลทรรศน์ FT-IR NMR วัดได้ดำเนินการในตรวจ BRUKER AV500 III ขออภัยใช้คำ incorrected ของเรา HRESIMS ได้รับมาใช้ micromass ETOF Autospec ทวีดอัลติมาสเปกโตรมิเตอร์ วิเคราะห์ HPLC ได้ดำเนินระบบ Agilent 1260 อินฟินิตี้พร้อมจับพ่อ-UV ทำ preparative HPLC โดยใช้เครื่องมือ Shimadazu LC-6AD จับ SPD-20A และคอลัมน์ ODS A YMC Pack (250 × 20 มม. 5 μm) ซิลิก้าเจล (200 – 300 ตาข่าย โรงงานเคมีทางทะเลชิง ชิงเต่า สาธารณรัฐประชาชนจีน), Sephadex LH 20 (GE), และ ODS (μm 50, YMC ญี่ปุ่น) ถูกใช้สำหรับคอลัมน์ chromatography TLC ที่ดำเนิน ด้วยแผ่น GF254 (ชิงเต่าทะเลโรงงานเคมี)3.2. พืชวัสดุเหง้าของ I. tectorum ตรวจสอบในการศึกษานี้ซื้อในเดือนพฤศจิกายน 2011 จากตลาดยาสมุนไพรในเฉิงตู เสฉวน สาธารณรัฐประชาชนจีน วัสดุโรงงานได้รับรองความถูกต้อง โดยศาสตราจารย์ Lin Ma สถาบันฮัทสุ Materia Medica สถาบันวิทยาศาสตร์การแพทย์และวิทยาลัยการแพทย์สหภาพปักกิ่งจีน ตัวอย่างสำคัญ (รหัส S 2469) ส่งที่หอพรรณไม้ของกรมของพืชยา สถาบันของฮัทสุ Materia Medica จีน Academy ของวิทยาศาสตร์การแพทย์ ปักกิ่ง3.3 การสกัดและแยกเหง้าบดละเอียด air-dried ของ tectorum I. (20 กิโลกรัม) ถูกสกัดสามครั้ง ด้วย 95% EtOH ภายใต้ป้องกันกรดไหลย้อน สารสกัดได้รวม และเข้มข้นภายใต้สุญญากาศให้มีสารตกค้าง (4 กก.), ซึ่งถูกหยุดชั่วคราวในน้ำ และกั้น ด้วย EtOAc และ n BuOH ตามลำดับ Chromatographed บนคอลัมน์เจล และ eluted ด้วยปิโตรเลียมอีเทอร์อะซีโตนสารสกัดจาก EtOAc (2 กก.) (20:1, 3:1, 1:1 และ 0:1) เศษส่วน (120 g) ที่ eluted ด้วยอะซีโตนถูกยัดเยียดให้ระยะกลับ C18 เจลคอลัมน์ (80 × 6 ซม.), eluted กับ 10%, 30%, 50%, 70% และ 100% ทานอใน H2O ซื้อได้ 6 เศษ (F1 – F5) เศษ 2 (124 มิลลิกรัม) ส่ง Sephadex LH-20 CHCl3/ทา นอ 1:1) การผลิตสี่ subfractions (F2a – F2c) F2a ได้บริสุทธิ์ โดย preparative HPLC (22% MeCN/H2O, 5 mL/min) ซื้อได้ 1 (13 มิลลิกรัม tR 89.9 นาที) ถูกต้อง F2c preparative HPLC (25% MeCN/H2O, 5 mL/min) ให้ 2 (32 มิลลิกรัม tR 68.4 นาที) Recrystallization 3 เศษส่วนและเศษส่วน 5 จากเมทานอลผลผสม 3 (170 มิลลิกรัม) และ 4 ผสม (35 มิลลิกรัม), ตามลำดับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3. การทดลอง
3.1 ขั้นตอนการทดลองระบบงานทั่วไปผลัด Optical วัดใน Polarimeter JASCO P-2000 และสเปกตรัมรังสียูวีที่มี spectrophotometer JASCO V-650 IR สเปกตรัมที่ถูกบันทึกไว้ใน Nicolet 5700 สเปกโตรมิเตอร์โดยวิธีการส่งผ่านกล้องจุลทรรศน์ FT-IR วัด NMR ได้ดำเนินการในสเปกโทรมิเตอร์ Bruker AV500-III ขออภัยในถ้อยคำ incorrected ของเรา HRESIMS ที่ได้รับใช้ micromass Autospec-Ultima ETOF สเปกโตรมิเตอร์ HPLC เพื่อการวิเคราะห์ได้ดำเนินการในระบบอินฟินิตี้ Agilent 1260 พร้อมกับเครื่องตรวจจับ DAD รังสียูวี เตรียม HPLC ได้รับการดำเนินการโดยใช้เครื่องมือ Shimadazu LC-6AD กับเครื่องตรวจจับ SPD-20A และ YMC แพ็ค ODS-คอลัมน์ A (250 × 20 มม 5 ไมครอน) ซิลิก้าเจล (200-300 ตาข่ายชิงเต่าทะเลโรงงานเคมีชิงเต่าสาธารณรัฐประชาชนจีน) Sephadex LH-20 (GE) และ ODS (50 ไมครอน, YMC ญี่ปุ่น) ถูกนำมาใช้สำหรับคอลัมน์ TLC ได้ดำเนินการด้วยแผ่น GF254 (เต่าทะเลโรงงานเคมี). 3.2 วัสดุปลูกเหง้าของฉัน tectorum การตรวจสอบในการศึกษานี้ถูกซื้อในเดือนพฤศจิกายน 2011 จากตลาดยาสมุนไพรในเฉิงตูมณฑลเสฉวนสาธารณรัฐประชาชนจีน วัสดุที่ได้รับการรับรองความถูกต้องของพืชโดยศาสตราจารย์หลิน Ma สถาบันเภสัชวิทยาจีน Academy วิทยาศาสตร์การแพทย์และปักกิ่งสมาคมวิทยาลัยการแพทย์ ตัวอย่างบัตรกำนัล (ID-S-2469) เป็นเงินฝากที่หอพรรณไม้ของกรมพืชสมุนไพรสถาบันเภสัชวิทยาจีน Academy วิทยาศาสตร์การแพทย์, ปักกิ่ง. 3.3 การสกัดและการแยกเหง้าอากาศแห้งผง I. tectorum (20 กิโลกรัม) ถูกสกัดสามครั้งกับ 95% ภายใต้ EtOH กรดไหลย้อน สารสกัดมารวมกันและเข้มข้นภายใต้สูญญากาศที่จะให้ผลผลิตสารตกค้าง (4 กิโลกรัม) ซึ่งถูกระงับในน้ำและแบ่งพาร์ติชันตามลำดับด้วย EtOAc และ n-BuOH สารสกัด EtOAc (2 กก.) ได้รับการ chromatographed ในคอลัมน์ซิลิกาเจลและชะกับอีเทอร์อะซีโตนปิโตรเลียม (20: 1, 3: 1, 1: 1 และ 0: 1) ส่วน (120 กรัม) ที่ชะด้วยอะซิโตนถูกยัดเยียดให้กลับเฟส C18 คอลัมน์ซิลิกาเจล (80 × 6 เซนติเมตร) ชะ 10%, 30%, 50%, 70% และ 100% เมธานอลใน H2O เพื่อ จ่ายหกเศษส่วน (F1-F5) ส่วน 2 (124 มก.) ถูกส่งไปยัง Sephadex LH-20 (CHCl3 / เมธานอล, 1: 1) การผลิตสี่ subfractions (F2A-f2c) F2A บริสุทธิ์โดยเตรียม HPLC (22% MeCN / H2O 5 มิลลิลิตร / นาที) ที่จะจ่าย 1 (13 มก., TR 89.9 นาที) f2c ได้ภายใต้การเตรียม HPLC (25% MeCN / H2O 5 มิลลิลิตร / นาที) เพื่อให้ 2 (32 มก., TR 68.4 นาที) recrystallization ของส่วนที่ 3 และส่วนที่ 5 จากเมทานอลให้ผลสารประกอบ 3 (170 มิลลิกรัม) และสารประกอบที่ 4 (35 มก.) ตามลำดับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3 . 2
1 . Genernal ทดลองขั้นตอน

แสงหมุนเป็นวัดอยู่บน jasco p-2000 โพลาริมิเตอร์ และ UV ให้กับ jasco v-650 วัสดุ IR spectra ที่ถูกบันทึกไว้ใน nicolet 5700 กล้องอินฟราเรดกล้องจุลทรรศน์ส่งโดยวิธี โดยการวัดจำนวน BRUKER av500-iii า . we are อยู่ for wording incorrected our .hresims ได้โดยใช้ micromass autospec Ultima etof สเปกโตรมิเตอร์ วิเคราะห์และดำเนินการในด้าน 1260 Infinity ระบบพร้อมกับ dad-uv เครื่องตรวจจับ เตรียมพบการใช้ shimadazu lc-6ad เครื่องดนตรีที่มีเครื่องตรวจจับ spd-20a และคอลัมน์ ymc แพ็ค ods-a ( 250 × 20 มม. , 5 μ M ) ซิลิกาเจล ( 200 – 300 ตาข่าย , โรงงานเคมี , ทะเลชิงเต่า ชิงเต่าสาธารณรัฐประชาชนจีน ) สามารถ lh-20 ( GE ) , และ ODS ( 50 μ M , ymc , ญี่ปุ่น ) ใช้สำหรับโครมาโตกราฟีคอลัมน์ ทีแอลซีดำเนินการกับ gf254 จาน ( โรงงานเคมีทางทะเลเต่า ) .

. . วัสดุปลูก

ผม tectorum เหง้า โดยการศึกษานี้ถูกซื้อในเดือนพฤศจิกายน 2011 จากตลาดสมุนไพรในเฉิงตู มณฑลเสฉวน สาธารณรัฐประชาชนจีนวัสดุปลูกที่ถูกรับรองโดยศาสตราจารย์หลินมา สถาบัน Materia เมดิ , จีนออสการ์ของศาสตร์ทางการแพทย์ และปักกิ่ง วิทยาลัยแพทย์สหภาพ คูปองตัวอย่าง ( id-s-2469 ) เป็นเงินที่หอพรรณไม้กรม พืชสมุนไพร สถาบันของ Materia เมดิ , จีน Academy of Sciences การแพทย์ปักกิ่ง

3 . ผู้จัดการ ( Food เก็บกวาดเก็บกวาดอากาศแห้งผงเหง้าฉัน tectorum ( 20 กก. ) ถูกสกัดด้วยแอลกอฮอล์ 95 % 3 ครั้งในการย้อน สารสกัดถูกรวมและเข้มข้นภายใต้สุญญากาศเพื่อผลผลิตตกค้าง ( 4 กิโลกรัม ) ที่แขวนลอยในน้ำและเพิ่มความสามารถด้วย etoac และนอร์มัล - บิวทานอล . การ etoac สกัด ( 2 กิโลกรัม ) คือ chromatographed บนซิลิกาเจลคอลัมน์ตัวอย่างด้วยอะซีโตนและปิโตรเลียมอีเทอร์ ( 20 : 1 : 1 3 11 และ 0 : 1 ) the fraction ใน g ) that eluted with acetone เขาเต็มเปี่ยม to a gel silica c18 reversed-phase ทางขวาใช้ 80 × 6 cm ่ eluted with 10 % , 30 % , 50 % ัน % , ( เหรียญเช่น meoh in วัตถุดิบ , to afford six fractions ( f1 – f5 ) . ส่วนที่ 2 ( 124 มิลลิกรัม ) สามารถถูกส่งไปยัง lh-20 ( chcl3 / ปริมาณ 1 : 1 ) เพื่อผลิตสี่ subfractions ( f2a – f2c ) f2a บริสุทธิ์โดยเตรียม HPLC ( 22% mecn / H2O ,5 ml / min ) จ่าย 1 ( 13 มก. , TR 89.9 มิน ) f2c ภายใต้เบื้องต้น 2 ( 25 % mecn / H2O , 5 มิลลิลิตรต่อนาที ) เพื่อให้ 2 ( 32 มิลลิกรัม , TR 68.4 มิน ) การตกผลึกของเศษส่วนเศษส่วน 3 และ 5 จากเมทานอลพบสารประกอบ 3 ( 170 มก. ) และสารประกอบ 4 ( 150 มก. ) ตามลำดับ