2.6. On-line HPLC–DAD–DPPH assaysOn

2.6. On-line HPLC–DAD–DPPH assays
On-line HPLC–DAD–DPPH assays were employed to investigate
and evaluate the free radical scavenging activity of compounds with
antioxidation in tea samples. On-line HPLC–DPPH method combines
a separation technique with fast post-column chemical detection
that can rapidly pinpoint the active compounds in complex mixtures.
The separated analytes reacted post-column with the DPPH solution
and compounds with antioxidation would bleach of the latter. In
the second high performance liquid chromatography, the DPPH radical
solution acted as mobile phase and as a background at 517 nm.
The reaction of antioxidants with DPPH radical would reduce the concentration
of DPPH radical and lower the absorbance and then provide
a negative peak on a constant background signal, while for
those without antioxidants effects would not change the constant
background signal (Niederländer et al., 2008).
This on-line assay was performed by using the method introduced
by Koleva et al. (2000) and Niederländer et al. (2008) with slight
modifications as shown in Fig. 1. The extracts (20 μL) were injected
into an HPLC system. HPLC separation was carried out as described
in the previous section. HPLC eluated compounds arrived to a
T-junction, where the methanolic DPPH solution with the concentration
of 6 × 10−5 mol/L was delivered via another LC pump with a
flow rate of 0.8 mL/min. After the eluates mixed with DPPH solution
in a reaction coil (10 m × 0.254 mm i.d. PEEK tubing), the negative
peaks were measured at 517 nm by DAD

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.6 ง่ายดาย HPLC – พ่อ – DPPH assaysง่ายดาย assays HPLC – พ่อ – DPPH ได้จ้างสืบและประเมินกิจกรรม scavenging อนุมูลอิสระของสารด้วยantioxidation ในตัวอย่างชา รวมวิธี HPLC-DPPH ง่ายดายเทคนิคการแยก ด้วยการตรวจหาสารเคมีอย่างรวดเร็วหลังคอลัมน์นอกจากนี้ที่รวดเร็วสามารถระบุสารที่ใช้งานอยู่ในส่วนผสมที่ซับซ้อนคอลัมน์หลัง ด้วยโซลูชัน DPPH analytes แยกปฏิกิริยาที่เกิดขึ้นและสารประกอบกับ antioxidation จะฟอกสีของหลัง ในสองประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography, DPPH ที่รุนแรงแก้ปัญหาดำเนิน เป็นระยะที่เคลื่อนที่ และ เป็นพื้นหลังที่ 517 nmปฏิกิริยาของสารต้านอนุมูลอิสระด้วย DPPH รุนแรงจะช่วยลดความเข้มข้นของอนุมูล DPPH ลด absorbance ที่ และแล้วสูงสุดเป็นค่าลบบนสัญญาณพื้นหลังคง ในขณะที่สำหรับที่ไม่ มีผลกระทบของสารต้านอนุมูลอิสระจะไม่เปลี่ยนแปลงค่าคงที่พื้นหลังสัญญาณ (Niederländer et al., 2008)ทำการทดสอบนี้ง่ายดาย โดยใช้วิธีที่แนะนำโดย Koleva et al. (2000) และ Niederländer et al. (2008) ด้วยเล็กน้อยปรับเปลี่ยนตามที่แสดงใน Fig. 1 มีฉีดสารสกัด (20 μL)เข้าระบบ HPLC แยก HPLC ได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ในส่วนก่อนหน้านี้ HPLC eluated สารถึงT-junction ที่โซลูชัน DPPH methanolic กับความเข้มข้นของ 6 × 10−5 โมล/L ถูกส่งผ่านปั๊ม LC อีกด้วยการอัตราการไหล 0.8 mL/นาที หลังจาก eluates ผสมกับโซลูชัน DPPHในปฏิกิริยาการม้วน (10 m × 0.254 mm ประชาชนมองท่อ) การลบยอดเขามีวัดที่ 517 nm โดยพ่อ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.6 ออนไลน์ตรวจ HPLC-DAD-DPPH
ออนไลน์ HPLC-DAD-DPPH
การตรวจที่ถูกว่าจ้างในการตรวจสอบและประเมินผลการต้านอนุมูลอิสระของสารที่มี
antioxidation ในตัวอย่างน้ำชา on-line วิธี HPLC-DPPH รวมเทคนิคการแยกที่มีการโพสต์คอลัมน์ตรวจจับสารเคมีได้อย่างรวดเร็วที่รวดเร็วสามารถระบุสารประกอบที่ใช้งานอยู่ในส่วนผสมที่ซับซ้อน. วิเคราะห์แยกปฏิกิริยาโพสต์คอลัมน์ที่มีการแก้ปัญหา DPPH และสารประกอบที่มี antioxidation จะฟอกขาวของหลัง ในประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography สอง DPPH รุนแรงแก้ปัญหาที่ทำหน้าที่เป็นเฟสเคลื่อนที่และเป็นพื้นหลังที่517 นาโนเมตร. ปฏิกิริยาของสารต้านอนุมูลอิสระที่มี DPPH รุนแรงจะลดความเข้มข้นของDPPH อนุมูลอิสระและลดการดูดกลืนแสงและจากนั้นให้ยอดเชิงลบบนสัญญาณพื้นหลังอย่างต่อเนื่องในขณะที่สำหรับผู้ที่ไม่มีผลกระทบสารต้านอนุมูลอิสระจะไม่เปลี่ยนคงที่สัญญาณพื้นหลัง(Niederländer et al., 2008). นี้ทดสอบในบรรทัดได้ดำเนินการโดยใช้วิธีการที่นำมาใช้โดย Koleva et al, (2000) และNiederländer et al, (2008) ที่มีเล็กน้อยการปรับเปลี่ยนดังแสดงในรูป 1. สารสกัด (20 ไมโครลิตร) ถูกฉีดเข้าไปในระบบHPLC แยก HPLC ได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ในส่วนก่อนหน้า HPLC eluated สารมาถึงไปยังสามแยกที่เมทานอลการแก้ปัญหาที่มีความเข้มข้นDPPH 6 × 10-5 โมล / ลิตรถูกส่งผ่านปั๊ม LC อื่นที่มีอัตราการไหล0.8 มิลลิลิตร / นาที หลังจาก eluates ผสมกับวิธีการแก้ปัญหา DPPH ในขดลวดปฏิกิริยา (10 เมตร× .254 มมท่อ PEEK ID) ลบยอดวัดที่517 นาโนเมตรโดย DAD

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.6 บนบรรทัด HPLC –พ่อ– dpph )
บนบรรทัด HPLC –พ่อ– dpph ) เพื่อหาความ
ประเมินและกำจัดอนุมูลอิสระของสารประกอบ
สารต้านออกซิเดชันในตัวอย่างชา บนบรรทัดและวิธี HPLC dpph รวม
เทคนิคแยกคอลัมน์โพสต์ได้อย่างรวดเร็วตรวจสารเคมี
ที่อย่างรวดเร็วสามารถระบุสารประกอบที่ใช้งานอยู่ในส่วนผสมที่ซับซ้อน .
การแยกสารทำปฏิกิริยากับสารละลายคอลัมน์โพสต์ dpph
และสารประกอบกับต้านจะฟอกสีของหลัง ใน
ประสิทธิภาพสูงที่สอง liquid chromatography , dpph หัวรุนแรง
โซลูชั่นรับบทเป็นเฟสเคลื่อนที่ และพื้นหลังที่ 517 nm .
ปฏิกิริยาของสารต้านอนุมูลอิสระที่มี dpph อนุมูลอิสระจะช่วยลดความเข้มข้นของ dpph
หัวรุนแรงและลดการดูดกลืนแสงและจากนั้นให้
สูงสุดลบสัญญาณพื้นหลังคงที่ในขณะที่
ไม่มีสารต้านอนุมูลอิสระผลจะเปลี่ยนสัญญาณพื้นหลังคงที่
( นีเดลและ nder et al . , 2008 ) .
3 ออนไลน์นี้ถูกทำโดย ใช้วิธีแนะนำ
โดย koleva et al . ( 2000 ) และ นีเดลและ nder et al . ( 2008 ) ด้วยการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย
ดังแสดงในรูปที่ 1 สารสกัด ( 20 μลิตร ) ฉีด
เป็น 2 ระบบการแยกและได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้
ในส่วนก่อนหน้า หา eluated สารประกอบมาถึง
สามแยกที่ dpph สารละลายเมทานอลกับความเข้มข้น
6 × 10 − 5 โมลต่อลิตร ส่งทางอื่น LC ปั๊มกับ
อัตรา 0.8 มิลลิลิตร / นาที หลังจาก eluates ผสมกับสารละลาย dpph
ในปฏิกิริยาม้วน ( 10 m × 0.254 มม. ท่อไอดี พีคลบ
)ยอดวัดที่ 517 nm โดยพ่อ