2.9. Fatty acid analysis
Lipids were extracted using chloroform/methanol solution (2:1,
v/v) according to Folch et al. (1957). Fatty acid methyl esters
(FAME) analyses were performed according to method described
by Van Nieuwenhove et al. (2009, 2011). Briefly, lipids were
hydrolyzed by addition of 3 mL of 0.9% (w/v) NaOH in methanol at
50 8C for 35 min. Fatty acids were methylated using 4% (v/v) HCl in
methanol at 60 8C for 20 min, then extracted with hexane and
evaporated under a nitrogen stream. One microlitre of FAME,
dissolved in hexane, was injected to an Agilent Technologies (Palo
Alto, CA, USA) gas chromatograph (Model 6890N, USA) equipped
with a flame ionization detector and automatic injector (Model
7683, USA) into a HP-88 capillary column
(100 m 0.25 mm 0.20 mm, Agilent Technologies, USA). GC
conditions were: injector temperature, 255 8C; the initial oven
temperature of 75 8C was increased to 165 8C at 8 8C/min and held
there for 35 min, increased to 210 8C at 5.5 8C/min and held for
2 min and then increased to 240 8C at 15 8C/min and held for 3 min.
Detector temperature was 280 8C. Oxygen-free nitrogen was used
as carrier gas at flow rate of 18 mL/min, at 38 psi. The total time of
the oven programme was 72 min. Fatty acids were identified by
comparison of retention times with the methylated standards (99%
pure; Sigma, St. Louis, MO, USA). Results were expressed as g/100 g
of fatty acids. All reagents and solvents used were from Merck
(Darmstadt, Germany).
2.9 การวิเคราะห์กรดไขมันไขมันถูกสกัดโดยใช้คลอโรฟอร์ม / แก้ปัญหาเมทานอล (2: 1, v / v) ตาม Folch et al, (1957) ไขมันเมทิลเอสเตอร์ของกรด(FAME) วิเคราะห์ได้ดำเนินการตามวิธีการที่อธิบายไว้โดยรถตู้Nieuwenhove et al, (2009 2011) สั้น ๆ , ไขมันที่ถูกย่อยสลายโดยนอกเหนือจาก3 มิลลิลิตร 0.9% (w / v) NaOH ในเมทานอลที่50 8C 35 นาที กรดไขมันถูก methylated โดยใช้ 4% (v / v) HCl ในเมทานอลที่60 8C 20 นาทีที่สกัดแล้วกับเฮกเซนและระเหยภายใต้กระแสไนโตรเจน หนึ่งไมโครลิตรเกียรติยศละลายในเฮกเซนถูกฉีดไปยัง Agilent Technologies (Palo Alto, CA, USA) ก๊าซ Chromatograph (รุ่น 6890N สหรัฐอเมริกา) ติดตั้งกับเครื่องตรวจจับไอออนไนซ์เปลวไฟและหัวฉีดอัตโนมัติ(รุ่น7683, สหรัฐอเมริกา) ลง HP- 88 คอลัมน์ฝอย(100 เมตร? 0.25 มม? 0.20 มม Agilent Technologies, สหรัฐอเมริกา) GC เงื่อนไขที่อุณหภูมิหัวฉีด 255 8C; เตาอบเริ่มต้นที่อุณหภูมิ 75 8C เพิ่มขึ้นเป็น 165 8C ที่ 8 8C / นาทีและจัดขึ้นที่นั่นเป็นเวลา35 นาทีเพิ่มขึ้นถึง 210 8C ที่ 5.5 8C / นาทีและจัดขึ้นเป็นเวลา2 นาทีและจากนั้นเพิ่มขึ้นถึง 240 8C 15 8C / นาทีและ ที่จัดขึ้นเป็นเวลา 3 นาที. อุณหภูมิเครื่องตรวจจับเป็น 280 8C ไนโตรเจนที่ปราศจากออกซิเจนถูกใช้เป็นก๊าซที่อัตราการไหล 18 มิลลิลิตร / นาทีที่ 38 ปอนด์ต่อตารางนิ้ว รวมเวลาของโปรแกรมเตาอบ 72 นาทีเป็น กรดไขมันที่ถูกระบุโดยเปรียบเทียบเวลาการเก็บรักษาที่มีมาตรฐานสาร (99% บริสุทธิ์ซิกเซนต์หลุยส์สหรัฐอเมริกา) ผลลัพธ์ที่ได้แสดงเป็นกรัม / 100 กรัมของกรดไขมัน น้ำยาทั้งหมดและตัวทำละลายที่ใช้มาจากเมอร์ค(ดาร์มสตัด, เยอรมนี)
การแปล กรุณารอสักครู่..
