To compare aptamer-based downstream

To compare aptamer-based downstream processing directly

with conventional IMAC, we have purified BSTE-His and

PFEI-His from crude E. coli lysates utilizing 6H5- and 6H7-

modified magnetic beads as well as Co2þ-loaded membrane

adsorbers. The eluates of the different purification processes

were analyzed by SDS–PAGE (Fig. 6). Both proteins

could be successfully purified with 6H5-and 6H7-modified

magnetic beads and IMAC. The purity of the his-tagged

proteins was determined by densitometry. For PFEI-His a

purity of 84% for the purification via 6H5-modified

magnetic beads and 80% for the purification via 6H7-

modified magnetic beads was calculated. These values are

comparable to the purity determined for IMAC (77%). In

case of BSTE-His, the aptamer-based downstream proces-
sing resulted in purities of 58% for 6H5-modified beads and

77% for 6H7-modified beads, while IMAC resulted in 85%

purity. In summary, we were able to purify PFEI-His and

BSTE-His via 6H7- and 6H5 modified magnetic beads with

purification efficiencies in the same range determined for

IMAC.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การเปรียบเทียบคะแนน aptamer ปลายการประมวลผลโดยตรงมี IMAC ธรรมดา ที่เราบริสุทธิ์ BSTE พระองค์ และPFEI ของเขาจาก lysates ดิบ E. coli ใช้ 6H 5 - และ H 7 - 6เม็ดแม่เหล็กดัดรวมทั้งโหลด Co2þ เมมเบรนadsorbers Eluates กระบวนการบำบัดที่แตกต่างกันถูกวิเคราะห์ โดย SDS – หน้า (6 รูป) ทั้งโปรตีนสามารถบริสุทธิ์เรียบร้อยกับ 6H 5-6 ชม. 7 และ -แก้ไขเม็ดแม่เหล็กและ IMAC ความบริสุทธิ์ของตัวพระแท็กโปรตีนดโดยชมีความหนาแน่น สำหรับ PFEI ของเขาบริสุทธิ์บริสุทธิ์ผ่าน 6H 5% 84-แก้ไขเม็ดแม่เหล็กและการทำให้บริสุทธิ์ผ่าน 6H 7 - 80%เม็ดแม่เหล็กดัดที่คำนวณ ค่าเหล่านี้จะเทียบได้กับความบริสุทธิ์ที่กำหนดสำหรับ IMAC (77%) ในกรณีของพระ BSTE ที่คะแนน aptamer ปลายน้ำลง-สิงห์ส่งผล purities 58% สำหรับ 6H 5-แก้ไขลูกปัด และ77% สำหรับ 6H 7-แก้ไขลูกปัด ในขณะที่ IMAC ทำให้ 85%ความบริสุทธิ์ ในสรุป เราได้มีการทำให้บริสุทธิ์ของพระองค์ PFEI และBSTE พระองค์ผ่าน 6H 7 และ 6 ชั่วโมง 5 ปรับเม็ดแม่เหล็กด้วยประสิทธิภาพการบำบัดในช่วงเดียวกับที่กำหนดสำหรับIMAC

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เพื่อเปรียบเทียบการประมวลผลปลายน้ำ aptamer ตามโดยตรงกับการชุมนุม IMAC เราได้บริสุทธิ์ BSTE ของเขาและPFEI ของเขาจากน้ำมันดิบ E. coli lysates ใช้ 6H5- และ 6H7- ปรับเปลี่ยนลูกปัดแม่เหล็กเช่นเดียวกับCo2þโหลดเยื่อadsorbers eluates ของกระบวนการทำให้บริสุทธิ์ที่แตกต่างกันถูกนำมาวิเคราะห์โดยวิธี SDS-PAGE (รูปที่. 6) โปรตีนทั้งสองอาจจะประสบความสำเร็จกับบริสุทธิ์ 6H5 และ 6H7 แก้ไขลูกปัดแม่เหล็กและ IMAC ความบริสุทธิ์ของเขาที่ติดแท็กโปรตีนถูกกำหนดโดยความหนาแน่น สำหรับ PFEI-ของพระองค์มีความบริสุทธิ์ 84% สำหรับการทำให้บริสุทธิ์ผ่าน 6H5 แก้ไขลูกปัดแม่เหล็กและ 80% สำหรับการทำให้บริสุทธิ์ผ่าน 6H7- ลูกปัดแม่เหล็กปรับเปลี่ยนที่คำนวณได้ ค่าเหล่านี้เปรียบได้กับความบริสุทธิ์ที่กำหนดสำหรับ IMAC (77%) ในกรณีของ BSTE ของเขาที่ aptamer ตาม proces- ปลายน้ำร้องเพลงผลใน purities 58% สำหรับ 6H5 แก้ไขลูกปัดและ77% สำหรับ 6H7 แก้ไขลูกปัดขณะ IMAC ผลใน 85% ความบริสุทธิ์ โดยสรุปเรามีความสามารถในการชำระล้าง PFEI ของเขาและBSTE ของเขาผ่านทาง 6H7- และ 6H5 ปรับเปลี่ยนลูกปัดแม่เหล็กที่มีประสิทธิภาพการฟอกอยู่ในช่วงเดียวกับที่กำหนดสำหรับIMAC

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เปรียบเทียบ aptamer การประมวลผลโดยตรงท้ายกับ iMac ธรรมดา เราก็บริสุทธิ์ bste ของเขาและpfei ของเขาจากการสกัดเชื้อ E . coli lysates ใช้ 6h5 6h7 - - และดัดแปลงแม่เหล็กลูกปัดเป็น CO2 þเมมเบรน - โหลดadsorbers . การ eluates ของกระบวนการผลิตต่าง ๆวิเคราะห์โดย SDS - หน้า ( รูปที่ 6 ) ทั้งโปรตีนสามารถชำระด้วย 6h5 6h7 ดัดแปลงและลูกปัดแม่เหล็กและ iMac . ความบริสุทธิ์ของพระองค์ ติดแท็กโปรตีนที่ถูกกำหนดโดย densitometry . สำหรับ pfei ของเขาความบริสุทธิ์ของ 84 % สำหรับการทำให้บริสุทธิ์ผ่าน 6h5 ครั้งเม็ดแม่เหล็ก และ 80% สำหรับการ 6h7 - ผ่านดัดแปลงแม่เหล็กลูกปัดคือการคํานวณ ค่าเหล่านี้คือเทียบได้กับความบริสุทธิ์อย่าง iMac ( 77 เปอร์เซ็นต์ ) ในกรณีของ bste ของเขา aptamer ตามกระบวนการปลายน้ำ -ร้องให้ความบริสุทธิ์ของ 58 % 6h5 ดัดแปลง ลูกปัด77 % 6h7 ดัดลูกปัดในขณะที่ iMac ให้ 85%ความบริสุทธิ์ โดยสรุปเราสามารถชำระ pfei ของเขาและbste ของเขาผ่านทาง 6h7 - 6h5 ดัดแปลงแม่เหล็กเม็ดกับการพิจารณาประสิทธิภาพในช่วงเดียวกันiMac .