A subsample of 515 mg of the CH2Cl2

A subsample of 515 mg of the CH2Cl2 fraction was chromatographed
on a 5 × 14 cm flash column of silica gel. The sample was
dissolved in CHCl3 and eluted with increasing amounts of CH3OH in
CHCl3 [CHCl3, CHCl3−CH3OH (4:1, v/v), CHCl3−CH3OH (1:1),
CH3OH]. Fractions were combined on the basis of TLC, and fraction
E (194 mg) was found to have excellent selective activity in the twocell
assay (IC50 0.18 μg/mL in UO-31, 93 μg/mL in SF-295). Adjacent
fractions had lesser activity (D: 187 mg, IC50 0.91 μg/mL in UO-31,
>100 μg/mL in SF-295; F: 57 mg, IC50 14 μg/mL in UO-31, >100 μg/
mL in SF-295). Recovery of biological activity was judged acceptable
within the limits of assay precision. To guard against loss of activity in
the next step, C18 HPLC, an experiment was conducted wherein 10
mg of the active fraction from a parallel separation fraction from the
stem bark was applied to a prewashed Bondesil C18 SPE cartridge and
eluted with CH3OH, 50% CH3OH−THF, and then THF. The
fractions were tested in the tracking assay, and the methanol eluate was
found active against UO-31 cells (IC50 0.03 μg/mL), but not against
SF-295 cells (IC50 >100 μg/mL), while the THF eluates were entirely
inactive against either cell line. The parent fraction, tested in tandem,
was also extremely active against UO-31 but not SF-295 (IC50's 0.04
μg/mL, >100 μg/mL, respectively). This established that the bioactive
compounds could be eluted from a C18 column and that the conditions
of separation were unlikely to alter the active compounds in such a
way that activity would be destroyed.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Subsample ของเศษ CH2Cl2 515 มก.ถูก chromatographedบนเป็น 5 × 14 ซม.แฟลชคอลัมน์ของซิลิก้าเจล ตัวอย่างละลายใน CHCl3 และ eluted ด้วยการเพิ่มจำนวนของ CH3OH ในCHCl3 [CHCl3, CHCl3−CH3OH (4:1, v/v), CHCl3−CH3OH (1:1),CH3OH] เศษถูกรวมโดยใช้ TLC และเศษส่วนE (194 มิลลิกรัม) พบ มีกิจกรรมดีใช้ในการ twocellวิเคราะห์ (IC50 μg 0.18 mL ในอายุ 31, μg 93 mL ใน SF-295) อยู่ติดกันเศษส่วนที่มีกิจกรรมน้อย (d: 187 มิลลิกรัม IC50 μg 0.91 mL ในอายุ-31> μg 100 mL ใน SF-295 F: 57 มิลลิกรัม IC50 μg 14 mL ในอายุ 31, > 100 μg /มล.ใน SF-295) การฟื้นตัวของกิจกรรมทางชีวภาพถูกตัดสินยอมรับได้ภายในขีดจำกัดของความแม่นยำในการทดสอบ เพื่อป้องกันการขาดทุนของกิจกรรมในขั้นตอนต่อไป C18 HPLC วิธีการทดลองนั้น 10มิลลิกรัมของเศษส่วนใช้งานจากเศษแยกขนานจากการเปลือกก้านถูกนำไปใช้กับตลับหมึก Bondesil C18 SPE prewashed และeluted กับ CH3OH, 50% CH3OH−THF แล้ว THF ที่ทดสอบส่วนในวิเคราะห์ติดตาม และถูก eluate เมทานอลพบงานกับเซลล์อายุ 31 (IC50 μg 0.03 mL), แต่ไม่ต่อต้านSF-295 เซลล์ (IC50 > μg 100 mL), ในขณะที่ THF eluates ทั้งหมดไม่ทำงานกับรายการเซลล์ใด เศษส่วนหลัก ทดสอบตัวตามกันไปยังได้ถูกใช้งานมากกับอายุ 31 แต่ (0.04 ของ IC50 การ SF สินค้าการ 295 สินค้าไม่Μg/mL, > μg 100/mL ตามลำดับ) นี้ก่อตั้งขึ้นที่กรรมการกสารที่สามารถ eluted จากคอลัมน์ C18 และเงื่อนไขของแยกก็น่าจะเปลี่ยนสารใช้งานอยู่เช่นการวิธีที่ว่า กิจกรรมจะถูกทำลาย

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

subsample 515 มิลลิกรัมส่วน CH2Cl2 ถูก chromatographed
ใน 5 × 14 ซมคอลัมน์แฟลชของซิลิกาเจล ตัวอย่างที่ได้รับการละลายใน CHCl3 ชะและมีจำนวนที่เพิ่มขึ้นของ CH3OH ใน CHCl3 [CHCl3, CHCl3-CH3OH (4: 1, v / v), CHCl3-CH3OH (1: 1) CH3OH] เศษส่วนร่วมกันบนพื้นฐานของความเอาใจใส่และส่วนอี (194 มก.) พบว่ามีกิจกรรมเลือกที่ยอดเยี่ยมใน twocell ทดสอบ (IC50 0.18 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรใน UO-31 93 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรใน SF-295) ที่อยู่ติดกันเศษส่วนมีกิจกรรมน้อย (D: 187 มิลลิกรัม IC50 0.91 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรใน UO-31> 100 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรใน SF-295; F: 57 มิลลิกรัม IC50 14 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรใน UO-31> 100 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรใน SF-295) การฟื้นตัวของกิจกรรมทางชีวภาพถูกตัดสินที่ยอมรับภายในขอบเขตของความแม่นยำทดสอบ เพื่อป้องกันการสูญเสียของกิจกรรมในขั้นตอนต่อไป C18 HPLC เพื่อการทดลองนั้น 10 มิลลิกรัมส่วนที่ใช้งานจากส่วนแยกขนานจากเปลือกลำต้นถูกนำไปใช้กับ prewashed ตลับ Bondesil C18 SPE และชะกับCH3OH 50% CH3OH-บ่ายคล้อยแล้วบ่ายคล้อย เศษส่วนได้รับการทดสอบในการทดสอบการติดตามและ eluate เมทานอลถูกพบที่ใช้งานกับเซลล์UO-31 (IC50 0.03 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร) แต่ไม่ได้กับSF-295 เซลล์ (IC50> 100 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร) ในขณะที่ eluates THF อยู่ ทั้งหมดไม่ได้ใช้งานกับสายพันธุ์ของเซลล์อย่างใดอย่างหนึ่ง ส่วนผู้ปกครองที่ผ่านการทดสอบในตีคู่ก็ยังใช้งานมากกับ UO-31 แต่ไม่ SF-295 (IC50 ของ 0.04 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร> 100 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรตามลำดับ) นี้เป็นที่ยอมรับว่ามีฤทธิ์ทางชีวภาพสารที่อาจจะชะจากคอลัมน์ C18 และเงื่อนไขของการแยกไม่น่าที่จะปรับเปลี่ยนสารดังกล่าวในทางกิจกรรมที่จะถูกทำลาย